Fiziksel faktörlerin mikroorganizmalar üzerindeki etkisi. Çevre koşullarının mikroorganizmalar üzerindeki etkisi. Termal gıda işleme yöntemleri

Mikroorganizmaların ömrü koşullara yakından bağlıdır. çevre. Mikroorganizmaları etkileyen tüm çevresel faktörler üç gruba ayrılabilir: yararlı veya yıkıcı etkisi hem faktörün doğasına hem de mikroorganizmanın özelliklerine bağlı olan fiziksel, kimyasal ve biyolojik.

Fiziksel faktörler

Fiziksel faktörlerden sıcaklık, kurutma, radyan enerji ve ultrason mikroorganizmaların gelişimi üzerinde en büyük etkiye sahiptir.

Hava sıcaklığı. Her mikroorganizmanın yaşamsal aktivitesi belirli sıcaklık limitleri ile sınırlıdır. Bu sıcaklık bağımlılığı genellikle üç ana nokta ile ifade edilir: minimum - altında mikrobiyal hücrelerin üremesinin durduğu sıcaklık; optimum - mikroorganizmaların büyümesi ve gelişmesi için en iyi sıcaklık; maksimum - hücrelerin hayati aktivitesinin zayıfladığı veya durduğu sıcaklık. Optimum sıcaklık genellikle doğal habitatın sıcaklık koşullarına karşılık gelir.

Sıcaklıkla ilgili tüm mikroorganizmalar psikrofiller, mezofiller ve termofillere ayrılır.

Psikrofiller (Yunan psikrolarından - soğuk, phileo - aşk) veya soğuk seven mikroorganizmalar nispeten düşük sıcaklıklarda büyür: minimum sıcaklık 0 ° C, optimum 10-20 ° C, maksimum 30 ° C'dir. Bu grup, kuzey denizlerinde ve okyanuslarda, toprakta, kanalizasyonda yaşayan mikroorganizmaları içerir. Buna ışık ve demir bakterilerinin yanı sıra soğukta (0°C'nin altında) gıdaların bozulmasına neden olan mikroplar da dahildir.

Mezofiller (Yunanca mezos - orta) - çoğu saprofit ve tüm patojenik mikroorganizmalar dahil olmak üzere en geniş grup. Onlar için optimum sıcaklık 28-37°C, minimum 10°C, maksimum 45°C'dir.

Termofiller (Yunanca termos - ısı, ısı) veya ısı seven mikroorganizmalar, 55 ° C'nin üzerindeki sıcaklıklarda gelişir, onlar için minimum sıcaklık 30 ° C, optimum 50-60 ° C ve maksimum 70'dir. -75 ° C Sıcak mineralli kaynaklarda, toprağın yüzey tabakasında, kendi kendine ısınan substratlarda (gübre, saman, tahıl), insan ve hayvanların bağırsaklarında bulunurlar. Termofiller arasında birçok spor formu vardır.

Yüksek ve düşük sıcaklıkların mikroorganizmalar üzerinde farklı etkileri vardır. Bazıları yüksek sıcaklıklara daha duyarlıdır. Ayrıca, sıcaklık maksimumun ötesinde ne kadar yüksek olursa, hücre proteinlerinin denatürasyonu (pıhtılaşması) nedeniyle mikrobiyal hücrelerin ölümü o kadar hızlı gerçekleşir.

Mezofilik bakterilerin vejetatif formları 60°C sıcaklıkta 30-60 dakika içinde ve 80-100°C'de 1-2 dakika sonra ölür. Bakteri sporları yüksek sıcaklıklara çok daha dayanıklıdır. Örneğin, şarbon basil sporları 10-20 dakika kaynamaya ve Clostridium botulism sporları - 6 saat, 30 dakika boyunca 1 atm basınca (otoklavda) dayanır.

Yüksek sıcaklıkların mikroorganizmalar üzerindeki etkisi, sterilizasyonun temelidir - çeşitli nesnelerin mikroorganizmalardan ve sporlarından tamamen salınması (aşağıya bakınız).

Birçok mikroorganizma düşük sıcaklıklara son derece dayanıklıdır. Salmonella tifo ve Vibrio cholerae buzda uzun süre hayatta kalır. Bazı mikroorganizmalar sıvı hava sıcaklıklarında (-190°C) yaşayabilirken, bakteri sporları -250°C'ye kadar olan sıcaklıklara dayanabilir.

Yalnızca belirli patojenik bakteri türleri düşük sıcaklıklara duyarlıdır (örneğin, bordetella pertussis ve parapertussis, Neisseria meningococcus, vb.). Mikroorganizmaların bu özellikleri laboratuvar teşhislerinde dikkate alınır ve test malzemesinin nakliyesi sırasında - soğutmadan korunarak laboratuvara teslim edilir.

Düşük sıcaklıkların etkisi, gıdaları soğutma ünitelerinde, mahzenlerde ve buzullarda korumak için yaygın olarak kullanılan çürüme ve fermantasyon işlemlerini durdurur. 0 ° C'nin altındaki sıcaklıklarda, mikroplar askıya alınmış bir animasyon durumuna düşer - metabolik süreçlerde bir yavaşlama meydana gelir ve üreme durur. Ancak uygun sıcaklık koşulları ve bir besin ortamının varlığında mikrobiyal hücrelerin yaşamsal işlevleri geri yüklenir. Mikroorganizmaların bu özelliği, laboratuvar uygulamalarında mikrop kültürlerini düşük sıcaklıklarda korumak için kullanılır. Yüksek ve düşük sıcaklıklarda (donma ve çözülme) hızlı bir değişiklik de mikroorganizmalar üzerinde zararlı bir etkiye sahiptir - bu, hücre zarlarının yırtılmasına yol açar.

Kurutma. Mikroorganizmaların normal çalışması için su gereklidir. Kurutma, sitoplazmanın dehidrasyonuna, bütünlüğün bozulmasına yol açar Sitoplazmik membran Bunun sonucunda mikrobiyal hücrelerin beslenmesi bozulur ve ölümleri meydana gelir.

Kurutmanın etkisi altında farklı mikroorganizma türlerinin ölümünün zamanlaması önemli ölçüde farklıdır. Bu nedenle, örneğin, patojenik Neisseria (meningokok, gonokok), leptospira, soluk treponema ve diğerleri birkaç dakika sonra kurutulduğunda ölür. Vibrio cholerae 2 gün, salmonella tifo - 70 gün ve Mycobacterium tuberculosis - 90 gün kurumaya karşı dayanıklıdır. Ancak patojenlerin kuru bir protein kılıfı ile korunduğu tüberküloz hastalarının kuru balgamı 10 ay boyunca bulaşıcı kalır.

Sporlar özellikle kurumaya ve diğer çevresel etkilere karşı dirençlidir. Şarbon basillerinin sporları, 10 yıl boyunca çimlenme ve sporları küflenme yeteneğini 20 yıla kadar korur.

Kurutmanın mikroorganizmalar üzerindeki olumsuz etkisi, sebzeleri, meyveleri, etleri, balıkları ve şifalı bitkileri korumak için uzun süredir kullanılmaktadır. Aynı zamanda, bir kez yüksek nem koşullarında, bu tür ürünler, mikropların hayati aktivitesinin restorasyonu nedeniyle hızla bozulur.

Mikroorganizma kültürlerinin, aşıların ve diğer biyolojik preparatların saklanması için dondurarak kurutma yöntemi yaygın olarak kullanılmaktadır. Yöntemin özü, mikroorganizmaların veya müstahzarların önce dondurulması ve ardından vakum altında kurutulması gerçeğinde yatmaktadır. Aynı zamanda, mikrobiyal hücreler askıya alınmış bir animasyon durumuna girer ve biyolojik özelliklerini birkaç ay veya yıl boyunca korur.

radyan enerji. Doğada mikroorganizmalar sürekli olarak güneş ışınlarına maruz kalırlar. Doğrudan güneş ışığı, fotosentetik bakteriler (yeşil ve mor kükürt bakterileri) dışında birçok mikroorganizmanın birkaç saat içinde ölümüne neden olur. Güneş ışığının yıkıcı etkisi, ultraviyole ışınlarının (UV ışınları) aktivitesinden kaynaklanmaktadır. Hücre enzimlerini inaktive ederler ve DNA'ya zarar verirler. Patojenik bakteriler UV ışınlarına saprofitlerden daha duyarlıdır. Bu nedenle mikrobiyal kültürleri laboratuvarda karanlıkta saklamak daha iyidir. Buchner'ın deneyimi bu açıdan açıklayıcıdır.

İnce bir agar tabakasına sahip bir Petri kabında, herhangi bir bakteri kültürünün bol miktarda aşılanması gerçekleştirilir. Tohumlu kabın dış yüzeyinde, siyah kağıttan kesilen harfler yapıştırılır, örneğin "tifüs" kelimesini oluşturur. Ters çevrilmiş kap 1 saat boyunca doğrudan güneş ışığına maruz bırakılır, ardından kağıtlar çıkarılır ve kap bir gün boyunca 37 °C'lik bir termostata yerleştirilir. yapıştırılmış harflerle UV ışınlarından korunmuştur. Agarın geri kalanı temiz kalır, yani mikroorganizma üremesi yoktur (Şekil 11).

Dış ortamın iyileştirilmesinde doğal bir faktör olarak güneş ışığının önemi büyüktür. Havayı, suyu doğal rezervuarlardan, toprağın üst katmanlarını patojenik bakterilerden arındırır.

UV ışınlarının bakteri yok edici (bakteri yok edici) etkisi, kapalı havanın (ameliyathaneler, soyunma odaları, kutular, vb.) yanı sıra su ve sütü sterilize etmek için kullanılır. Lambalar bu ışınların kaynağıdır. morötesi radyasyon, mikrop öldürücü lambalar.

Diğer radyan enerji türleri - X-ışınları, α-, β-, γ-ışınları mikroorganizmalar üzerinde yalnızca büyük dozlarda, yaklaşık 440-280 J / kg zararlı bir etkiye sahiptir. Mikropların ölümü, nükleer yapıların ve hücresel DNA'nın yok edilmesinden kaynaklanmaktadır. Küçük dozlarda radyasyon, mikrobiyal hücrelerin büyümesini uyarır. Mikroorganizmalar radyoaktif radyasyona yüksek organizmalardan çok daha dirençlidir. Uranyum cevheri yataklarında yaşayan bilinen tiyonik bakteriler. Nükleer reaktörlerin suyunda 20-30 kJ/kg iyonlaştırıcı radyasyon konsantrasyonunda bakteri bulundu.

İyonlaştırıcı radyasyonun bakterisit etkisi, belirli gıda ürünlerini korumak, biyolojik preparatları (sera, aşılar vb.) sterilize etmek için kullanılırken sterilize edilecek malzemenin özellikleri değişmez.

AT son yıllar radyasyon yöntemi tek kullanımlık ürünleri sterilize eder - polistiren pipetler, Petri kapları, serolojik reaksiyonlar için kuyular, şırıngalar ve sütür malzemesi - katgüt, vb.

ultrason Mikrobiyal hücrelerde önemli hasara neden olur. Ultrason etkisi altında, sitoplazmanın sıvı ortamındaki gazlar aktive edilir ve hücre içinde yüksek basınç (10.000 atm'ye kadar) ortaya çıkar. Bu bir molaya yol açar hücre çeperi ve hücre ölümü. Ultrason, yiyecekleri (süt, meyve suları) sterilize etmek için kullanılır, içme suyu.

Yüksek basınç. Bakteriler ve özellikle sporları mekanik basınca dayanıklıdır. Doğada denizlerde ve okyanuslarda 1000-10000 m derinliklerde 100 ile 900 atm arasında basınç altında yaşayan bakteriler vardır. Bazı bakteri türleri 3000-5000 atm'ye kadar basınca ve bakteri sporlarına - hatta 20.000 atm'ye kadar dayanabilir.

Kimyasal Faktörler

Etkilemek kimyasal maddeler mikroorganizmalar üzerinde kimyasal bileşiğin doğasına, konsantrasyonuna, mikrobiyal hücrelere maruz kalma süresine bağlı olarak farklıdır. Konsantrasyona bağlı olarak, bir kimyasal madde bir besin kaynağı olabilir veya mikroorganizmaların hayati aktivitesi üzerinde iç karartıcı bir etkiye sahip olabilir. Örneğin, %0.5-2 glikoz solüsyonu mikropların büyümesini uyarır ve %20-40 glikoz solüsyonları mikrobiyal hücrelerin çoğalmasını geciktirir.

Mikroorganizmalar üzerinde zararlı etkisi olan birçok kimyasal bileşik tıbbi uygulamada dezenfektan ve antiseptik olarak kullanılmaktadır.

Dezenfeksiyon için kullanılan kimyasallara dezenfektan denir. Dezenfeksiyon, çeşitli çevresel nesnelerde patojenik mikroorganizmaların yok edilmesini amaçlayan önlemler olarak anlaşılmaktadır. Dezenfektanlar arasında halojen bileşikleri, fenoller ve bunların türevleri, ağır metal tuzları, bazı asitler, alkaliler, alkoller vb. bulunur. Belirli bir süre için optimal konsantrasyonlarda etki ederek mikrobiyal hücrelerin ölümüne neden olurlar. Birçok dezenfektan makro organizmanın dokuları üzerinde zararlı bir etkiye sahiptir.

Antiseptikler, mikroorganizmaların ölümüne neden olabilen veya büyümelerini ve üremelerini geciktirebilen kimyasal maddelerdir. Tedavi amaçlı (kemoterapi) ve ayrıca bir kişinin yaralarının, cildinin ve mukoza zarının dezenfeksiyonu için kullanılırlar. Hidrojen peroksit, iyot alkol çözeltileri, parlak yeşil, potasyum permanganat çözeltileri vb., antiseptik özelliklere sahiptir.İnsanlara zarar vermeyen dozlarda bazı antiseptik maddeler (asetik, kükürtlü, benzoik asitler vb.) Gıdaların korunması için kullanılır.

Etki mekanizmasına göre, antimikrobiyal aktiviteye sahip kimyasallar birkaç gruba ayrılabilir.

1. Sürfaktanlar (yağ asitleri, sabunlar ve diğer deterjanlar) yüzey geriliminde azalmaya neden olarak hücre duvarının ve mikroorganizmaların sitoplazmik membranının işleyişinin bozulmasına neden olur.

2. Fenol, kresol ve türevleri mikrobiyal proteinlerin pıhtılaşmasına neden olur. Mikrobiyolojik uygulamalarda ve enfeksiyon hastalıkları hastanelerinde bulaşıcı materyalin dezenfeksiyonu için kullanılırlar.

3. Mikrobiyal proteinlerle etkileşime giren oksitleyici ajanlar, enzimlerin aktivitesini bozar, protein denatürasyonuna neden olur. Aktif oksitleyici ajanlar, içme suyunu dezenfekte etmek için kullanılan klor, ozondur. Klor türevleri (klor, kloramin) dezenfeksiyon amacıyla yaygın olarak kullanılmaktadır. Oksitleyici özellikler hidrojen peroksit, potasyum permanganat, iyot vb.

4. Formaldehit, dezenfeksiyon için %40'lık bir solüsyon (formalin) olarak kullanılır. Mikroorganizmaların vejetatif ve spor formlarını öldürür. Formalin, mikrobiyal hücre proteinlerinin amino gruplarını bloke eder ve denatürasyonlarına neden olur.

5. Ağır metal tuzları (cıva, kurşun, çinko, altın vb.) mikrobiyal hücre proteinlerini pıhtılaştırarak ölümlerine neden olur. Bazı metallerin (gümüş, altın, cıva vb.) mikroorganizmalar üzerinde ihmal edilebilir konsantrasyonlarda bakterisit etkisi vardır. Bu özelliğe oligodinamik eylem denir (Latin oligos - küçük, dinamys - güçten). Gümüş iyonlarının bakterisit etkisi nedeniyle gümüş kaplardaki suyun çürümediği kanıtlanmıştır. Blennorrhea'nın önlenmesi için * yenidoğanlar uzun süredir% 1 gümüş nitrat çözeltisi kullanılmaktadır. kolloidal çözeltiler organik bileşikler gümüş (protargol, colgolgol) ayrıca yerel bir antiseptik olarak kullanılır.

* (Blennorrhea, gonokokların neden olduğu gözün konjonktiva iltihabıdır.)

Cıva müstahzarları güçlü bir antimikrobiyal etkiye sahiptir. Antik çağlardan beri, dezenfeksiyon için cıva biklorür veya süblimasyon (1:1000'lik bir seyreltmede) kullanılmıştır. Ancak makro organizmanın dokuları üzerinde toksik etkisi vardır ve kullanımı sınırlıdır.

6. Boyalar (parlak yeşil, rivanol vb.) bakteri üremesini engelleme özelliğine sahiptir. Bir dizi boyanın solüsyonları antiseptik olarak kullanılır ve ayrıca ilgili mikrofloranın büyümesini engellemek için bazı besin ortamlarına eklenir.

Bir dizi fiziksel ve kimyasal faktörün mikroorganizmalar üzerindeki yıkıcı etkisi, tıbbi ve sıhhi uygulamalarda yaygın olarak kullanılan aseptik ve antiseptik yöntemlerin temelini oluşturmaktadır.

Asepsi, fiziksel yöntemlere dayalı olarak bir nesnenin (yara, cerrahi alan, mikroorganizma kültürleri vb.) mikrobiyal kontaminasyonunu önleyen bir önleyici tedbirler sistemidir.

Antiseptikler - çeşitli dezenfekte edici kimyasallar kullanarak yaradaki, tüm vücuttaki veya çevresel nesnelerdeki mikroorganizmaların yok edilmesini amaçlayan bir dizi önlem.

biyolojik faktörler

Doğal habitat koşulları altında, mikroorganizmalar izole olarak var olmazlar, ancak esas olarak simbiyoz, metabiyoz ve antagonizma ile indirgenen karmaşık ilişkiler içindedirler.

Simbiyoz, farklı türlerin organizmalarının birlikte yaşaması ve onlara karşılıklı yarar sağlamasıdır. Aynı zamanda, birlikte, her birinden ayrı ayrı daha iyi gelişirler.

Nodül bakterileri ve baklagiller arasında, filamentli mantarlar ve mavi-yeşil algler (likenler) arasında simbiyotik ilişkiler vardır: Laktik asit bakterileri ve alkol mayasının simbiyozu, bazı laktik asit ürünlerini (kefir, kımız) hazırlamak için kullanılır.

Metabiyoz, bir mikroorganizma türünün metabolik ürünlerinin diğerlerinin gelişimi için gerekli koşulları yarattığı bir ilişki türüdür. Örneğin, parçalayan çürütücü mikroorganizmalar proteinler, çevrede amonyum bileşiklerinin birikmesine katkıda bulunur ve nitrifikasyon bakterilerinin büyümesi ve gelişmesi için uygun koşullar yaratır. Ve iyi havalandırılmış toprakta anaerobların gelişimi, serbest oksijeni emen aeroblar olmadan imkansız olurdu.

Metabiyotik ilişkiler toprak mikroorganizmaları arasında yaygındır ve doğadaki madde döngüsünün temelini oluşturur.

Antagonizma, bir mikroorganizmanın diğerinin gelişimini engellediği veya tamamen ölümüne neden olabileceği bir ilişki biçimidir. Varoluş mücadelesinde mikroorganizmalar arasında düşmanca ilişkiler gelişmiştir. Nerede yaşarlarsa yaşasınlar, besin kaynakları, hava oksijeni ve habitat için aralarında sürekli bir mücadele vardır. Bu nedenle, hastaların salgıları ile dış ortama (toprak, su) giren çoğu patojenik bakteri, çok sayıda saprofit ile uzun süreli rekabete dayanmaz ve nispeten hızlı bir şekilde ölür.

Antagonizma, mikroorganizmaların birbirleri üzerindeki doğrudan etkisine veya metabolik ürünlerinin etkisine bağlı olabilir. Örneğin, protozoa bakterileri yutarken, fajlar onları parçalar. Yenidoğanların bağırsaklarında laktik asit bakterileri Bifidobacterium bifidum bulunur. Laktik asit salgılayarak, paslandırıcı bakterilerin büyümesini baskılarlar ve böylece bebeklerin hala kırılgan organizmalarını bağırsak bozukluklarından korurlar. Bazı mikroorganizmalar, yaşam sürecinde bakteri ve diğer mikroplar üzerinde zararlı etkisi olan çeşitli maddeler üretir. Bu maddeler antibiyotikleri içerir (bkz. "Antibiyotikler").

sınav soruları

1. Mikroorganizmaların hayati aktivitesini hangi fiziksel faktörler etkiler?

2. Hangi maddeler dezenfektan olarak sınıflandırılır ve mikroorganizmalar üzerindeki etki mekanizmalarında nasıl farklılık gösterirler?

3. Mikroorganizmalar arasında var olan ilişkileri sıralayınız?

Sterilizasyon

Sterilizasyon umutsuzluktur, yani çevresel nesnelerin mikroorganizmalardan ve sporlarından tamamen salınmasıdır.

Sterilizasyon çeşitli şekillerde gerçekleştirilir:

1) fiziksel (yüksek sıcaklığa maruz kalma, UV ışınları, bakteri filtrelerinin kullanımı);

2) kimyasal (çeşitli dezenfektanların, antiseptiklerin kullanımı);

3) biyolojik (antibiyotik kullanımı).

Laboratuvar uygulamasında genellikle fiziksel sterilizasyon yöntemleri kullanılır.

Bir veya başka bir sterilizasyon yöntemini kullanma olasılığı ve uygunluğu, sterilize edilecek malzemenin özelliklerinden, fiziksel ve kimyasal özelliklerinden kaynaklanmaktadır.

Fiziksel yöntemler

Bir brülörün alevinde ateşleme veya alev alma, hem bitkisel hücreler hem de mikroorganizma sporları öldüğü için nesnenin tamamen ayrıştığı bir sterilizasyon yöntemidir. Genellikle kalsine edilmiş bakteriyolojik halkalar, spatulalar, pipetler, cam slaytlar ve lameller, küçük aletler. Makas ve neşterler, ateş etkisi altında kesme yüzeyi donuklaştığı için kalsinasyon ile sterilize edilmemelidir.

Kuru ısı sterilizasyonu

Pastör fırınlarda (kurutma fırınlarında) kuru ısı veya sıcak hava ile sterilizasyon yapılır. Pasteur fırın, ısıya dayanıklı malzemelerden (metal ve asbest) yapılmış çift duvarlı bir dolaptır. Kabini gaz brülörleri veya elektrikli ısıtıcılarla ısıtın. Elektrikli ısıtmalı dolaplar, gerekli sıcaklığı sağlayan regülatörlerle donatılmıştır. Sıcaklığı kontrol etmek için dolabın üst duvarındaki deliğe yerleştirilmiş bir termometre vardır.

Kuru ısı, esas olarak laboratuvar cam eşyalarını sterilize eder. Sterilizasyon için hazırlanan kaplar, sterilize edilecek malzemenin eşit ve güvenilir bir şekilde ısıtılmasını sağlamak için fırına gevşek bir şekilde yüklenir. Dolap kapağı sıkıca kapatılır, ısıtıcı çalıştırılır, sıcaklık 160-165 °C'ye getirilir ve bu sıcaklıkta 1 saat sterilize edilir.Sterilizasyon sonunda ısıtma kapatılır ancak dolap kapağı açılmaz. fırın soğuyana kadar açıldı; Aksi takdirde kabin içerisine giren soğuk hava, sıcak tabaklarda çatlamalara neden olabilir.

Pastör fırınında sterilizasyon farklı sıcaklık ve maruziyetlerde (sterilizasyon süresi) gerçekleştirilebilir (Tablo 1).

Sıvılar (besin ortamı, izotonik sodyum klorür çözeltisi, vb.), kauçuk ve sentetik malzemelerden yapılmış nesneler, sıvılar kaynayıp döküldüğünden ve kauçuk ve sentetik malzemeler eridiğinden kuru ısıyla sterilize edilemez.

Pasteur fırınında sterilizasyonu kontrol etmek için ipek iplikler spor oluşturan bakteri kültüründe nemlendirilir, kurutulur, steril bir Petri kabına yerleştirilir ve Pasteur fırınına yerleştirilir. 1 saat boyunca 165 °C sıcaklıkta sterilizasyon yapılır (kontrol için iplerin bir kısmı oda sıcaklığında bırakılır). Daha sonra sterilize edilmiş ve kontrol iplikleri bir Petri kabında agarın yüzeyine yerleştirilir veya et suyu ile test tüplerine yerleştirilir ve 2 gün boyunca 37°C sıcaklıkta bir termostatta inkübe edilir. Pasteur fırınının doğru çalışması ile steril ipliklerin yerleştirildiği test tüpleri veya besleyici ortamlı kaplarda bakteri sporları öleceğinden üreme olmayacak, sterilize edilmemiş iplikler üzerindeki bakteri sporları da (kontrol) olacaktır. Besin ortam büyümesi üzerinde çimlenme not edilecektir.

Pasteur fırınının içindeki sıcaklığı belirlemek için 165-170 °C sıcaklıkta karamelize edilmiş sakaroz veya yenilebilir toz şeker kullanabilirsiniz.

Pasteur fırınında sterilizasyon için laboratuvar cam eşyalarının hazırlanması. Sterilizasyondan önce laboratuvar kapları (Petri kapları, dereceli ve Pastör pipetleri, şişeler, şişeler, test tüpleri) iyice yıkanmalı, kurutulmalı ve kağıda sarılmalıdır, aksi takdirde sterilizasyondan sonra tekrar hava bakterileriyle kontamine olabilir.

Petri kapları bir veya daha fazla parça kağıda sarılır veya özel metal kasalara yerleştirilir.

Test materyalinin ağza girmesini önlemek için pipetlerin üst uçlarına pamuklu çubuklar yerleştirilir. Dereceli pipetler 4-5 cm genişliğinde uzun kağıt şeritlere sarılır.Sarılan pipetin hacmi kağıda not edilir. Bazı durumlarda, dereceli pipetler ek kağıt sarma olmadan sterilize edilir.

Not. Pipetlerdeki dereceler kötü görünüyorsa, sterilizasyondan önce geri yüklenir. Pipete yağlı boya sürülür ve boyanın kurumasına izin verilmeden bir bezle içine baryum sülfat tozu sürülür. Bundan sonra, fazla boya, yalnızca dereceli çentiklerde kalan bir bezle çıkarılır. Bu şekilde işlem gören pipetler durulanmalıdır.

Pasteur pipetlerinin keskin uçları brülör alevinde kapatılır ve her biri 3-5 parça olacak şekilde kağıda sarılır. Kapilerlerin kapalı uçlarını kırmamak için Pasteur pipetlerini dikkatlice sarın.

Şişeler, şişeler, test tüpleri pamuklu gazlı bez tıpalarla kapatılır. Mantar, boyunun 2/3'ü kadar teknenin boynuna oturmalı, çok sıkı değil, çok gevşek de olmamalıdır. Her bir kap için (test tüpleri hariç) mantarların üzerine bir kağıt kapak konur. Test tüpleri 5-50 parça halinde bağlanır ve kağıtla sarılır.

Not. Yüksek sıcaklıklarda, bardakların ve pipetlerin sarıldığı kağıt ve pamuk sararır ve hatta kömürleşebilir, bu nedenle laboratuvar tarafından elde edilen her yeni kağıt sınıfı kabul edilen sıcaklık rejiminde test edilmelidir.

sınav soruları

1. Sterilizasyon terimi ile ne kastedilmektedir?

2. Sterilizasyon yöntemleri nelerdir?

3. Ateşte kavurarak sterilize edilen nedir?

4. Pasteur fırınının cihazını ve çalışma modunu tanımlayın.

5. Pasteur fırınında ne sterilize edilir?

6. Cam eşyalar sterilizasyona nasıl hazırlanır?

7. Pasteur fırınında kültür ortamını ve kauçuk nesneleri sterilize etmek neden imkansız?

Egzersiz yapmak

Sterilizasyon için Petri kapları, dereceli pipetler, Pastör pipetleri, test tüpleri, şişeler ve şişeler hazırlayın.

Kaynatma ile sterilizasyon

Kaynatma, sterilize edilen malzemede spor olmaması koşuluyla sterilizasyonu garanti eden bir sterilizasyon yöntemidir. Aletlerin, cam ve metal kapların, kauçuk tüplerin vb. şırıngalarını işlemek için kullanılırlar.

Kaynatma sterilizasyonu genellikle bir sterilizatörde gerçekleştirilir - sıkı oturan bir kapağı olan dikdörtgen bir metal kutu. Sterilize edilecek malzeme sterilizatördeki file üzerine yerleştirilir ve su ile doldurulur. Kaynama noktasını yükseltmek ve su sertliğini ortadan kaldırmak için %1-2 sodyum bikarbonat ekleyin (damıtılmış su kullanmak daha iyidir). Sterilizatör bir kapakla kapatılır ve ısıtılır.Sterilizasyonun başlangıcı suyun kaynama anı olarak kabul edilir, kaynama süresi 15-30 dakikadır. Sterilizasyon sonunda aletli ağ, özel kancalarla yan tutamaklardan çıkarılır ve içindeki aletler, diğer aletlerle birlikte kaynatılan steril cımbız veya forseps ile alınır.

Buhar sterilizasyonu iki şekilde gerçekleştirilir: 1) basınç altında buhar; 2) akan buhar.

Buhar basıncı sterilizasyonu otoklavda üretilmiştir. Bu sterilizasyon yöntemi, doymuş su buharının, atmosferik basıncın üzerindeki bir basınçta sterilize edilmiş malzemeler üzerindeki etkisine dayanmaktadır. Bu sterilizasyonun bir sonucu olarak, tek bir tedavi sırasında mikroorganizmaların hem vejetatif hem de spor formları ölür.

Otoklav (Şek. 12) - dışta metal bir kasa ile kaplanmış, menteşeli cıvatalarla kazana sıkıca vidalanmış bir kapakla hava geçirmez şekilde kapatılmış büyük bir kazan. Dış kazana sterilizasyon odası adı verilen daha küçük bir çap daha yerleştirilir. Sterilize edilecek eşyalar bu hazneye yerleştirilir. Her iki kazan arasında su-buhar odası adı verilen boş bir alan vardır. Bu hazneye, özel bir su ölçüm tüpü üzerinde işaretlenmiş, dışarıdan belirli bir seviyeye sabitlenmiş bir huni vasıtasıyla su dökülür. Bir buhar odasında su kaynatıldığında buhar üretilir. Sterilizasyon odası, basınç gerekli seviyenin üzerine çıktığında buharın çıkması için bir emniyet valfli bir çıkış musluğu ile donatılmıştır. Sterilizasyon haznesinde oluşan basıncı belirlemek için manometre kullanılır.

Pirinç. 12. Otoklavın şeması. M - basınç göstergesi; PC - emniyet valfi; B - su için huni; K 2 - su tahliyesi için musluk; K 3 - buhar çıkışı için dokunun

Normal atmosfer basıncı (760 mm Hg) sıfır olarak alınır. Basınç göstergesi okumaları ile sıcaklık arasında belirli bir ilişki vardır (Tablo 2).

Otomatik mod kontrollü otoklavlar artık mevcuttur. Normal manometreye ek olarak, basıncın yukarıda yükselmesini önleyen bir elektrokontakt manometre ile donatılmıştır. set değeri ve böylece otoklavda istenen sıcaklığın sabit kalmasını sağlar.

Çeşitli besin ortamları (doğal proteinler içerenler hariç), sıvılar (izotonik sodyum klorür çözeltisi, su vb.) basınç altında buharla sterilize edilir; aletleri, özellikle kauçuk parçaları olanlarda.

Besin ortamının otoklavlanmasının sıcaklığı ve süresi, besin ortamının hazırlanması için tarifte belirtilen bileşimlerine göre belirlenir. Örneğin basit besiyerleri (et-pepton agar, et-pepton suyu) 120 °C'de (1 atm) 20 dakika sterilize edilir. Bununla birlikte, bu sıcaklıkta, doğal proteinler, karbonhidratlar ve ısıtma ile kolayca değiştirilebilen diğer maddeleri içeren ortamları sterilize etmek mümkün değildir. Karbonhidratlı ortamlar fraksiyonel olarak 100°C'de veya bir otoklavda 112°C'de (0,5 atm) 10-15 dakika sterilize edilir. Çeşitli sıvılar, lastik hortumlu cihazlar, tapalar, bakteri mumları ve filtreleri 120 °C'de (1 atm) 20 dakika sterilize edilir.

Dikkat! Otoklavlarda, enfekte olmuş malzeme de nötralize edilir. Mikroorganizma kültürlerini içeren kaplar ve test tüpleri, buhar geçirgenliği için kapağında delik olan özel metal kova veya tanklara yerleştirilerek otoklavda 126°C'de (1.5 atm) 1 saat sterilize edilir.Aletler çalıştıktan sonra aynı şekilde sterilize edilir. tartışma yaratan bakterilerle.

Otoklavla yalnızca özel olarak eğitilmiş ve cihaza ekli talimatlarda belirtilen kurallara kesinlikle ve doğru bir şekilde uyması gereken kişilerin çalışmasına izin verilir.

otoklavlama tekniği. 1. Çalışmadan önce, tüm parçaların servis verilebilirliğini ve muslukların alıştırma durumunu kontrol edin.

2. Kazanın dışına sabitlenmiş bir huni ile su (damıtılmış veya kaynatılmış) su göstergesi camının üst işaretine kadar kireç oluşmayacak şekilde dökülür. Huninin altındaki musluk kapalı.

3. Steril edilecek malzeme sterilizasyon haznesindeki özel bir ağ üzerine yerleştirilir. Eşyalar çok sıkı yüklenmemelidir, çünkü aralarından buhar serbestçe geçmelidir, aksi takdirde doğru sıcaklığa kadar ısınmazlar ve steril olmayabilirler.

4. Kapaktaki kauçuk conta, daha iyi sızdırmazlık için tebeşirle ovulur.

5. Kapak kapatılır ve otoklavın gövdesine cıvatalanır ve cıvatalar çapraz olarak çiftler halinde bükülür.

6. Sterilizasyon odasını dış havaya bağlayan egzoz musluğunu tamamen açın ve otoklavı ısıtmaya başlayın. Otoklav genellikle gaz veya elektrikle ısıtılır.

Otoklav ısıtıldığında, su kaynar, ortaya çıkan buhar, kazanların duvarları arasında ve iç kazanın duvarındaki özel deliklerden yükselir (bkz. Şekil 12), sterilizasyon odasına girer ve açık çıkış musluğundan çıkar. İlk olarak, buhar otoklavda bulunan hava ile birlikte dışarı çıkar. Otoklavdaki tüm havanın dışarı atılması önemlidir, aksi takdirde basınç göstergesi okuması otoklavdaki sıcaklığa karşılık gelmeyecektir.

Sürekli güçlü bir buhar jetinin görünümü, havanın otoklavdan tamamen çıkarıldığını gösterir; bundan sonra çıkış musluğu kapatılır ve otoklav içindeki basınç kademeli olarak yükselmeye başlar.

7. Sterilizasyonun başlangıcı, basınç göstergesi okumalarının belirtilen değere ulaştığı an olarak kabul edilir. Isıtma, otoklavdaki basıncın belirli bir süre değişmemesi için düzenlenir.

8. Sterilizasyon süresi geçtikten sonra otoklavın ısınması durdurulur, çıkış musluğundan buhar serbest bırakılır. Manometre ibresi sıfıra düştüğünde kapağı açın. Otoklavda kalan buharın yanmasını önlemek için kapağı kendinize doğru açın.

Otoklavdaki sıcaklık seviyesi, yani manometrenin doğruluğu kontrol edilebilir. Bunun için belirli bir erime noktasına sahip çeşitli maddeler kullanılır: antipirin (113 ° C), resorsinol ve kükürt (119 ° C), benzoik asit (120 ° C). Bu maddelerden biri ihmal edilebilir miktarda boya (macenta veya metilen mavisi) ile karıştırılır ve sterilize edilecek malzeme arasına dik konumda yerleştirilmiş ve sızdırmazlığı sağlanmış bir cam tüpe dökülür. Sıcaklık yeterliyse, madde eriyecek ve ilgili boyanın rengine dönüşecektir.

Sterilizasyonun etkinliğini kontrol etmek için otoklava, bilinen bir spor kültürüne sahip bir test tüpü yerleştirilir. Otoklavlamadan sonra tüp 24-48 saat bir termostata aktarılır, büyümenin yokluğu veya varlığı not edilir. Büyüme olmaması, cihazın doğru çalıştığını gösterir.

Buharlı Sterilizasyon Koch aparatında üretilmiştir. Bu yöntem, sterilize edilecek nesnenin 100 °C'nin üzerindeki bir sıcaklıkta değiştiği durumlarda kullanılır. Akışkan buhar, üre, karbonhidrat, süt, patates, jelatin vb. içeren besin ortamlarını sterilize eder.

Koch aparatı (kazan), dış tarafı (ısı transferini azaltmak için) keçe veya asbest ile kaplanmış metal bir silindirdir. Silindir, buharın çıkması için bir delik bulunan konik bir kapakla kapatılmıştır. Silindirin içinde, suyun döküldüğü seviyeye kadar bir stand vardır. Sterilize edilecek malzemenin yerleştirildiği standın üzerine delikli bir kova yerleştirilir. Koch cihazı gaz veya elektrikle ısıtılır. Sterilizasyon süresi, kapağın kenarlarında ve buhar çıkışından buharın kuvvetli bir şekilde serbest bırakıldığı andan itibaren sayılır. 30-60 dakika sterilize edin. Sterilizasyon sonunda ısıtma durdurulur. Malzemenin bulunduğu kova aparattan çıkarılır ve ertesi güne kadar oda sıcaklığında bırakılır. Isınma, 30-60 dakika boyunca 100 ° C sıcaklıkta 3 gün üst üste gerçekleştirilir. Bu yönteme fraksiyonel sterilizasyon denir. İlk ısıtma sırasında mikropların vejetatif formları ölürken spor formları kalır. Gün boyunca, sporların çimlenmek ve sterilizasyonun ikinci gününde ölen vejetatif formlara dönüşmek için zamanları vardır. Bazı sporların filizlenecek zamanı olmadığı için malzeme 24 saat daha tutulur ve ardından üçüncü bir sterilizasyon gerçekleştirilir. Koch aparatında akan buharla sterilizasyon, özel kontrol gerektirmez, çünkü hazırlanan besin ortamının sterilliği, cihazın doğru çalıştığının bir göstergesi olarak hizmet eder. Buhar sterilizasyonu, kapak vidasız ve çıkış musluğu açıkken bir otoklavda da yapılabilir.

sınav soruları

1. Hangi kültür ortamları buharla sterilize edilir?

2. Sterilizatör nedir ve nasıl çalışır?

3. Kaynatma sterilizasyonu için neden damıtılmış su kullanılmalıdır?

4. Otoklavın cihazını ve çalışma modunu tanımlayın.

5. Otoklavda ne sterilize edilir?

6. Otoklavlamada doğru sterilizasyonu ne kontrol eder?

7. Buhar sterilizasyonu nedir?

8. Koch aparatının cihazını tanımlayın.

9. Fraksiyonel sterilizasyonun amacı nedir?

Egzersiz yapmak

Formu doldur.

Fraksiyonel sterilizasyon, bir Koch koyler içinde de gerçekleştirilebilir.

Koch Pıhtılaştırıcı, peynir altı suyu ve yumurta besin ortamını pıhtılaştırmak için kullanılır ve ortamın sıkıştırılmasıyla aynı anda sterilize edilir.

Koch sarıcı Dışı ısı yalıtım malzemesi ile kaplanmış çift cidarlı düz metal bir kutudur. Dış duvarın üst kısmında bulunan özel bir delikten duvarlar arasındaki boşluğa su dökülür. Delik, içine bir termometrenin yerleştirildiği bir tıpa ile kapatılır. Cihazı iki kapakla kapatın: cam ve metal. Cam kapak sayesinde pıhtılaşma sürecini gözlemleyebilirsiniz. Ortamlı test tüpleri, eğik bir konumda koylerin altına yerleştirilir.

Bobinin ısıtılması gaz veya elektrik kullanılarak gerçekleştirilir. Ortamlar bir kez 90 °C sıcaklıkta 1 saat veya fraksiyonel olarak - 3 gün üst üste 80 °C'de 1 saat sterilize edilir.

Tyndallization* - düşük sıcaklıklarda fraksiyonel sterilizasyon - 60 ° C sıcaklıkta kolayca yok edilen ve denatüre olan maddeler için kullanılır (örneğin, protein sıvıları). Sterilize edilecek malzeme bir su banyosunda veya özel cihazlar termostatlarla, arka arkaya 5 gün boyunca bir saat boyunca 56-58 ° C sıcaklıkta.

* (Sterilizasyon yöntemi, onu öneren Tyndall'ın adını almıştır.)

pastörizasyon- Pasteur tarafından mikropların spor olmayan formlarının yok edilmesi için önerilen 65-70 °C'de 1 saat sterilizasyon. Süt, şarap, bira, meyve suları ve diğer ürünleri pastörize edin. Süt, laktik asit ve patojen bakterilerden (Brucella, Mycobacterium tuberculosis, Shigella, Salmonella, Staphylococcus vb.) kurtulmak için pastörize edilir. Biranın pastörizasyonu, meyve suları, şarap, çeşitli fermantasyon türlerine neden olan mikroorganizmaları öldürür. Pastörize gıdalar en iyi buzdolabında saklanır.

sınav soruları

1. Koch koylerin amacı ve cihazı nedir?

2. Kolerdeki sterilizasyon yöntemleri nelerdir?

3. Tindalizasyon nedir?

4. Pastörizasyon nedir?

Ultraviyole ışınlama ile sterilizasyon

UV ışınlarıyla sterilizasyon, özel kurulumlar - bakterisit lambalar kullanılarak gerçekleştirilir. UV ışınları yüksek antimikrobiyal aktiviteye sahiptir ve sadece bitkisel hücrelerin değil sporların da ölümüne neden olabilir. UV ışınlaması hastanelerde, ameliyathanelerde, çocuk kurumlarında vb. havayı sterilize etmek için kullanılır. Bir mikrobiyoloji laboratuvarında, çalışmadan önce bir kutu UV ışınlarıyla tedavi edilir.

sınav soruları

1. Ultraviyole ışınlarının özellikleri nelerdir?

2. Ultraviyole radyasyonla sterilizasyon hangi durumlarda kullanılır?

Bakteri filtreleri ile mekanik sterilizasyon

Filtrasyon sterilizasyonu, sterilize edilecek nesnelerin ısıtıldığında değiştiği durumlarda kullanılır. Filtrasyon, çeşitli ince gözenekli malzemelerden yapılmış bakteri filtreleri kullanılarak gerçekleştirilir. Filtrelerin gözenekleri, bakterilerin mekanik olarak tutulmasını sağlamak için yeterince küçük (1 µm'ye kadar) olmalıdır, bu nedenle bazı yazarlar filtrasyonun mekanik bir sterilizasyon yöntemi olduğunu düşünmektedir.

Filtrasyon yöntemi, protein, serum, bazı antibiyotikler içeren besin ortamlarını sterilize eder ve ayrıca bakterileri virüslerden, fajlardan ve ekzotoksinlerden ayırır.

Mikrobiyolojik uygulamada Seitz asbest filtreler, membran filtreler ve Chamberlan ve Berkefeld filtreler (mumlar) kullanılmaktadır.

Seitz filtreleri, asbest ve selüloz karışımından yapılmış disklerdir. Kalınlıkları 3-5 mm, çapları 35-140 mm'dir. Yerli sanayi iki dereceli filtreler üretir: "F" (filtreleme) - asılı parçacıkları tutan, ancak bakterileri geçen; "SF" (sterilizasyon) - daha küçük gözenekli, bakterileri tutan, ancak virüsleri geçen. Buruşuk asbest plakalarının yanı sıra kırık ve çatlaklı plakalar iş için uygun değildir.

Membran filtreler nitroselülozdan yapılır. 0.1 mm kalınlığında ve 35 mm çapında beyaz disklerdir. Gözenek boyutuna bağlı olarak, 1, 2, 3, 4 ve 5 olarak adlandırılırlar (Tablo 3).

1 numaralı filtre, sterilizasyon için en uygun olanıdır.Listelenenlere ek olarak, filtrelenmiş sıvıyı içinde bulunan büyük parçacıklardan arındırmak için tasarlanmış ön filtre de üretirler.

Chamberlant ve Berkefeld filtreleri (mumlar) bir ucu kapalı içi boş silindirlerdir. Chamberlain mumları, kum ve kuvars ile karıştırılmış kaolinden yapılır. Gözenek boyutuna göre standardize edilirler ve L 1 , L 2 , L 3 ... L 13 olarak gösterilirler. Berkefeld filtreleri (mumlar) infüzör toprağından hazırlanır, 3-4, 4-7, 8-12 mikron gözenek çapına karşılık gelen gözeneklerin boyutuna göre V, N, W olarak adlandırılırlar.

Bakteri filtreleri ile çalışma aşağıdaki gibi yapılır. Filtre, filtre alıcısına yerleştirilen özel bir tutucuya sabitlenmelidir. Alıcı genellikle bir Bunsen şişesidir. Çoğu durumda paslanmaz çelikten yapılmış tutucular iki parçadan oluşur: alt kısmı olmayan bir silindir şeklinde olan üst kısım ve alt kısım, bir boru ile biten destekleyici kısım. Seitz filtreleri, pürüzlü yüzeyi yukarı gelecek şekilde metal ızgara üzerine yerleştirilir ve tutucunun üst ve alt kısmı arasına sıkıca vidalanır. Monte edilmiş filtre, Bunsen şişesinin boynuna yerleştirilmiş kauçuk bir tıpa içine sabitlenmiştir. Bir vakum pompasına bağlı olan şişenin çıkış borusuna bir pamuklu çubuk sokulur. Hazırlanan tesisat kağıda sarılır ve otoklavda 1 atm basınçta 20-30 dakika sterilize edilir. Birleştirilmiş biçimdeki tüm cihaza Seitz filtresi de denir (Şekil 13).

Filtrasyondan hemen önce, Bunsen şişesinin çıkış ucu, bir yağ veya su püskürtme pompasına bir lastik boru ile bağlanır. Sızdırmazlık oluşturmak için çeşitli parçaların birleşim yerleri parafin ile doldurulur. Filtre edilecek sıvı aparatın silindirine dökülür ve alıcıda vakum oluşturmak için pompa çalıştırılır. Oluşan basınç farkı sonucunda filtre edilen sıvı filtre gözeneklerinden alıcıya geçer ve mikroplar filtre yüzeyinde kalır.

Membran filtreler kullanımdan önce distile suda kaynatılarak sterilize edilir. Filtrelerin bükülmemesi için önce distile suya konur, 50-60 °C'ye ısıtılır ve 2-3 kez suyu değiştirilerek 30 dakika kısık ateşte kaynatılır. Filtre tutucu ve alıcı önceden sterilize edilir, cihaz aseptik koşullar altında monte edilir. Metal ağ üzerindeki membran filtrenin yırtılmaması için altına steril filtre kağıdından halkalar yerleştirilir. Ardından pürüzsüz uçlu steril cımbızla membran filtreyi sterilizatörden alın ve parlak yüzeyi aşağıda olacak şekilde destek ızgarasına yerleştirin.

Bir otoklavda sterilize edilen mumlar (Chamberlant), bir kauçuk tüp vasıtasıyla bir alıcıya bağlanır ve filtrelenmiş bir sıvı ile bir kaba (genellikle bir silindir) indirilir. Filtreleme, bir vakum pompası kullanılarak gerçekleştirilir. Alıcıya steril bir süzüntü girer ve bakteriler mumun gözenekleri tarafından tutulur.

Membran ve asbest filtreleri tek kullanımlık olarak tasarlanmıştır. Mumlar kullanıldıktan sonra musluk suyunda kaynatılır, ardından kül fırınında kalsine edilir.

Sonraki kullanımdan önce mumlar bütünlük açısından kontrol edilir. Mum su dolu bir kaba indirilir ve içinden hava geçirilir. Mum yüzeyinde hava kabarcıkları oluşursa mumda çatlaklar oluşmuştur ve mum kullanılamaz hale gelmiştir.

sınav soruları

1. Filtre sterilizasyon yöntemi nedir? Bu yöntemle ne sterilize edilir?

2. Hangi bakteri filtrelerini biliyorsunuz? Filtreleme cihazı nasıl monte edilir, hangi koşullara uyulmalıdır?

kimyasal yöntemler

Bu tip sterilizasyon sınırlı ölçüde kullanılır ve esas olarak besin ortamının ve immünobiyolojik preparatların (aşılar ve serum) bakteriyel kontaminasyonunu önlemeye hizmet eder.

Kloroform, toluen ve eter gibi maddeler çoğunlukla besin ortamına eklenir. Ortamı bu koruyuculardan arındırmak gerekirse 56°C'de su banyosunda ısıtılır (koruyucular buharlaşır).

Aşıların muhafazası için serum, mertiolat, borik asit, formalin vb.

biyolojik sterilizasyon

Biyolojik sterilizasyon, antibiyotik kullanımına dayanmaktadır. Bu yöntem virüslerin yetiştirilmesinde kullanılır.

sınav soruları

1. Kimyasal sterilizasyon nedir ve ne zaman kullanılır?

2. Biyolojik sterilizasyon nedir?

Ana sterilizasyon yöntemleri tabloda sunulmaktadır. 4.

1 (Sterilizasyon eksik: sterilize edilen materyalde sporlar kalıyor.)

2 (Sterilizasyon eksik: virüsler sterilize edilen malzemede kalıyor.)

dezenfeksiyon

Mikrobiyolojik uygulamada çeşitli dezenfektanlar kullanılmaktadır: %3-5 fenol çözeltileri, %5-10 Lysol çözeltileri, %1-5 kloramin çözeltileri, %3-6 hidrojen peroksit çözeltileri, %1-5 formalin çözeltileri, seyreltme 1: süblimasyon çözeltileri: 1000 (%0,1), 70° alkol, vb.

Harcanan patolojik materyal (irin, dışkı, idrar, balgam, kan, beyin omurilik sıvısı) kanalizasyona boşaltılmadan önce dezenfekte edilir. Dezenfeksiyon kuru ağartıcı veya %3-5 kloramin solüsyonu ile yapılır.

Patolojik materyal veya mikroorganizma kültürleri (dereceli ve Pasteur), cam spatulalar, lamlar ve lamellerle kontamine olmuş pipetler, bir gün boyunca %3 fenol veya hidrojen peroksit çözeltisi ile cam kavanozlara daldırılır.

Enfeksiyöz malzeme ile çalışmanın tamamlanmasının ardından, laboratuvar asistanı işyerini ve ellerini dezenfektan bir solüsyonla tedavi etmelidir. Masaüstünün yüzeyi %3 fenol solüsyonuyla nemlendirilmiş bir parça pamukla silinir. Eller %1 kloramin solüsyonu ile dezenfekte edilir. Bunu yapmak için, bir pamuğu veya gazlı bezi dezenfektan solüsyonuyla nemlendirin ve önce sol eli, sonra sağ eli silin ve ardından ellerini ılık su ve sabunla yıkayın.

Dezenfektan seçimi, konsantrasyonu ve maruz kalma süresi (maruz kalma), mikropun biyolojik özelliklerine ve dezenfektanın patojenik mikroorganizmalarla temasının gerçekleşeceği ortama bağlıdır. Örneğin, süblimasyon, fenol, alkoller, protein substratlarının (irin, kan, balgam) dezenfeksiyonu için uygun değildir, çünkü etkileri altında protein pıhtılaşması meydana gelir ve pıhtılaşmış protein, mikroorganizmaları dezenfektanlara maruz kalmaktan korur.

Mikroorganizmaların spor formlarıyla enfekte olmuş materyali dezenfekte ederken, %5'lik bir kloramin çözeltisi, %1-2.5'lik aktif kloramin çözeltileri, %5-10 formalin çözeltileri ve diğer maddeler kullanılır.

Çalışma sırasında gün boyunca gerçekleştirilen dezenfeksiyona akım ve işin sonunda - nihai denir.

Dezenfektanlar ve onlardan çalışma solüsyonlarının hazırlanması için reçeteler. Klor kireci, güçlü bir klor kokusu olan beyaz pütürlü bir tozdur, suda tamamen çözünmez. Bakterisidal etki, miktarı %28 ila 36 arasında değişen aktif klor içeriğine bağlıdır. %25'ten az aktif klor içeren çamaşır suyu dezenfeksiyon için uygun değildir.

Yanlış depolanırsa, ağartıcı ayrışır ve aktif klorun bir kısmını kaybeder. Ayrışma ısı, nem, güneş ışığı ile kolaylaştırılır, bu nedenle ağartıcı kuru ve karanlık bir yerde, sıkıca kapatılmış bir kapta saklanmalıdır.

Kuru ağartıcı, insan ve hayvanların dışkılarını dezenfekte etmek için kullanılır (1 litre dışkı başına 200 g ve 1 litre idrar başına 10 g oranında).

İlk %10 berraklaştırılmış ağartma çözeltisinin hazırlanması. 1 kg kuru çamaşır suyu alın, emaye bir kovaya koyun ve öğütün. Daha sonra 10 litre hacme kadar soğuk su dökün, iyice karıştırın, bir kapakla örtün ve bir gün serin bir yerde bırakın. Bundan sonra, elde edilen %10 berraklaştırılmış çözelti dikkatlice boşaltılır ve birkaç kat gazlı bezden süzülür veya yoğun bir bezden süzülür. Ahşap bir tıpa ile kapatılmış koyu renkli cam şişelerde, serin bir yerde, en fazla 10 gün saklayın. Gerekli konsantrasyondaki çalışma çözeltileri, kullanımlarından hemen önce ana çözeltiden hazırlanır. % 0,2-10 oranında berraklaştırılmış ağartıcı çözeltilerinin hazırlanması için gereken bazik çözelti miktarı tabloda verilmiştir. 5.

Arıtılmış ağartma solüsyonlarının konsantrasyonu, dezenfekte edilecek nesnenin doğasına ve patojenin direncine bağlı olarak %0,2 ila %10 arasında seçilir.

kloramin - kristal madde beyaz veya sarımsı renkli, %24-28 aktif klor içerir. Oda sıcaklığında suda iyi çözünür, bu nedenle solüsyonları dezenfeksiyondan hemen önce hazırlanır. %0,2-10 kloramin solüsyonları kullanın. Solüsyonun yüzde konsantrasyonu ile 1 ve 10 litre başına gram cinsinden kloramin miktarı arasındaki oran tabloda verilmiştir. 6.

Kloramini bir cam veya emaye kapta eritin. Kloramin çözeltilerini zemin tıpalı koyu cam bir kapta saklarken, aktiviteleri 15 güne kadar devam eder.

aktif kloramin. Kloraminin dezenfekte edici özellikleri, ona 1:1 veya 1:2 oranında bir aktivatör eklenerek arttırılır. Aktivatör olarak amonyum bileşikleri - klorür, sülfat, amonyum nitrat - kullanılır. Aktif kloramin %0.5, 1 ve %2.5 konsantrasyonda kullanılır. Kullanmadan hemen önce bunları hazırlayın. Kloramin ve amonyum tuzu ayrı ayrı tartılır. Önce kloramin suda çözülür ve ardından aktivatör eklenir.

Aktif kloramin solüsyonlarının geleneksel olanlara göre avantajı, bir aktivatör eklendiğinde aktif klor salınımının hızlanmasıdır. Bu nedenle, ilacın sadece mikroorganizmaların vejetatif formları üzerinde değil, aynı zamanda sporları üzerinde de zararlı bir etkisi vardır. Aktif kloramin, daha düşük konsantrasyonlarda ve daha düşük maruziyette kullanılır.

Fenol (karbolik asit), keskin bir karakteristik kokuya sahip renksiz iğne şeklinde kristallerdir. Işık, hava ve nemin etkisi altında kristaller koyu kırmızı bir renk alır. Kapalı koyu cam kavanozlarda ve ışıktan korunan bir yerde saklayın.

Fenol suda, alkolde, eterde, yağlı yağlarda çözünür. Yüksek higroskopikliğe sahip olduğu için ortamdaki nemi emer ve sıvı hale gelir. Sıvı karbolik asit, %90 kristal fenol ve %10 su içerir.

%3-5 uygula sulu çözeltiler tabloda gösterilen şemaya göre kristalli fenol ve sıvı karbolik asitten hazırlanan karbolik asit. 7. Fenol sıcak suda (40-50 °C) çözündüğünde aktivitesi artar.

Dikkat! Cilde bulaşan kristalli fenol veya sıvı karbolik asit cilt tahrişine ve yüksek konsantrasyonlarda ciddi yanıklara neden olabilir. Bu nedenle, karbolik asit çok dikkatli kullanılmalıdır. Çözelti yaparken lastik eldiven giyin veya aşırı durumlarda ellerinizi petrol jölesi ile yağlayın.

Karbolik asit cilt ile temas ederse hemen ılık su ve sabun veya 40 ° etil alkol ile yıkayın.

Not. Fenolün dezenfektan çözeltilerinin hazırlanması için sıvı karbolik asit kullanmak daha uygun ve daha güvenlidir.

sınav soruları

1. Mikrobiyolojik uygulamada hangi dezenfektanlar kullanılır?

2. Tanımlayın görünüm ve ağartıcı, kloramin, fenolün ana özellikleri.

3. Mikroorganizmaların spor formlarıyla enfekte olan materyali dezenfekte etmek için hangi dezenfektan solüsyonları kullanılır?

Egzersiz yapmak

2 litre %5'lik çalışan bir berrak ağartıcı çözeltisi hazırlayın; 500 ml %3 kloramin solüsyonu, 300 ml %1 aktif kloramin solüsyonu.

Dikkat! Çözümleri hazırlamaya başlamadan önce hesaplamaları yapın.

Mikroorganizmaların hayati aktivitesi, varoluş koşullarına bağlıdır. Varlıkları için elverişli koşullar nem, ısı ve besinlerin varlığıdır. Kurutma, asidik ortam, düşük sıcaklıklar, besin eksikliği vb. mikroorganizmaların gelişimini engeller.Mikropların varoluş koşullarını yapay olarak düzenleyerek, üremelerini durdurabilir veya onları yok edebilirsiniz.

Çoğu gıda ürünü, mikropların varlığı için kimyasal olarak uygun ortamlardır. Bu nedenle gıda ürünleri sadece mikroorganizmalar için uygun olmayan koşullarda saklanabilir. Fiziksel çevre faktörlerinin mikroorganizmalar üzerindeki etkisinden bahsetmişken, onların gelişimini etkileyen çevresel koşulları kasteder ve onları fiziksel, kimyasal ve biyolojik olmak üzere üç ana gruba ayırır. Fiziksel koşullar (faktörler) şunları içerir: sıcaklık, ortamın nemi, ortamda çözünen maddelerin konsantrasyonu; radyasyon.

Sıcaklığın mikroorganizmalar üzerindeki etkisi.

Tüm mikroorganizmaların gelişimi belirli bir sıcaklıkta mümkündür. Düşük (-8°C ve altı) ve yüksek sıcaklık koşullarında bulunabilen mikroorganizmalar bilinmektedir, örneğin, kaplıca sakinleri 80-95°C sıcaklıkta yaşamsal aktiviteyi destekler. Çoğu mikrop 15-35°C sıcaklık limitlerini tercih eder. Ayırmak:

• gelişme için en uygun, en uygun sıcaklık;
• belirli bir türün mikroplarının gelişiminin durduğu maksimum;
• minimum, altında mikroplar gelişmeyi durdurur.

Sıcaklık seviyesi ile ilgili olarak, mikroorganizmalar üç gruba ayrılır:

• psikrofitler - düşük sıcaklıklarda iyi büyür,
• mezofiller - normalde orta sıcaklıklarda bulunur,
• termofiller - sürekli yüksek sıcaklıklarda bulunur.

Mikroplar, sıcaklıktaki önemli değişikliklere nispeten hızlı bir şekilde uyum sağlar. Bu nedenle, sıcaklık seviyesindeki hafif bir düşüş veya artış, mikroorganizmaların gelişiminin durmasını garanti etmez.

Yüksek sıcaklıkların etkisi.

Maksimumdan çok daha yüksek sıcaklıklar mikroorganizmaların ölümüne neden olur. Suda, çoğu bitkisel bakteri formu 60°C'ye ısıtıldığında bir saat içinde ölür; 70°C'ye kadar - 10-15 dakikada, 100°C'ye kadar - birkaç saniyede. Havada, mikroorganizmaların ölümü çok daha yüksek bir sıcaklıkta gerçekleşir - 170 ° C'ye kadar ve 1-2 saat içinde. Bakterilerin spor formları ısıya çok daha dayanıklıdır, 4-5 saat kaynamaya dayanabilirler.

Pastörizasyon ve sterilizasyon yöntemleri, mikropların yüksek sıcaklıkların etkisi altında ölme kabiliyetine dayanmaktadır. Pastörizasyon - 60-90 ° C sıcaklıkta gerçekleştirilir, hücrelerin vejetatif formları ölür ve spor hücreleri canlı kalır. Bu nedenle pastörize ürünler hızlı bir şekilde soğutulmalı ve soğuk koşullarda saklanmalıdır. Sterilizasyon, sporlar da dahil olmak üzere her türlü mikroorganizmanın tamamen yok edilmesidir. Sterilizasyon 110-120°C sıcaklıkta ve yüksek basınçta gerçekleştirilir.

Ancak sporlar anında ölmezler. 120°C'de bile ölümleri 20-30 dakikada gerçekleşir. Konserve gıdaları, bazı tıbbi malzemeleri, mikroorganizmaların yetiştirildiği substratları laboratuvarlarda sterilize ederler. Sterilizasyonun etkisi, sterilizasyon nesnesinin mikroflorasının nicel ve nitel bileşimine, kimyasal bileşimine, kıvamına, hacmine, kütlesine vb.

Düşük sıcaklıkların etkisi.

Çoğu zaman, düşük sıcaklıkların etkisi, mikroorganizmaların ölümü ile değil, gelişimlerinin inhibisyonu ve durdurulması ile ilişkilidir. Mikroorganizmalar düşük sıcaklıkları çok daha iyi tolere eder. Çevreye giren birçok hastalık yapıcı mikrop, patojenitelerini kaybetmeden sert kışlara dayanabilmektedir. Hücre içeriğinin en çok donduğu sıcaklık, mikroorganizmaların gelişimini olumsuz etkiler.

Düşük sıcaklıkların mikroplar üzerindeki önleyici etkisi, 0-4°C sıcaklıkta soğutulmuş ve -6-20°C ve altındaki sıcaklıklarda dondurulmuş çeşitli ürünleri depolamak için kullanılır. Dondurulmuş gıdalarda düşük sıcaklıkların etkisi, artan ozmotik basıncın etkisini artırır. Suyun çoğu buza dönüştüğü için suyun kalan sıvı kısmı, ürünün kütlesinde bulunan tüm çözünmüş maddeleri içeriyordu. Bu, artan ozmotik basınca neden olur ve bu da mikropların gelişimini engeller.

Dondurma et, balık, meyve, yarı mamul sebzeler, mutfak ürünleri, hazır yemekler vb. depolamak için kullanılır. Mikrobiyal gelişimin durması ancak düşük sıcaklık devam ettiği sürece etkilidir. Sıcaklık yükseldiğinde, gıda ürünlerinin bozulmasına neden olan mikropların hızlı gelişimi ve üremesi başlar.

Bu nedenle, düşük sıcaklık, sterilizasyon etkisi olmadan sadece biyokimyasal süreçleri yavaşlatır. Aynı ürünlerin tekrar tekrar dondurulması, mikropların düşük sıcaklıklara hızla adapte olmasına katkıda bulunur ve canlılıklarını artırır. Bu nedenle ürünlerin depolanması sırasında sıcaklık dalgalanmalarının önlenmesi gerekmektedir.

etkileyen başlıca fiziksel faktörler arasında

mikroorganizmalar hem doğal ortamlarında hem de laboratuvar koşullarında sıcaklık, kurutma, hidrostatik basınç, radyan enerji ve diğerlerini içerir.

Sıcaklığın etkisi. Sıcaklık, mikropların yaşamındaki en önemli faktörlerden biridir. Optimal olabilir, yani. gelişim için en uygun ve yaşam süreçleri baskılandığında maksimum; minimal, büyümenin yavaşlamasına veya durmasına yol açar. Mikroorganizmalar, belirli sıcaklık koşullarına adaptasyonlarına göre üç fizyolojik grupta birleştirilir:

psikrofiller

mezofiller

termofiller

Psikrofilik mikroorganizmalar - soğuk kaynakların sakinleri,

15-20 arasında bir optimum sıcaklığa sahip derin denizler ve okyanuslar 0 С, 0'dan itibaren büyüme mümkündür 0 35'e kadar 0 C. Bunlara ışık veren bakteriler, demir bakterileri ve diğerleri dahildir.

Mezofilik bakteriler, optimum 30-37 ile orta sıcaklıklarda yaşar. 0 C, en az 3 0 C ve maksimum 45'e kadar 0 C. Bu, çoğu saprofit ve tüm patojenleri içerir.

Termofilik bakteriler, gelişmeleri için daha yüksek bir sıcaklığa ihtiyaç duyar - 35'ten 80'e 0 C, optimumda - 50-60 0 C. Kaplıcalarda, hayvanların sindirim kanallarında ve sıcak iklimlerin topraklarında bulunurlar.

Yüksek ve düşük sıcaklıklar mikropları farklı şekilde etkiler. Düşük sıcaklıklar genellikle mikropların ölümüne neden olmaz, sadece büyümelerini ve üremelerini geciktirir. Birçok mikropun hayati aktivitesi, mutlak sıfıra yakın bir sıcaklıkta korunur. Yani, Escherichia - 190'da geçerliliğini koruyor 0 4 aya kadar ve -40'ta brusella 0 C 6 aydan fazla saklanır. Bununla birlikte, kristal oluşumu olmadan donma meydana geldiğinde (-190), bu sıcaklığın buz kristallerinin oluştuğu sıcaklıktan (-20) daha az yıkıcı olduğu ve mekanik hasara ve geri dönüşü olmayan süreçlere yol açtığı unutulmamalıdır. mikrobiyal hücre.

Düşük sıcaklıklar çürüme ve fermantasyon işlemlerini durdurur.

Yüksek sıcaklıklar, özellikle basınçlı buharla ısıtma, mikroplar için zararlıdır. Sıcaklık maksimumun üzerine çıktıkça, mikroorganizmaların vejetatif formları daha hızlı ölür: 60'ta 0 C - 30 dakika sonra, 80-100'de 0 C - 1 dakika sonra. Bakteri sporları yüksek sıcaklıklara daha dayanıklıdır.

Yüksek sıcaklıkların bakterisit etkisi, enzimlerin inhibisyonuna, protein denatürasyonuna ve ozmotik bariyerin ihlaline dayanır. Yüksek sıcaklıklara maruz kalma, esas olarak bir otoklavda (120°C'de) gerçekleştirilen birçok termal sterilizasyon yönteminin altında yatmaktadır. 0 C, 1 atm basınçla, 30 dakika) veya kaynatılarak, akan buharla fraksiyonel sterilizasyon (100°C'de) 0 C, 30 dakika boyunca arka arkaya üç gün), kuru ısıya maruz bırakma (170) 0 1.5 saatten itibaren) - LPZ'de daha ayrıntılı olarak. Sterilizasyon terimi, sterilize edilen materyaldeki (hayvan cesetleri, laboratuvar kapları, besin ortamları, kullanılmış mikrobiyal kültürler) tüm mikropların tamamen yok edilmesini amaçlayan bir olay olarak anlaşılmaktadır.

kurutma etkisi. Dehidrasyona yol açan kurutma, mikroorganizmalar için zararlıdır. Bakteri hücresinde dehidrasyon nedeniyle yaşam süreçleri yavaşlar, üreme süreci durur, hücre anabiyotik duruma geçer. Çoğu durumda vejetatif bakteri hücrelerinin dehidrasyonu ölümlerine neden olur (özellikle patojenik olanlar). Mikropların kuru haldeki spor formları uzun yıllar devam edebilir. Laboratuvar uygulamalarında, mikrobiyal kültürleri korumak için süblimasyon yöntemi - düşük sıcaklıkta dehidrasyon - yaygın olarak kullanılmaktadır. Bu yöntem aşıları, müze kültürlerini, tedavi edici ve tanısal serumları ve diğer biyolojik ürünleri kurutmak için kullanılır.

Hidrostatik ve ozmotik basıncın etkisi. 108-110 MPa'yı aşan hidrostatik basınç, protein denatürasyonuna, enzim inaktivasyonuna neden olur, elektrolitik ayrışmayı arttırır, birçok sıvının viskozitesini arttırır, bu da mikropların hayati aktivitesini olumsuz yönde etkiler ve sıklıkla ölümlerine yol açar. Çoğu mikrop bir saat boyunca yaklaşık 65 MPa basınca dayanabilir. Okyanusun derinliklerinde, petrol kuyularında yaşayan barotolerant (113-116 MPa) mikroorganizmalar vardır. Yüksek tansiyon (10 3 – 10 6 Pa) yüksek sıcaklıkla (120 0 C) Otoklavlarda malzemelerin nötralizasyonu (sterilizasyonu) amacıyla kullanılır.

İçinde çözünmüş maddelerin konsantrasyonu ile belirlenen ortamın ozmotik basıncı, mikroorganizmaların büyümesi üzerinde büyük bir etkiye sahiptir. Bakterilerin içinde ozmotik basınç, %10-20'lik bir sakaroz çözeltisinin basıncına karşılık gelir. Mikrobiyal hücre, ozmotik basıncın yüksek olduğu bir ortama yerleştirilirse plazmoliz (su kaybı ve hücre ölümü) meydana gelir, ozmotik basıncın düşük olduğu bir ortama konulursa hücreye su girer, hücreye su girer. duvar patlayabilir - plazmoptoz. Bu fenomenler endüstride ve günlük hayatta ürünlerin (salatalık, domates, lahana vb.) korunması için kullanılmaktadır.

Bununla birlikte, yüksek tuz konsantrasyonlarında büyümeyi seven mikroorganizmalar vardır - halofiller. Örneğin, doğummikrokok, Sarcina%20-30 gibi yüksek konsantrasyonlarda üremekNaCL. Bu özellik, laboratuvar uygulamalarında bu mikroorganizmaları diğer benzerlerinden ayırt etmek için kullanılır.

Çeşitli radyasyon türlerinin mikroorganizmalar üzerindeki etkisi. Mikroplar üzerinde çeşitli radyasyon bakterisit etkisi. Ancak bu etkinin derecesi radyasyon enerjisinin tipine, dozuna ve maruz kalma süresine bağlıdır.

Güneş ışınları mikroplar üzerinde güçlü etkisi olan fiziksel bir faktördür. Birçok patojenik mikroorganizma, güneş ışığına maruz kaldığında 10-30 dakika, bazıları 2 saat sonra (tüberküloz basili), basil sporları - birkaç saat sonra ölür. Dağınık ışık daha zayıftır. Uygulamada, mikroorganizmaların yetiştirilmesi karanlıkta, termostatlarda gerçekleştirilir. Görünür ışığın sadece pigment oluşturan bakteriler üzerinde olumlu etkisi vardır. Işığın bakterisit etkisi, hücrede hidroksil radikallerinin ve diğer yüksek derecede aktif maddelerin oluşumu ile ilişkilidir.

Ultraviyole ışınları (100-380 nm), hayvancılık binalarında, laboratuvarlarda ve endüstriyel atölyelerde, mahsuller için aseptik koşulları sağlamak için kutularda hava sanitasyonu için yaygın olarak kullanılmaktadır. Bu durumda cıva-kuvars (PRK) veya bakterisit (BUV) lambalar kullanılır. UFL'nin etki mekanizması DNA replikasyonunu bastırmaktır.

Radyoaktif gama ışınları ve X ışınları, sterilize edilecek nesnelerin radyasyon kaynağına yakın yerleştirilmesi gerektiğinden mikroplar üzerinde biraz daha zayıf bir etkiye sahiptir. Aletlerdeki, pansumanlardaki ve biyolojik ürünlerdeki mikropları yok etmek için kullanılırlar.

Zaman darlığından dolayı ultrason, elektrik ve diğer fiziksel faktörlerin mikroorganizmalar üzerindeki etkisini kendi başınıza okuyacaksınız.

2. Mikroplar, tüm canlılar gibi çevresel faktörlere karşı oldukça hassastır. Olumlu dürtüler ortaya çıktığında, mikroplar tahriş nesnesine koşar, olumsuz dürtüler onları iter. Bu fenomene kemotaksis denir. Mikrobiyal hücre üzerinde faydalı etkisi olan maddeler (et özü, pepton) pozitif kemotaksiye neden olur; aşırı uyarılmaya veya depresyona yol açan güçlü, toksik maddeler (asitler, alkaliler, vb.), negatif kemotaksiye yol açar. Bakteri hücresine giren zehirli maddeler, hücrenin hayati bileşenleri ile etkileşir ve işlevlerini bozar. Bu, mikroorganizmanın büyümesinin durmasına (bakteriostatik etki) veya ölmesine (bakterisidal etki) neden olur. Çeşitli grupların kimyasal maddelerinin bakterisit etkisi vardır: asitler (H 2 BÖYLE 4 , Kuzey AmerikaL, HNO 3 ), alkoller (metil, etil vb.), yüzey aktif maddeler (yağ asitleri, toz, sabun), fenoller ve bunların türevleri, ağır metal tuzları (kurşun, bakır, çinko, cıva), oksitleyici maddeler (klor, iyot,KMhayır 4 , N 2 Ö 2 ), formaldehit grubu, boyalar (br. green, rivanol vb.). Bu maddelerin antimikrobiyal etki mekanizması farklıdır. Bazıları (formaldehit, asitler, alkaliler vb.) protein pıhtılaşmasına neden olurken, bazıları ortamın reaksiyonunu değiştirir, bazıları ise hücre duvarına zarar verir.

Kimyasalların mikroplar üzerindeki etkisi, çözelti sıcaklığının 60-70'e çıkarılmasıyla artar. 0 , kimyasalın konsantrasyonunda artış, süre. Mikropları yok etmek için gerekli olan malzemenin doğası da önemlidir - gübrede, hayvan cesetlerinde, irin, mikroplara daha az erişilebilir ve dezenfeksiyonları için yüksek konsantrasyonlu kimyasal çözeltilere uzun süre maruz kalmak gerekir.

Bakterilerin vejetatif formlarını yok etmek için en sık %5 fenol, lizol veya kloramin solüsyonu, %10-20 sönmemiş kireç solüsyonu, %2 formaldehit solüsyonu, %4 sıcak sodyum hidroksit solüsyonu kullanılır ve ortalama 1-2 sonra ölümlerine neden olur. saat. Bacillus sporları 10-24 saat süreyle %3 formaldehit solüsyonu, %20 ağartma solüsyonu, %5 fenol solüsyonuna maruz kaldığında ölür.

Bazı durumlarda, kimyasallar bir aerosol biçiminde kullanılır; gazlar da kullanılır.

Kimyasalların antimikrobiyal etkisi, dezenfeksiyonun temelidir - belirli bir türdeki patojenik mikropların yok edilmesini amaçlayan bir olay. Sterilizasyondan farklı olarak, dezenfeksiyon tüm türleri yok etmez - birçok saprofit, bir veya başka bir dezenfektana duyarlı değildir ve canlı kalır.

3. Biyolojik faktörlerin etkisi, bazı mikropların atık ürünleri diğerlerinin ölümüne neden olduğunda, öncelikle mikropların düşmanlığında kendini gösterir. Modern antibiyotik doktrini sürekli olarak mikrobiyal antagonizma sorunuyla bağlantılıdır.

Antibiyotikler (gr.anti- aykırı,bios- yaşam) - kendilerine duyarlı mikropların gelişimini ve biyokimyasal aktivitesini engelleyen mikrobiyal, hayvansal ve bitki kaynaklı maddeler. Kökenlerine göre, antibiyotikler aşağıdaki gruplara ayrılır::

Mantarlardan izole edilen antibiyotikler.

Küfler en aktif antibiyotik üreticileridir.

mantarlar ve aktinomisetler. Küf penicillium, yaygın olarak kullanılan antibiyotik penisilin ve aspergillus ve mucor - fumagazin, aspergillin, clavicin'i oluşturur. Çoğu antibiyotik aktinomisetlerden izole edilir: streptomisin, tetrasiklin, biyomisin, neomisin, nistatin ve diğerleri.

Bakterilerden izole edilen antibiyotikler.

Üreticiler çeşitli bakterilerdir. Esasen

toprakta yaşayan yoğun biyokimyasal aktiviteye sahip saprofitler. Bunlara gramisidin, kolisin, piyosiyanin, subtilin, polimiksinler, basitrasin, lizozim ve diğer bakteriyel enzimler dahildir.

Hayvansal kökenli antibiyotikler.

Biyolojik olarak antibiyotiklere yakın bazı

belirli mikrop türlerini seçici olarak etkileyebilen hayvan dokuları tarafından salgılanan maddeler. Bu, hayvan eritrositlerinden izole edilen eritrindir; balık dokusundan elde edilen ecmolin.

Bitki kökenli antibiyotikler.

Bitkiler tarafından salgılanan zehirli uçucu maddeler (soğan, sarımsak,

yaban turpu, hardal, aloe, ısırgan, ardıç vb) denir. fitokitler. 1928 yılında B.N. Tokin tarafından keşfedilmiştir. Bazı fitokitler saf halde izole edilir: alisin - sarımsaktan, rafininden - turp tohumlarından vb.

Antibiyotiklerin mikroorganizmalar üzerinde bakterisidal (öldürücü) veya bakteriyostatik (büyümeyi önleyici) etkisi olabilir. Bu özellik, antibiyotiğin türüne, konsantrasyonuna, mikroorganizmanın ona duyarlılığına ve diğer faktörlere bağlıdır. Her antibiyotiğin kendine özgü bir antimikrobiyal etki spektrumu vardır: birkaç mikroorganizma türü (penisilin, gramisidin) üzerinde etkili antibiyotikler ve geniş bir antimikrobiyal aktivite spektrumuna sahip antibiyotikler (levomisetin, tetrasiklin, vb.) vardır. Antibiyotiklerin mikroorganizmalar üzerindeki etki mekanizması, hücre duvarı ve zarlarının sentezinin ihlaline veya DNA sentezinin ihlaline dayanır. RNA ve protein. Örneğin penisilin bakteri duvarının oluşumunu bozar, levomisetin RNA ve protein sentezini olumsuz etkiler.

Antibiyotiklerin ilaç olarak yaygın ve uzun süreli kullanımı ile bağlantılı olarak, doğada antibiyotiğe dirençli mikrop formları ortaya çıkmış ve özellikle çok yaygın hale gelmiştir.Lçeşitli bulaşıcı hastalıkların etken maddeleri olan formlar. Dirençli mikrop formlarının oluşum mekanizması oldukça karmaşıktır: adaptif enzimlerin üretimi (örneğin penisilinaz), kemoterapi ilaçlarının antimetabolitlerinin etkisini engelleyen doğal metabolitlerin sentezi (örneğin stafilokoklar para-aminobenzoik asit üretir ve bunlara karşı duyarsız hale gelir). bu ilaç Ve ayrıca mutasyonlar, konjugasyon, transformasyon, transdüksiyonun bir sonucu olarak.

Mikroorganizmaların duyarlılığının ön tespiti, en aktif antibiyotiği seçmenize ve ardından onu terapötik bir ilaç olarak kullanmanıza izin verir. Mikropların antibiyotiklere duyarlılığının belirlenmesi, agar içine difüzyon yöntemiyle veya seri seyreltme yöntemiyle gerçekleştirilir - daha fazla ayrıntı LPZ'de.

Bakteriyofajlar. Antimikrobiyal etki, mikrobiyal hücrenin parçalanması yoluyla gerçekleştirilir: önce enfekte eder, sonra çoğalır, çok sayıda yavru oluşturur ve hücreyi, faj parçacıklarının bakteri habitatına salınmasıyla birlikte lize eder.

Bakteriyofajlar toprakta, suda, hasta ve sağlıklı hayvanların dışkısında, insanlarda yaygın olarak bulunur ve çoğu bakteri türünde bulunur. 1917'de D. Errel tarafından keşfedildiler.

Faj iyi tanımlanmış antijenik özelliklere sahiptir. Faj parenteral olarak uygulandığında, vücutta fajın litik aktivitesini nötralize eden ve yüksek özgüllüğe sahip antikorlar oluşur. Antijenik özelliklere göre fajlar serolojik varyantlara ayrılır.

Spesifiklik derecesine göre, fajlar üç gruba ayrılabilir: polifajlar ilgili bakterileri lize eder, monofajlar - bir türün bakterileri ve fajlar - bu tür bakterilerin sadece belirli varyantları.

Çoğu faj 65-70'de inaktive olur 0 C. Düşük sıcaklık faj aktivitesini azaltır. Fajlar -185'te donmayı nispeten kolay bir şekilde tolere eder. 0 C ve ayrıca iyi kurumaya karşı dayanıklıdır. Faj, dezenfektanlara bakterilerden daha dirençlidir.

Faj, aktif büyüme sürecinde yalnızca canlı bakteri hücrelerine etki eder. Gösterilen eylemin doğasına bağlı olarak, virülent ve ılıman fajlar ayırt edilir. Virülent fajlar, bir bakteri hücresine girdiklerinde, hücre içinde çoğalır ve parçalanmaya neden olur; ılıman fajlar lizise neden olmazlar, ancak lizojeni durumunda kalırlar.

Virüsler gibi bakteriyofajların boyutu küçüktür - 8-100 nm. Şekilleri bir spermatozoa benziyor - çeşitli uzunluklarda bir kuyruk süreci, yuvarlak veya çok yönlü bir kafadan ayrılır. Bununla birlikte, bazen bir işlemi olmayan fajlar vardır. Bakteriyofaj hücresel olmayan bir oluşumdur. Kabuğu, çekirdeği, sitoplazması, yani. hücrenin elemanları. Bir nükleik asit molekülünden (daha sık DNA, daha az sıklıkla RNA) ve onu çevreleyen bir protein kılıfından oluşur. Nükleik asit (% 40-50) başın içinde bulunur, bir protein kılıfı (% 50-60) hem kafa hem de kuyruk işlemini kaplar, sonunda fajın bağlanmasını kolaylaştıran özel lifler vardır. mikrobiyal membran. Faj partikülündeki lipidler ve enzimler minimum miktarlardadır - yaklaşık %2.

Bakteriyofajlar, faj teşhisi, bakterilerin faj tiplendirilmesi ve bulaşıcı hastalıkların önlenmesi ve tedavisi için kullanılır. Daha fazla ayrıntı için LPZ'ye bakın.

Federal Devlet Yüksek Mesleki Eğitim Eğitim Kurumu

Moskova devlet akademisi veteriner hekimliği ve biyoteknoloji adlı »

_____________________________________________________

Fiziksel, kimyasal ve biyolojik faktörlerin etkisi

mikroorganizmalar için

Moskova - 2011

Mikroorganizmalar üzerindeki fiziksel, kimyasal ve biyolojik faktörlerin Gryaznev / Ders .- M .: FGOU VPO MGAVMiB.- 20s.

111801 - "Veterinerlik", 020207 - "Biyofizik", 020208 - "Biyokimya", 110501 - "Vetsanexpertiza", 080 - "Emtia Bilimi ve Malların Uzmanlığı", 111100 - uzmanlık alanlarındaki yüksek öğretim kurumlarının öğrencileri için tasarlanmıştır. "Zooteknik".

İnceleyenler:

veteriner bilimleri doktoru, profesör

Moskova Devlet Tıp ve Biyolojik Güvenlik Akademisi Yüksek Mesleki Eğitim Federal Devlet Eğitim Kurumu Veteriner Fakültesi'nin eğitim, metodolojik ve klinik komisyonu tarafından onaylanmıştır (21 Mart 2011 tarihli tutanak).

Fiziksel, kimyasal ve biyolojik faktörlerin mikroorganizmalar üzerindeki etkisi

Tanıtım.

1. Mikroorganizmaları etkileyen fiziksel faktörler.

2. Kimyasal faktörler.

3. Biyolojik faktörler.

4. Sterilizasyon.

5. Mikroorganizmaların olumsuz çevresel faktörlere uyarlanabilirliği.

Çözüm.

Otokontrol için sorular

Edebiyat

1., Burlakova G. I., Shaikova, öğrencileri "Mikrobiyoloji" disiplininde test görevleriyle eğitiyor: Ders Kitabı. - M.: FGOU VPO MGAVMiB, 2008.

2., Rodionova // Veteriner fakültesi öğrencileri için disiplini incelemek ve bağımsız çalışma yapmak için metodolojik öneriler tam zamanlı, yarı zamanlı ve yarı zamanlı eğitim.- M.: FGOU VPO MGAVMiB.- 2008.

3., Gosmanov mikrobiyolojisi ve immünolojisi: Ders Kitabı.- M.: KolosS.- 2006.

4., Skorodumov tikum on veteriner mikrobiyolojisi.- M.: KolosS.- 2008.

5. Pozdeev mikrobiyoloji: Üniversiteler için ders kitabı.- M.: Geotar-Med.- 2001.

6., Patojenik bakteri popülasyonlarının Bannikova morfolojisi.- M.: Kolos. 2007.

Tanıtım

Mikroorganizmaların ömrü çevre koşullarına yakından bağlıdır, bu nedenle mikroorganizmalar sürekli olarak buna uyum sağlamak zorundadır.

Hem insanlar, hayvanlar ve bitkiler hem de mikroorganizmalar çeşitli çevresel faktörlerden önemli ölçüde etkilenir. Fiziksel, kimyasal ve biyolojik olmak üzere üç gruba ayrılabilirler.

Antimikrobiyal çevresel faktörler

Fiziksel

Kimyasal

Biyolojik

Çevresel faktörlerin mikroorganizmalar üzerindeki etkisinin sonuçları:

1. Olumlu.

2. Olumsuz (bakteriostatik ve bakterisidal etki).

3. Mikroorganizmaların özelliklerinin değiştirilmesi.

4. Kayıtsız.

Antimikrobiyal çevresel faktörler sterilizasyon, dezenfeksiyon, tedavi, asepsi ve antisepsi vb.

1. Mikroorganizmaları etkileyen fiziksel faktörler

Fiziksel faktörlerden mikroorganizmalar üzerindeki en büyük etki aşağıdakiler tarafından uygulanır:

1. Sıcaklık.

2. Kurutma (liyofilizasyon).

3. Radyan enerji (mikrodalga enerjisi, ultraviyole ışınları, iyonlaştırıcı radyasyon).

4. Ultrason.

5. Basınç (atmosferik, hidrostatik, ozmotik).

6. Elektrik.

7. Ortamın asitliği (ortamın pH'ı).

8. Oksijen varlığı.

9. Habitatın nemi ve viskozitesi.

Hava sıcaklığı - mikroorganizmaları etkileyen en güçlü faktörlerden biridir. Ya hayatta kalırlar ya ölürler ya da uyum sağlarlar ve büyürler.

Sıcaklığın bakteriler üzerindeki etkileri:

1. Mikroorganizmaların aşırı sıcaklık koşullarında uzun süre kaldıktan sonra hayatta kalma yeteneği.

2. Mikroorganizmaların aşırı sıcaklık koşullarında üreme yeteneği.

Her mikroorganizmanın yaşamsal aktivitesi belirli sıcaklık limitleri ile sınırlıdır.

Bu sıcaklık bağımlılığı genellikle üç nokta ile ifade edilir:

§ minimum (min) sıcaklık - altında üremenin durduğu;

§ optimal (opt) sıcaklık - mikroorganizmaların büyümesi ve gelişmesi için en iyi sıcaklık;

§ maksimum (maks) sıcaklık - hücre büyümesinin yavaşladığı veya tamamen durduğu sıcaklık.

Optimum sıcaklık genellikle ortam sıcaklığına eşittir.

Sıcaklıkla ilgili tüm mikroorganizmalar şartlı olarak 3 gruba ayrılabilir: psikrofiller, mezofiller, termofiller.

saprofit

Yersinia

Pseudomonas

Klebsiella

Listeria ve diğerleri.

Psikrofillerin büyümesi ve çoğalması için en uygun sıcaklık

psikrofiller düşük sıcaklıklarda büyüyen soğuk seven mikroorganizmalardır: min t - 0°С, opt t - 10-20°С arası, maks t - 35°С'ye kadar. Bu mikroorganizmalar, kuzey denizlerinin ve rezervuarlarının sakinlerini ve ayrıca bazı patojenik bakterileri içerir - yersiniosis, pseudomonosis, klebsiellosis, listeriosis vb.

Düşük sıcaklıkların etkisine karşı birçok mikroorganizma çok dirençlidir. Örneğin Listeria, Vibrio cholerae, bazı Pseudomonas atrobacter türleri canlılıklarını kaybetmeden uzun süre buzda saklanabilir.

Bazı mikroorganizmalar eksi 190°C'ye kadar olan sıcaklıklara dayanabilirken, bakteri sporları eksi 250°C'ye kadar olan sıcaklıklara dayanabilir. Düşük sıcaklıkların etkisi çürüme ve fermantasyon süreçlerini durdurur, bu nedenle günlük hayatta buzdolaplarını kullanırız.

Düşük sıcaklıklarda, mikroorganizmalar, hücredeki tüm hayati süreçlerin yavaşladığı askıya alınmış bir animasyon durumuna düşer. Bununla birlikte, psikrofillerin çoğu, 0°C'de saklanan gıda ve yemlerin hızla mikrobiyal bozulmasına neden olabilir.

Çoğu patojenik ve fırsatçı mikroorganizmalar

Mezofillerin büyümesi ve çoğalması için en uygun sıcaklık

mezofiller- bu, saprofitleri ve neredeyse tüm patojenik mikroorganizmaları içeren en geniş bakteri grubudur, çünkü onlar için optimum sıcaklık 37°C (vücut sıcaklığı), min t - 10°C, maks t - 50°C'dir.

termofiller- ısı seven bakteriler, 55°C'nin üzerindeki sıcaklıklarda gelişir, onlar için min t - 40°C, maks t - 100°C'ye kadar. Bu mikroorganizmalar çoğunlukla kaplıcalarda yaşar. Termofiller arasında birçok spor formu (B. stearothermophilus. B. aerothermophilus) ve anaeroblar bulunur.

https://pandia.ru/text/78/203/images/image006_13.jpg" width="335 height=140" height="140">

Sporların vejetatif formları

Mikroorganizmaların ölüm sıcaklık aralıkları

Bakteri sporları, yüksek sıcaklıklara vejetatif bakteri formlarından çok daha dirençlidir. Örneğin, şarbon basili sporları 2 saat kaynamaya dayanabilir.

Sporlar dahil tüm mikroorganizmalar 1 saat içinde 165-170°C sıcaklıkta ölür.

Yüksek sıcaklıkların mikroorganizmalar üzerindeki etkisi sterilizasyonun temelidir.

Kurutma. Mikroorganizmaların normal çalışması için su gereklidir. Kurutma, sitoplazmanın dehidrasyonuna ve hücre ölümüne yol açan sitoplazmik zarın bütünlüğünün bozulmasına yol açar.

Kurutmanın etkisi altındaki bazı mikroorganizmalar (birçok kok türü) birkaç dakika sonra ölür.

Kurumaya daha dirençli, 9 aya kadar canlı kalabilen tüberkülozun etken maddeleri ve ayrıca kapsüler bakteri formlarıdır.

Sporlar özellikle kurumaya karşı dirençlidir. Örneğin şarbon sporları toprakta 100 yıldan fazla yaşayabilir.

Mikrobiyal kültür müzelerinde mikroorganizmaların depolanması ve bakterilerden kuru aşı preparatlarının üretimi için yöntem dondurarak kurutma.

Yöntemin özü, dondurarak kurutucularda - liyofilizatörlerde, mikroorganizmaların önce dondurulması ve ardından vakum altında pozitif bir sıcaklıkta kurutulması gerçeğinde yatmaktadır. Aynı zamanda, bakteri sitoplazması donar ve buza dönüşür ve sonra bu buz buharlaşır ve hücre hayatta kalır (suyun donmuş halden gaz haline geçişi, sıvı fazı atlayarak - süblimasyon).

Dondurulmuş bakteri (İdondurarak kurutma adımı)

hücre dışı oluşumu(a) ve hücre içi(b) bakterilerin dondurularak kurutulması sırasında buz

Dondurularak kurutulmuş diplokoklar

Uygun dondurarak kurutma ile mikrobiyal hücreler, askıya alınmış bir animasyon durumuna girer ve biyolojik özelliklerini birkaç yıl boyunca korur.

Lifil-kurutulmuş canlı(a) ve ölü(b) bakteri

Dondurarak kurutma rejimi gözlemlenmezse (ve farklı bakteri türleri için farklıdır), o zaman bakterilerin hücre duvarı kırılır ve ölürler.

radyan enerji. Mikroorganizmalar üzerindeki etkinin farklı özellikleri, gücü ve doğası ile karakterize edilen farklı radyan enerji biçimleri vardır.

Doğada bakteri hücreleri sürekli olarak güneş ışınlarına maruz kalır.

Doğrudan güneş ışığının mikroorganizmalar üzerinde zararlı bir etkisi vardır. Güneş ışığının (UV ışınları) ultraviyole spektrumunu ifade eder.

Bitkiler Fotosentez fototropizm fotoperiyodizm

bakteri fototaksis mutasyonlar bakterisit eylem

hayvanlar ve adam fotoeritem fotodinamik

UV ışınlarının doğasında bulunan yüksek kimyasal ve biyolojik aktivite nedeniyle mikroorganizmalarda enzimlerin inaktivasyonuna, proteinlerin pıhtılaşmasına, DNA'yı tahrip ederek hücre ölümüne neden olurlar. Bu durumda, bu ışınların düşük nüfuz gücü nedeniyle sadece ışınlanmış nesnelerin yüzeyi dezenfekte edilir.

Patojenik bakteriler UV ışınlarının etkisine saprofitlerden daha duyarlıdır, bu nedenle bakteriyolojik laboratuvarda mikroorganizmalar karanlıkta büyütülür ve depolanır.

Buchner'ın deneyimi, UV ışınlarının bakteriler için ne kadar zararlı olduğunu gösteriyor: Yoğun bir ortama sahip bir Petri kabı, sürekli bir çim ile ekilir. Ekimin bir kısmı kağıtla kaplanır ve Petri kabı güneşe bırakılır ve bir süre sonra (15-30 dakika) termostata yerleştirilir.

Yalnızca kağıdın altındaki mikroorganizmaları çimlendirin. Bu nedenle çevresel dezenfeksiyon için güneş ışığının önemi çok yüksektir.

Bu amaçlarla kullanılan ultrasonik yayan cihazlara ultrasonik parçalayıcılar (US) denir.

Yüksek basınç. Bakteriler ve özellikle sporlar, yüksek atmosferik veya hidrostatik basınca (barofilik mikroorganizmalar) karşı çok dirençlidir. Doğada denizlerde ve okyanuslarda m derinlikte 100 ila 900 atm basınç altında yaşayan bakteriler vardır. Bu bakteriler saprofitiktir ve arkelere aittir.

Bakteriler, atmosfer basıncını ve bakteri sporlarını - 20.000 atm'ye kadar tolere eder. Böyle yüksek bir basınçta, bakteriyel enzimlerin ve toksinlerin aktivitesi azalır.

Basınç altında buhar sterilizasyonu için buhar sterilizatörlerinde (otoklavlar) yükseltilmiş sıcaklıklar ve yükseltilmiş basınçların birleşik etkisi kullanılır.

Önemli bir faktör hücre içi ozmotik basınççeşitli mikroorganizmalarda bulunur.

Ozmotik basıncın bir mikrobiyal hücre üzerindeki etkisi:

1. Mikroorganizmalar daha yüksek ozmotik basınca sahip bir ortama yerleştirilirse plazmoliz (su kaybı ve hücre ölümü) oluşur.

2. Plazmoptisis (hücre içine su girişi ve hücre duvarının yırtılması) - mikroorganizmaların ozmotik basıncı düşük bir ortama girdiklerinde meydana gelir.

https://pandia.ru/text/78/203/images/image034.jpg" width="219" height="142">Hidrojen" href="/text/category/vodorod/" rel="bookmark"> hidrojen iyonları .

Asidofiller için yaşam için optimal pH -6.0-7.0'dır; alkalifiller için - 9.0-10.0; nötrofiller için - 7.5.

pH değerinin belirli bir metabolitin sentezi üzerinde önemli bir etkisi vardır.

Bazı durumlarda, kültür büyümesi ve ürün oluşumu için optimum aynı değildir. Yetiştirme sıcaklığı arttıkça tolere edilen pH değerleri aralığı daralır.

orta viskozite Besinlerin ortamın hacminden hücre yüzeyine difüzyonunu belirler.

2. Kimyasal faktörler

Besin ortamındaki besinlerin bileşimindeki ve konsantrasyonundaki değişikliklerin bakteri popülasyonunun büyümesini ve üremesini yavaşlatabileceği, durdurabileceği veya uyarabileceği bilinmektedir. Bu nedenle, kimyasal faktörler mikroorganizmaların hayati aktivitesini etkileyebilir.

Bir kimyasal maddenin bir mikroorganizma üzerindeki etkisinin derecesi farklı olabilir. Kimyasal bileşiğe, konsantrasyonuna, maruz kalma süresine ve ayrıca mikroorganizmanın bireysel özelliklerine bağlıdır.

bakteriyostatik eylem kimyasal madde bakterilerin üremesini engelliyorsa kaydedilir ve çıkarıldıktan sonra üreme süreci geri yüklenir.

bakterisidal etki Mikroorganizmaların geri dönüşü olmayan ölümüne neden olur.

Bazı kimyasallar bakterilere karşı kayıtsızdır, bazıları ise onların gelişim süreçlerini uyarabilir veya bakteriler için besin olabilir. Örneğin, besin ortamına küçük miktarlarda tuz NaCl eklenir.

Farklı mikroorganizma grupları üzerinde bakterisidal etkiye sahip olabilen kimyasallar, dezenfeksiyon.

dezenfeksiyon(enfeksiyonun yok edilmesi, çevresel nesnelerin dezenfeksiyonu), ortamdaki bulaşıcı hastalıkların patojenlerinin yok edilmesini amaçlayan bir dizi önlemdir.

Başka bir deyişle, dezenfeksiyon- bu, antimikrobiyal etkiye sahip kimyasalların yardımıyla dış ortamdaki patojenik mikroorganizmaların yok edilmesidir.

Mikroorganizmalar üzerinde etkili olan kimyasallar şunları içerir:

1. Oksitleyici maddeler.

2. Yüzey aktif maddeler.

3. Halojenler.

4. Ağır metallerin tuzları.

5. Asitler.

6. Alkaliler.

7. Alkoller.

8. Fenoller, kresoller ve bunların türevleri.

9. Aldehitler (formaldehit, formalin).

10. Boyalar.

Tarafından antimikrobiyal etki mekanizması Tüm kimyasallar 5 sınıfa ayrılır:

1. Denatüre edici proteinler - proteinleri pıhtılaştırın ve katlayın.

2. Sabunlaştırıcı proteinler - proteinlerin şişmesine ve çözünmesine yol açar.

3. Oksitleyici proteinler - aktif proteinlerin sülfhidril gruplarına zarar verir.

4. Nükleik asitlerin fosfat gruplarıyla reaktiftir.

5. Yüzey aktif maddeler - hücre duvarına zarar verir.

denaturantlar:

§ fenol, kresol ve türevleri - bakterisidal etki, hücre duvarına verilen hasar ve sitoplazmik proteinlerin denatürasyonu ile ilişkilidir;

§ formaldehit - yüzey katmanlarının dehidrasyonu ve protein denatürasyonu nedeniyle bakterisit etki;

§ alkoller - suyu uzaklaştırma ve proteinleri pıhtılaştırma kabiliyeti nedeniyle bakteri yok edici etki;

§ ağır metal tuzları (süblimasyon, mertiolat, cıva tuzları, gümüş, çinko, kurşun, bakır) - pozitif yüklü metal iyonları, bakterilerin negatif yüklü yüzeyinde adsorbe edilir ve solunum yapısını değiştirirken sitoplazmik membranlarının geçirgenliğini değiştirir. enzimler ve mitokondride oksidasyon ve fosforilasyon süreçlerinin ayrılması.

Sabunlama proteinleri - alkaliler, sönmüş kireç.

oksitleyici proteinler(klor, brom, iyot içeren, hidrojen peroksit, potasyum permanganat) - aktif atomik oksijeni serbest bırakarak, mikroorganizmaların zarlarının ve proteinlerinin tahrip olmasına yol açan serbest radikal lipid peroksidasyonunun zincir reaksiyonuna neden olur.

yüzey aktif maddeler(yağ asitleri, sabunlar, deterjanlar, deterjanlar) - geçirgenliği ve ozmotik dengeyi bozan mikrobiyal hücre yüzeyinin enerji oranını değiştirin (yük negatiften pozitife değişir).

halojenler(klor içeren: ağartıcı, kloramin B, diklor-1, sülfoklorantin, klorsin vb.; iyot içeren: iyodin alkol çözeltisi, iyodinol, iyodoform, Lugol çözeltisi vb.) - bakteri hücresinin enzimatik yapılarını yok eder, bakterilerin hidrolitik ve dehidrojenaz aktivitesini inhibe eder, amilaz ve proteaz gibi enzimleri inaktive eder, sitoplazmik proteinleri denatüre eder ve mikroorganizmalar üzerinde oksitleyici etkisi olan atomik oksijeni serbest bırakır.

boyalar(parlak yeşil, rivanol, tripoflavin, metilen mavisi) - nükleik asitlerin fosforik asit grupları için bir afiniteye sahiptir ve bakteri bölünme sürecini bozar. Antiseptiklerin bir parçası olarak birçok boya kullanılır.

bakterisidal etki asitler(salisilik, borik) ve alkaliler(kostik soda) mikroorganizmalar üzerinde şunlardan kaynaklanır:

§ mikroorganizmaların dehidrasyonu;

§ ortamın pH'ındaki değişiklik;

§ asit ve alkali albüminatların oluşumu.

Yeni nesil dezenfektanlar - Kuaterner amonyum bileşikleri (QAC) ve tuzları.

Bugün en etkili dezenfektanlardan biri Veltolen - benzersiz bir yerli, patentli madde "Velton" (üre ile CHAS klatrat) bazlı sıvı bir konsantredir.

Veltolen, düşük konsantrasyonlarda bakterisit, mantar öldürücü, sporül öldürücü ve virüs öldürücü etkiye sahiptir, hayvanlara ve insanlara zararsızdır ve çevre dostudur.

Veltolen'in antimikrobiyal etki mekanizmaları

5 dakikalık bir maruziyette şarbon patojeni B. anthracis üzerinde %0.5'lik bir Veltolen çözeltisinin antimikrobiyal etkisi. bakteri sitoplazmasının vakuolizasyonuna ve hücre duvarının pul pul dökülmesine neden olur.

üzerindeB.antracis5 dakikalık bir maruziyette.

%0.5'lik bir Veltolen çözeltisinin 15 dakikalık bir maruziyette Sibirya patojeni üzerindeki antimikrobiyal etkisi. hücre duvarının pul pul dökülmesine, yırtılmasına ve sitoplazmanın vakuolizasyonuna neden olur.

%0.5 Veltolen solüsyonunun antimikrobiyal etkisi

üzerindeB.antracis15 dakikalık bir maruziyette.

60 dakikalık bir maruziyette Sibirya patojeni üzerinde % 0,5'lik bir Veltolen çözeltisinin antimikrobiyal etkisi. hücre duvarının kaybı ve hücresel artıkların salınması ile bakteri hücrelerinin çoğunun yok olmasına neden olur. Veltolen'in etkisi altındaki sporların bazıları miyelin figürleri oluşturur.

%0.5 Veltolen solüsyonunun antimikrobiyal etkisi

üzerindeB.antracis60 dakikalık bir maruziyette.

Çeşitli dezenfektanların aktivitesi aynı değildir ve dezenfektan solüsyonlarının maruz kalma süresine, konsantrasyonuna, sıcaklığına ve çevreye bağlıdır.

Bir bileşen olarak kimyasalların yardımıyla dezenfeksiyon, yalnızca ortamdaki değil, aynı zamanda makro organizmadaki, örneğin bir yaradaki mikroorganizmaların yok edilmesini amaçlayan bir dizi önleme dahil edilir ve asepsi ve antisepsi temelidir.

Asepsi Mikroorganizmaların bir kişinin ve bir hayvanın yarasına veya vücuduna girmesini önlemeyi amaçlayan bir dizi önleyici tedbirdir.

antiseptikler- bu, iltihaplanma sürecini önlemek ve ortadan kaldırmak için yaradaki veya bir bütün olarak vücuttaki mikroorganizmaların yok edilmesini amaçlayan bir dizi önlemdir.

antiseptikler biyolojik yüzeyleri dezenfekte etmek için kullanılan antimikrobiyal maddelerdir.

Antiseptik kimyasallar arasında boyalar (metilen mavisi, parlak yeşil) bulunur - denatüre edici ve litik bir etkiye sahiptirler ve biyosentetik ve enzimatik süreçleri bozan 8-hidroksi-kinolin (kinosol, nitroksalin, kinolon) ve nitrofuran (furatsilin, furazolidon) türevleri vardır. bakteri hücresi.

3. Biyolojik faktörler

İle biyolojik faktörler, olumsuz etkileyen mikroorganizmalar şunları içerir:

§ mikroorganizmalar-antagonistler;

§ probiyotikler;

§ bakteriyofajlar;

§ vücudun koruyucu faktörleri (hücresel ve hümoral).

Dış ortamda ve insan ve hayvanların vücudunda, birbirleriyle farklı şekillerde etkileşime giren çok sayıda farklı mikroorganizma türü vardır.

laktik asit bakterisi

yırtıcı Bir bakteri türünün diğerini besin olarak kullanmak için diğerine saldırması.

https://pandia.ru/text/78/203/images/image049.jpg" width="302" height="201">

Bdellovibrio bakteriyoburSalmonella'ya nüfuz eder

Tarafsızlık- Mikroorganizmaların birbirleri üzerinde herhangi bir etkisi yoktur.

Bilim ve pratiğe en büyük ilgi, mikroorganizmaların yaşamı boyunca oluşan çeşitli biyolojik olarak aktif maddelerdir ve bunlardan biri antibiyotiklerdir.

antibiyotikler- Mikroorganizmaların büyümesini seçici olarak inhibe edebilen, sentetik olarak elde edilen canlı organizmaların veya analoglarının metabolik ürünleri.

"Antibiyotik" terimi, 1889'da V. Vuimen tarafından "antibiyoz" sürecinin aktif ajanını, yani bir canlı organizmanın diğerine uyguladığı direnci belirtmek için önerildi.

1929'da A. Fleming, 1940'ta kristal formda izole edilen penisilini keşfetti.

Antibiyotiklerin bakteriler üzerindeki etki mekanizması

Antibiyotiklerin sınıflandırılması

biyolojik göre Menşei	Biyolojik etki mekanizmasına göre	Biyolojik spektruma göre kimin eylemi	Kimyasal yapıya göre
öbakteri Cins Pseudomo-nas: piyosiyanin, viskozin.	Hücre duvarı sentezini inhibe eder (penisilinler, sefalosporinler)	Dar spektrum (penisilinler, sefalosporinler)	Asiklik bileşikler (mikozamin, pirozamin)
aktinomisetler cins Streptomyces: tetrasiklinler, streptomisinler, eritromisin. Cins Micromono-spora: gentamisinler, sisomycin.	Membranların işlevini ihlal eder (nistatin, kandisidin)	Geniş spektrumlu (tetrasiklinler, kloramfenikol, gentamisin, tobramisin)	Alisiklik bileşikler (actidion, thuik asit). tetrasiklinler
siyanobakteriler (malingolid)	RNA sentezini (kanamisin, neomisin) ve DNA sentezini (actidion, edein) inhibe eder	anti-tüberküloz (streptomisin, kanamisin)	Aromatik bileşikler (gallik asit, kloramfenikol).
Mantarlar (penisilinler)	Purin ve pirimidin sentez inhibitörleri (azaserin)	Antifungaller (nistatin, kandisin)	Oksijen içeren heterosiklik bileşikler (penisilik asit, carlin oksit)
Likenler, bitkiler, algler(usnik asit, klorellin)	Protein sentezini baskılar (kanamisin, tetrasiklinler, eritromisin, kloramfenikol)	antitümör (adriamisin)	makrolidler (eritromisin)
Hayvansal kökenli (interferon, ekmolin)	Solunum inhibitörleri (usnik asit, piyosiyanin). Oksidatif fosforilasyon inhibitörleri (valinomisin, oligomisin)	Antiamebik (fumagillin)	Aminoglikozitler (tobramisin, gentamisin, streptomisinler). polipeptitler (gramisidinler)

Penisilin içeren bir besin ortamında yetiştirildiğinde şarbona neden olan ajanda "İnci kolye fenomeni"

Penisilinin B. anthracis üzerindeki etkisinin bir sonucu olarak, patojenin hücre duvarı yok edilir, bir boncuk dizisi şeklinde birbirine bağlanan küresel protoplastlar oluşur.

Penisilin, birçok bakteri türünde hücre duvarının tahrip olmasına neden olabilir. Yakın zamana kadar stafilokoklar ve streptokoklar buna özellikle duyarlıydı.

Çoğu gram negatif bakteri, penisilini yok eden penisilinaz enzimini sentezleme yetenekleri nedeniyle penisiline direnç geliştirmiştir.

https://pandia.ru/text/78/203/images/image055.jpg" width="204" height="169">.jpg" width="224" height="168">DIV_ADBLOCK169">

Probiyotiklerin olası etki mekanizmaları:

1. Canlı patojenik ve fırsatçı mikroorganizmaların baskılanması.

a) antibakteriyel maddelerin üretimi - bakteriyosinler;

b) gıda kaynakları için rekabet;

c) yapışma reseptörleri için rekabet.

2. Mikrobiyal antagonizma üzerindeki etkisi.

a) enzimatik aktivitede azalma;

b) enzimatik aktivitede artış.

3. Bağışıklığın uyarılması.

b) makrofajların aktivitesinde artış.

Ülkelerde üretilen probiyotik müstahzarlar -

Üye Devletler ve bunlarda kullanılan mikroorganizma türleri

İlaç	Mikroorganizma türü
Sıvı acidophilus süt, yoğurt sınıfı ürünler (yaygın)	L. acidophilus, B. bifidum, B. longum
Biograd, Bifiyogurt Yoga-Line, Laktopriv, Eugalin, Vitacidophilus, Omniflora Mutaflor, Kolivit, Symbioflor, Lactana-B (Almanya)	L. acidophilus, S. thermophilus, B. longum, B. bifidum, E. coli
Gefilak, Baktolak (Finlandiya)	L. rhamnosum, L. casei, S. faecium
Yocult, Bifider, Toyocerin, Lakris, Graugen, Kalsporin, Miarizan, Korolak, Biofermin, Balantol, Lactofed (Japonya)	L. rhamnosum, L. casei, E. coli, B. cereus, L. sporo-genes, B. subtilis, B. thermophilus, C. butyricum, B. pseudolongum, S. faecalis, L. acidophilus, B. toyo
Biokos (Çek Cumhuriyeti)	B. bifidum, L. acidophilus, P. acidilactis
Sinelak, Ortobacter, Bifidigen, Liobifidus, Probiomin, Normoflor, Biolactal (Fransa)	L. bulgaricus, L. acidophilus, B. longum E. coli, S. thermophilus, B. bifidum
Infloran (İsviçre)	S. thermophilus, L. bulgaricus, L. acidophilus
Öncü (İspanya)	Bağırsak mikroflora kompleksi
Ventrax ocido (İsveç)	L. acidophilus, S. faecium, S. thermophilus
Gastroarm, Normoflor (Bulgaristan)	L. acidophilus, L. bulgaricus
Bio-Plus2 (Almanya, Danimarka)	B. subtilis, B. licheniformis
Proteksin, Pripalak (Hollanda)
Baktisubtil (Yugoslavya)
Asit Pak 4 Yollu, Lakto Sak (ABD)	S. thermophilus, L. acidophilus

Listelenen bakteri türlerine ek olarak, Saccaharomyces cerevisiae, Candida pintolopesii, Aspergillus niger ve Aspergillus orysae bazı ülkelerde hayvanlar için probiyotiklerin bir parçası olarak kullanılmaktadır.

Probiyotiklerin üretimi için yaygın olarak kullanılan laktik asit bakterileri, laktik asit streptokokları (S. lactis ve S. cremoris) ve laktobasilleri (L. acidophilum, L. casei, L. plantarum, L. bulgaricum) içerir.

Laktik asit bakterilerinin metabolitleri ve düzenleyici işlevleri

Hareket mekanizması	biyolojik etki
Laktik asit
Asetik, propiyonik, butirik asitlerle sinerji kombinasyonu. Hücre içi ve hücre dışı laktoferrin sentezi.	Patojenik mikroorganizmaların büyümesinin inhibisyonu. Gıda kalıplarında toksinlerin sentezinde azalma.
Karbon dioksit
Anaerobik koşulları ve yüksek kısmi basıncı koruyun.	Aerobik bağırsak bakterilerinde azalmış solunum potansiyeli.
Hidrojen peroksit
Bakterilerde hipotiyosiyanat oluşumu. Katalaza bağımlı mikroorganizmalarda enzim sisteminin tükenmesi. Hücresel enzimlerin inaktivasyonu.	Katalaz pozitif mikroflora üzerinde toksik etki. Azalmış protein sentezi, sınırlı genetik bilgi aktarımı, Gram negatif bakterilerde azalmış yapışma faktörleri.
Enteropatojenik bakterilerde anti-lizozim faktörünün bağlanması. Bakteri hücre duvarlarının parçalanması.	Makrofajların artan fagositik aktivitesi. Gram negatif bakterilerde azalan kolonizasyon aktivitesi. Makrofajların spesifik olmayan uyarılması.
bakteriyosinler
Protein sentezinin kısıtlanması. Hücre zarından taşınma işlemlerinin ihlali, DNA sentezinde azalma, nükleer materyalin sıkışması, ribozomlarda ve lizozomlarda değişiklikler.	Bakterisidal ve bakteriyostatik etki. Bakterilerin bölünme süreçlerinin kısıtlanması, kalıtsal bilgilerin iletilmesinin ihlali. Reseptör bağlarının yok edilmesi.

Rusya'da, 1890'dan beri saf laktik asit bakteri kültürleri kullanılmaktadır. Saf kültürlerin hazırlanması, kuru halde muhafaza edilmesi ve fermente süt ürünleri üretiminde kullanılmasına yönelik yöntemlerin geliştirilmesine ve tarafından büyük katkı sağlanmıştır.

Kuru ısı sterilizasyonu- Pastör fırınlarda (kuru fırın) gerçekleştirilir. Metal ve asbestten yapılmış, elektrikle ısıtılan ve termometre ile donatılmış çift cidarlı bir dolaptır. Kuru ısı, esas olarak laboratuvar cam eşyalarını sterilize eder. İçindeki malzemenin dezenfeksiyonu 1 saat boyunca 160°C'de gerçekleşir.

Bakteriyolojik laboratuvarlarda bu tip sterilizasyon kullanılır. ateşte kalsinasyon (flombing). Bu yöntem bakteriyolojik halkaların, spatulaların, pipetlerin dezenfeksiyonu için kullanılır. Ateş üzerinde kalsinasyon için ispirto lambaları veya gaz brülörleri kullanılır.

İle Fiziksel anlamlar sterilizasyon da geçerlidir UV ışınları ve röntgen. Bu sterilizasyon, sterilize edilecek nesnelerin yüksek sıcaklıklara dayanamadığı durumlarda gerçekleştirilir.

Tyndalizasyon(iki aşamalı sterilizasyon) bakteri sporları ile kontamine olmuş materyali dezenfekte etmek için kullanılır. Bu durumda, malzemeyi ısıtmak için iki mod kullanılır - ilk mod, sporların çimlenmesi ve bakterilerin spor formunun vejetatif olana geçişi için idealdir ve ikinci mod, bitkisel hücrelerin yok edilmesini amaçlar. mikroorganizmalar.

mekanik sterilizasyon(filtre sterilizasyonu) - filtreler (seramik, cam, asbest) ve özellikle nitroselülozun kolloidal çözeltilerinden membran ultrafiltreleri kullanılarak gerçekleştirilir.

Morfoloji" href="/text/category/morfologiya/" rel="bookmark"> morfoloji (hücrenin yuvarlanması, uzaması), kültürel özellikler (stafilokoklar oksijen yokluğunda pigment oluşturmazlar), biyokimyasal veya enzimatik özellikler (üretim) Escherichia'daki adaptif enzimlerin sayısı - laktozlu bir ortamda laktaz enzimi.) Fenotipik değişkenlik ile, kural olarak, belirli bir süre sonra orijinal duruma geri döner (“yeni fenotip” kaybolur).

2. genotipik değişkenlik(kalıtsal) - mutasyonlar ve genetik rekombinasyonların bir sonucu olarak ortaya çıkar. Bu durumda fenotipteki değişiklik, genotipteki bir değişiklikle ilişkilendirilir ve kalıtsaldır. Orijinal fenotipe dönüş yoktur.

mutasyonlar(Latince mutasyondan - değiştirmek) - bunlar, DNA molekülündeki nükleotitlerin yeniden düzenlenmesi ile ilişkili genlerde kalıcı olarak kalıtsal yapısal değişikliklerdir. Mutasyonlar sırasında, genomların parçaları (yani kalıtsal aparat) değişir.

Bakteriyel mutasyonlar spontan (kendiliğinden) ve indüklenmiş (hedefli) olabilir, yani mikroorganizmaların özel mutajenlerle (kimyasallar, sıcaklık, radyasyon vb.)

Bakteriyel mutasyonlar şunlarla sonuçlanabilir:

§ mikroorganizmaların morfolojik özelliklerinde değişiklik;

§ kültürel varlıklarda değişiklik;

§ Mikroorganizmalarda ilaca karşı direncin ortaya çıkması;

§ patojenik özelliklerin zayıflaması vb.

İle genetik rekombinasyonlar transformasyon, transdüksiyon ve konjugasyonun bir sonucu olarak ortaya çıkan genlerin rekombinasyonlarını içerir.

dönüşüm Başka bir hücreden izole edilmiş DNA kullanılarak bir donör bakteriden bir alıcı bakteriye genetik materyalin transferi.

Başka bir hücrenin DNA'sını kabul edebilen bakterilere yetkin denir.

Yeterlilik durumu genellikle logaritmik büyüme aşamasıyla çakışır.

Dönüşüm için özel koşullar yaratmak gerekir, örneğin, besin ortamına inorganik fosfatlar eklendiğinde, dönüşüm sıklığı artar.

transdüksiyon kalıtsal materyalin bir bakteriyofaj tarafından verici bakteriden alıcı bakteriye aktarılmasıdır.

Örneğin bakteriyofaj, flagellar transdüksiyon, enzimatik özellikler, antibiyotik direnci, toksijenite ve diğer özellikleri çoğaltabilir.

Birleşme- genetik materyalin doğrudan temas yoluyla bir bakteriden diğerine aktarılması. Ayrıca, donörden alıcıya tek yönlü bir genetik materyal transferi vardır. Konjugasyon için gerekli bir koşul, donörün sitoplazmik dairesel bir DNA molekülüne - bir plazmit ve spesifik bir doğurganlık faktörü F'ye sahip olmasıdır. Gram-negatif bakteriler, genetik materyalin transferinin gerçekleştiği seks F-tüylerine sahiptir. Verici rolü oynayan hücreler F + ve alıcılar - F–- olarak adlandırılır.

3. Ara değişkenlik - ayrışma. Homojen bir bakteri popülasyonunda, iki tür koloni oluşturan farklı biyolojik özelliklere sahip hücreler ortaya çıkar - R (pürüzlü, yırtık kenarlı, genellikle bakteriler tarafından patojenik özelliklerin kazanılmasıyla ilişkili) ve S (yuvarlak, pürüzsüz, parlak).

Çözüm

Dış ortamdaki mikroorganizmalar, sürekli olarak gelişmelerini, uyum sağlamalarını ve gelişmelerini sağlayan çok sayıda çeşitli olumsuz faktörden etkilenir.

Mikroorganizmalar için türleşmenin itici gücü olan olumsuz çevresel faktörlerdir.

Otokontrol için sorular

1. Çevresel faktörlerin mikroorganizmalar üzerindeki etkisinin sonuçları.

2. Mikroorganizmalar üzerinde en büyük etkiye sahip olan fiziksel faktörler nelerdir?

3. Farklı mikroorganizma türlerinin üremesi için sıcaklık aralığı nedir?

4. Mikroorganizmaların dondurularak kurutulmasının özü nedir?

5. Buchner'ın deneyimini anlatın.

6. Bakteriler için ozmotik basıncın önemi.

7. Ortamdaki hidrojen iyonlarının konsantrasyonuna göre mikroorganizmalar hangi gruplara ayrılır?

8. Dezenfeksiyon ve dezenfektan nedir?

9. Kimyasalların antimikrobiyal etki mekanizmasına göre sınıflandırılması.

10. Antiseptik olarak adlandırılan araçlar nelerdir?

11. Mikroorganizmaları olumsuz etkileyen biyolojik faktörleri sıralar.

12. Bakteriler arasındaki hangi ilişki antagonistik simbiyoza neden olur?

13. Antibiyotiklerin bakteriler üzerindeki etki mekanizması nedir?

14. Probiyotiklerin olası etki mekanizmalarını adlandırın.

15. Bakteriyofajlar hangi gruplara ayrılır?

16. Filtre sterilizasyonu nedir?

17. Bakterilerin fenotipik ve genotipik değişkenliği arasındaki farklar nelerdir.

Mikroorganizmaları hem doğal ortamlarında hem de laboratuvar koşullarında etkileyen temel fiziksel faktörler sıcaklık, ışık, elektrik, kurutma, çeşitli radyasyon türleri, ozmotik basınç vb.

Hava sıcaklığı. Sıcaklığın mikroorganizmalar üzerindeki etkisi, belirli sıcaklık sınırları içinde büyüme ve çoğalma yetenekleriyle değerlendirilir. Her mikroorganizma türü için optimum gelişme sıcaklığı belirlendi. Bu sıcaklığın sınırlarına bağlı olarak bakteriler üç fizyolojik gruba ayrılır:

· Psikrofilik mikroorganizmalar (psikrofiller) - 0 0 C ila 30 ... 35 0 C arasında büyüyebilir ve çoğalabilir ve optimum sıcaklık 15 ... 20 0 C'dir. Bu grubun temsilcileri arasında kuzeyin sakinleri vardır. denizler, toprak, atık su.

· Mezofilik bakteriler - 10 0 C ila 40 ... 45 0 C arasındaki sıcaklıklarda büyüyebilir ve çoğalabilir, optimum sıcaklık 30 ... 37 0 C'dir. En geniş mikroorganizma grubu, çoğu saprofit ve tüm patojenik içerir mikroorganizmalar.

· Termofilik bakteriler - 35 0 С ila 70 ... 75 0 С sıcaklık aralığında büyüyebilir ve çoğalabilir, optimum sıcaklık 50 ... 60 0 С'dir. insan

· Son derece termofilik bakteriler - 40 ila 93 0 C ve üzeri sıcaklıklarda var olabilir. Yüksek sıcaklıklarda bulunma olasılığı, hücre zarlarının lipid bileşenlerinin özel bileşimi, proteinlerin, enzimlerin ve hücresel yapıların yüksek termal stabilitesinden kaynaklanmaktadır.

Yüksek ve düşük sıcaklıklar mikroorganizmaları farklı şekilde etkiler. Düşük sıcaklıklarda hücre, uzun süre var olabileceği bir anabiyoz durumuna girer. Böylece, Escherichia -190 0 C'de 4 aya kadar, listeriosisin etken maddesi -10 0 C'de 3 yıla kadar canlı kalır. Düşük sıcaklıklar çürüme ve fermantasyon işlemlerini durdurur. Bu ilke, ürünlerin buzdolaplarında muhafaza edilmesine dayanmaktadır.

Yüksek sıcaklıklar mikroplar için zararlıdır. Sıcaklık ne kadar yüksek olursa, mikroorganizmaların inaktivasyonu için gereken süre o kadar kısa olur. Yüksek sıcaklıkların bakterisit etkisi, protein denatürasyonu ve ozmotik bariyerin ihlali nedeniyle enzimlerin yok edilmesine dayanır.

Farklı mikroorganizma türlerinin yüksek sıcaklıklara karşı farklı dirençleri vardır, sporların ve vejetatif hücrelerin direnci önemli ölçüde farklılık gösterir. Böylece, patojenik mikroorganizmaların vejetatif formlarının çoğu 80...100 0 C sıcaklıkta 1 dakika içinde ölür ve şarbon sporları 1 saatten fazla kaynamaya dayanabilir.

Görünür radyasyonun etkisi (ışık) .

300 ... 1000 nm dalga boyuna sahip görünür (dağınık ışık), çoğu mikroorganizmanın büyümesini ve hayati aktivitesini inhibe etme yeteneğine sahiptir. Bu bağlamda, mikroorganizmaların ekimi karanlıkta gerçekleştirilir. Görünür ışığın sadece fotosentez için ışık kullanan bakteriler üzerinde olumlu etkisi vardır.

Doğrudan güneş ışığı, mikroorganizmalar üzerinde dağınık ışıktan daha aktif olarak etki eder. Işığın bakterisit etkisi, hücreyi oluşturan maddeleri yok eden hidroksil radikallerinin ve diğer yüksek oranda reaktif maddelerin oluşumu ile ilişkilidir. Örneğin enzimler inaktive edilir.

Saprofit mikroorganizmalar, patojenlere göre ışığa karşı daha dirençlidir. Bunun nedeni, daha sık doğrudan güneş ışığına maruz kaldıkları için onlara daha fazla adapte olmalarıdır. Bu bağlamda, güneş ışığının büyük hijyenik rolüne dikkat edilmelidir. Havanın, toprağın ve suyun üst katmanlarının kendi kendini temizlemesi güneş radyasyonunun etkisi altındadır.

Morötesi radyasyon .

295 ... 200 nm dalga boyuna sahip ultraviyole radyasyon bakterisidal aktiftir, yani mikroorganizmalar üzerinde zararlı bir etkiye sahip olabilir. Ultraviyole radyasyonun etki mekanizması, DNA replikasyonunu kısmen veya tamamen baskılama ve ribonükleik asitlere (özellikle mRNA) zarar verme yeteneğinde yatmaktadır.

Ultraviyole radyasyon, hayvancılık binalarında, laboratuvarlarda, endüstriyel atölyelerde, mikrobiyolojik kutularda hava sanitasyonu için yaygın olarak kullanılmaktadır. Hava dezenfeksiyonu için endüstri çeşitli lambalar üretmektedir. Hayvancılık pratiğinde, IKUF-1 kurulumları, ultraviyole ve kızılötesi radyasyon kaynağı olarak yaygın olarak kullanılmaktadır.

iyonlaştırıcı radyasyon .

İyonlaştırıcı (X-ışını) radyasyon, dalga boyu 0.006 ... 10 nm olan elektromanyetik radyasyondur. Dalga boyuna bağlı olarak gama radyasyonu, beta radyasyonu ve alfa radyasyonu ayırt edilir. Gama radyasyonu biyolojik nesneler üzerinde en aktif etkiye sahiptir, ancak bakterisit özellikleri bile ultraviyole radyasyonun bakterisit özelliklerinden çok daha düşüktür. Bakterilerin ölümü, ancak 45.000 ila 280.000 röntgen arasında yüksek dozlarda ışınlandıklarında meydana gelir. Bazı türler, radyoaktif maruz kalma miktarının 2 ... 3 milyon röntgene ulaştığı nükleer reaktörlerin suyunda hayatta kalabilir. Ayrıca, küçük dozlarda gama radyasyonunun patojenik mikroorganizmalar üzerindeki etkisinin, onların öldürücü özelliklerini artırabileceğine dair veriler elde edilmiştir.

X-ışınlarının etki mekanizması, bir mikrobiyal hücrenin ölümüne veya genetik özelliklerinde (mutasyonlar) bir değişikliğe yol açan nükleer yapılara, özellikle sitoplazmanın nükleik asitlerine zarar vermektir.

Elektrik.

Düşük ve yüksek frekanslı elektrik akımı mikroorganizmaları yok eder. Ultra yüksek frekanslı akımların özellikle güçlü bir bakterisit etkisi vardır. Hücrenin tüm elemanlarının moleküllerini titreştirirler, bunun sonucunda ortam sıcaklığından bağımsız olarak hücrenin tüm kütlesinin hızlı ve düzgün bir şekilde ısınması sağlanır. Ek olarak, yüksek frekanslı akımlara uzun süre maruz kalmanın, besin ortamının bazı bileşenlerinin elektroforezine yol açtığı bulunmuştur. Ortaya çıkan bileşikler, mikrobiyal hücreyi etkisiz hale getirir.

ultrason.

Ultrasonun bakterisidal etkisinin mekanizması (20.000 Hz frekanslı dalgalar), sıvı buharla doldurulmuş sıvı bir ortamda mikroorganizmaların sitoplazmasında bir kavitasyon boşluğunun oluşmasıdır, bu da kabarcıkta basınç oluşmasına yol açar. sitoplazmik yapıların parçalanması. Ultrason, yiyecekleri sterilize etmek ve öğeleri dezenfekte etmek için kullanılır.

Aeroiyonizasyon.

Yapay veya doğal iyonizasyon sırasında havada pozitif veya negatif yük taşıyan hava iyonları ortaya çıkar. Negatif yüklü iyonlar, bakteriler üzerinde en büyük etkiye sahiptir, zaten orta konsantrasyonlarda (1 cm3 havada 5 * 10 4) etki eder. Pozitif yüklü iyonlar daha az belirgin bir bakterisidal etkiye sahiptir, mikroorganizmaların büyümesini ve gelişimini yalnızca yüksek konsantrasyonlarda (1 cm3 havada 106 6) geciktirebilir. Hava iyonlarının gücü, konsantrasyonlarına, maruz kalma süresine ve kaynaktan uzaklığına bağlıdır. Hava iyonları, konut binalarının, işletmelerin atölyelerinin, tıbbi kurumların hava dezenfeksiyonu için kullanılır.

Mikroorganizmalar üzerindeki fiziksel etkinin hemen hemen tüm faktörleri sterilizasyon amacıyla kullanılabilir. Sterilizasyon, patojenik ve patojenik olmayan mikroorganizmaların, bunların vejetatif ve spor formlarının herhangi bir nesnede yok edilmesidir. Sterilizasyon, besin ortamına, cam eşyalara, aletlere, pansumanlara, önlüklere tabi tutulur. Sterilizasyon ayrıca mikrobiyolojik kutulardaki hava ve nesnelere maruz bırakılır.

Çeşitli sterilizasyon yöntemlerinin etki mekanizması aynı değildir, ancak her biri bir mikrobiyal hücrenin hayati süreçlerini bozma yeteneğine dayanır (proteinlerin denatürasyonu, enzim sistemlerinin fonksiyonunun inhibisyonu).

Fiziksel sterilizasyon yöntemleri:

1. Ateşleme (alevlenme). Metal nesneler açığa çıkar (ilmekler, iğneler, neşter, makas, spatula).

2. Kaynatma ile sterilizasyon. Kaynatma, sterilizatörlerde kafes uçlarına yerleştirilmiş iğneleri, şırıngaları, cımbızları, makasları, neşterleri ve diğer aletleri sterilize eder. Aletleri tamamen kaplayacak miktarda damıtılmış su sterilizatöre dökülür. Suya %2 sodyum bikarbonat eklenebilir. 25 - 30 dakika kaynatın.

3. Kuru ısı sterilizasyonu. Sterilizasyon çift cidarlı bir fırında (Pastör fırını) kuru ısıtılmış hava ile gerçekleştirilir. Dış kabin ısıya dayanıklı malzeme ile kaplanmıştır. Sıcaklık kontrolü, bir sıcaklık sensörü kullanılarak gerçekleştirilir. Parşömen kağıdına sarılmış temiz, önceden kurutulmuş cam eşyalar bir fırında sterilize edilir. Sterilizasyon modları: 155…160 0 -2 saat; 165…170 0 – 1…1.5 saat; 180 0 - 1 saat. Maruz kalma süresi, sıcaklığın ayarlanan değere ulaştığı andan itibaren not edilir.

4. Buhar sterilizasyonu. Sterilizasyon, kapağı gevşekçe kapatılmış bir kap olan Koch aparatında gerçekleştirilir. Aparatın altında, seviyesine kadar su dökülen bir kafes standı vardır. İçinde sterilize edilecek nesnelerin (besin ortamı) bulunduğu standın üzerine çıtalı tabanlı bir kap yerleştirilir. Suyun kaynaması sırasında, kabın içeriğini ısıtan buharlar oluşur. Sterilizasyon süresi - 30 ... 40 dakika. Tek sterilizasyon, yalnızca vejetatif bakteri formlarını yok eder ve sporlar canlılıklarını korur, sterilizasyon "kesirli olarak" gerçekleştirilir - arka arkaya üç gün. Bu şekilde karbonhidratlı ortamlar, süt, jelatinli ortamlar sterilize edilir, yani 100 0 C'nin üzerinde ısıtmaya, uzun süre buhara veya kuru ısıya maruz kalmaya dayanamayan substratlar.

5. Tyndalizasyon- bu, 5 ... 6 gün boyunca 56 ... 58 0 C'de bir su banyosunda fraksiyonel sterilizasyondur: ilk gün 2 saat, sonraki günlerde - 1 saat ısıtılırlar. Yöntem, 58 ... 60 0 C'nin üzerindeki sıcaklıklarda yok edilen malzemeleri sterilize etmek için kullanılır - protein içeren maddeler (kan serumu).

6. pastörizasyonBir gıda ürününün kaynatılarak azaltılabilen besin değerini korumak için kullanılan eksik sterilizasyon yöntemidir. Ürün 80 0 C'de 30 dakika ısıtılır ve daha sonra aniden 4 ... 8 0 C'ye soğutulur. Hızlı soğutma, sporların çimlenmesini ve ardından bakteri üremesini önler.

7. Basınç altında buhar sterilizasyonu (otoklavlama). Bu en verimli sterilizasyon yöntemidir. Sterilizasyon ilkesi, yüksek basınçta yoğunlaşan saf doymuş su buharının otoklav içindeki sıcaklığı kaynama noktasının üzerine yükseltmesine dayanır. Buhar basıncının artmasıyla sterilizasyon odasındaki sıcaklık da buna göre artar: 50,6 kPa (0,5 atm.) - 110 ... 112 0 C, 101,3 kPa (1 atm.) - 120 ... 121 0 C, 151.9 kPa (1,5 atm.) - 124 ... 126 0 C, 202,6 kPa (2 atm.) - 132 ... 133 0 C. Otoklavların sterilizasyon odasının tasarımı ve hacmi farklı olabilir (yatay ve dikey), ancak çalışma prensibi aynı kalır. 100 0 C'nin üzerindeki sıcaklıklara dayanabilen besin ortamları, kağıda sarılmış cam eşyalar, pansumanlar, sabahlıklar (bix içinde) bir otoklavda sterilize edilir. Ayrıca mikrobiyal kültürler, kullanılmış besin ortamları, bulaşıklar dezenfekte edilir. Otoklav çalışma modları sürekli izleme gerektirir. Bunun için kimyasal ve biyolojik yöntemler kullanılır.

8. Filtreleme ile sterilizasyon . Malzeme bakteriyolojik filtrelerden geçirilir. Filtrasyon, ince gözenekli filtreler tarafından bakterilerin mekanik olarak tutulması ve filtrenin yapıldığı malzemenin adsorpsiyon kapasitesi ile ilişkilidir. Filtrasyon genellikle ısıtmaya dayanamayan sıvılara maruz bırakılır. Filtreler var:

· seramik - kaolin veya kuvars kumundan yapılırlar;

· asbest - Seitz filtreleri (selülozlu asbest karışımından plakalar);

· membran - ince beyaz kağıda benziyorlar, uygun reaktifler, sıcaklık ve presleme ile işlenmiş hemiselülozdan yapılmışlar. Bu filtreler gözeneklerin çapı ve boyutu ile ayırt edilir, en doğru kalibrasyona sahiptir.

Süzüntülerin sterilliği, sıcaklık kontrollü besin ortamına aşılama ile kontrol edilir.

9. Ultraviyole radyasyon ile sterilizasyon. Laboratuvarda ultraviyole radyasyon kaynağı genellikle hava dezenfeksiyonu için kullanılan antiseptik lambalardır.

Ultrason ile sterilizasyon. Ultrason yardımıyla su, süt, bazı ürünler, ham deriler sterilize edilir. Ultrasonun sterilize edici etkisi, sitoplazmada ortaya çıkan kavitasyon boşluklarının etkisi altında bir bakteri hücresinin yok edilmesiyle ilişkilidir.