Ang paglilinang, pagkita ng kaibhan at paghihiwalay ng ilang uri ng microorganism ay naging posible lamang sa paggamit ng nutrient media. Ang mga ito ay mga espesyal na sangkap na lumikha ng mga kanais-nais na kondisyon para sa pagpaparami at paglaki ng isang tiyak na uri ng mga mikrobyo at fungi, iyon ay, mga purong kultura, na nagbubukas ng posibilidad na pag-aralan ang kanilang mga katangian at epekto sa katawan.
Ngayon, ang nutrient media ay ginagamit kapwa sa gamot at sa iba pang mga lugar, halimbawa, sa industriya ng pagkain, kung saan iba't ibang uri microorganism upang mapabuti ang kalidad ng pagkain, dagdagan ang buhay ng istante, lasa at mabangong katangian. Kaya, ang mga purong kultura na nakahiwalay sa pamamagitan ng paggamit ng nutrient media ay ginagamit sa paggawa ng panaderya, sa industriya ng alak at vodka, sa paglikha ng mga keso at mga produkto ng pagawaan ng gatas, sa paggawa ng mga organikong acid, sa pagbuburo at pangangalaga ng mga gulay at prutas, at sa pharmacology.
Gayunpaman, ang karamihan ng microbiological na pananaliksik ay nasa sektor ng medikal. Iyon ang dahilan kung bakit ang mga klinika at laboratoryo ang pangunahing bumibili ng mga substrate.
Ang BioVitrum ay isang nangungunang tagagawa at tagapagtustos ng mga kagamitang medikal, diagnostic at laboratoryo, pati na rin ang mga consumable. Isa sa mga aktibidad ay ang paggawa ng nutrient media para sa paglilinang at paglilinang ng mga mikroorganismo. Ang mga produkto ng kumpanya ay ginawa mula sa mataas na kalidad na hilaw na materyales, na naglalaman ng mga bahagi ng dugo ng kabayo at tupa. Ang bentahe ng pinagmumulan ng materyal na ibinibigay mula sa UK ay ang mga espesyal na kondisyon kung saan pinalaki ang mga hayop. Ang kanilang pagkain ay hindi naglalaman ng mga antibiotics, na ginagarantiyahan ang sterility ng culture media.
Nag-aalok ang BioVitrum na bumili ng nutrient media ng lahat ng uri na nakakatugon sa mga pamantayan sa Europa.
Mga Kinakailangan sa Kapaligiran
Ang mga substrate na ginawa ngayon, na ginagamit para sa paglilinang, pagkita ng kaibhan at paghihiwalay ng mga mikroorganismo, ay dapat matugunan ang ilang pamantayan:
- Nutrisyon . Ang kapaligiran ay mahalaga para sa nutrisyon at enerhiya na pangangailangan ng mga pananim na pinatubo. Lalo na, naglalaman ito ng mga bitamina, mineral at organikong (natural) na mga sangkap, mga elemento ng bakas na kasama sa komposisyon ng cellular at enzyme-activate at non-naturally made amino acids.
- Ang pagkakaroon ng mga hydrogen ions. Dahil ang mga microorganism ay makakakain lamang kung ang cell membrane ay permeable, ang isang pinakamainam na balanse ng pH ay kinakailangan upang matiyak ito.
Para sa mga pathogenic microbes, kailangan ng mahinang alkaline nutrient medium; para sa mga pathogens ng tuberculosis, angkop ang mahinang acidic na reaksyon.
- Buffer na kapaligiran. Tinitiyak ng ari-arian na ito ang katatagan ng balanse ng pH, na neutralisahin ang mga produkto ng pagkabulok.
- Ang isotonicity ay isang indicator ng presyon sa loob ng cell at sa kapaligiran, na dapat ay nasa parehong antas para sa karamihan ng mga microorganism.
- Sterility ng kapaligiran. Mahalagang ibukod ang pagkakaroon ng mga dayuhang mikrobyo na maaaring makaapekto sa paglago ng pananim ng interes.
Ang media ay dapat na may halumigmig, kaya ang siksik at tuyo na media ay nangangailangan ng paunang paggamot. Ang media ay dapat magkaroon ng redox na katangian, transparency. Ang nasabing isang tagapagpahiwatig bilang pagkakapareho ay nagbibigay ng posibilidad ng paglaki ng iba't ibang mga microorganism.
Pag-uuri
Ang bawat kultura ay nangangailangan ng ilang mga kondisyon para sa masaganang pagpaparami ng cell, ang kanilang masinsinang paglaki at pinakamainam na pag-unlad, kaya mahirap lumikha ng isang unibersal na kapaligiran. Bilang karagdagan, depende sa mga layunin ng pananaliksik, ang mga parameter ng nutrient medium ay nagbabago.
Ngayon, maraming uri ng media ang nalikha na naiiba sa mga katangian:
- Ayon sa komposisyon ng mga paunang sangkap, inuri sila sa sintetiko at natural. Ang huli ay gawa sa mga hilaw na materyales ng gulay o hayop. Upang mabawasan ang mga gastos, ginagamit ang mga produktong hindi pagkain, tulad ng bone meal o coagulated blood clots. Ang synthetic ay nakuha mula sa organic, iyon ay, natural at mineral na mga bahagi.
- Ayon sa pagkakapare-pareho, ang media ay nahahati sa likido, siksik, semi-likido. Ang pagtaas sa density ay isinasagawa sa pamamagitan ng pagdaragdag ng gelatin o agar-agar. Ang huling sangkap ay hindi isang nutrient para sa microbes, ang gawain nito ay upang lumikha ng pinakamainam na density. Kasabay nito, ang natutunaw na punto ng agar ay umabot sa 80-100 degrees, na ginagawang posible na lumaki ang mga microorganism na kailangang lumikha ng mga kondisyon ng greenhouse sa media na naglalaman ng agar. Ang gelatin ay isang protina ng hayop, kaya ang mga substrate na naglalaman nito ay maaaring gamitin sa temperatura ng silid. Ang mga siksik na sangkap ay kinabibilangan ng coagulated blood serum, puti ng itlog, patatas. Ang ilan ay ginawa sa anyo ng mga pulbos at nangangailangan ng paglusaw at pagdadala sa nais na pagkakapare-pareho bago gamitin.
- Ang komposisyon ng nutrient media ay simple at kumplikado. Ang una ay mga meat-and-peptoid broths, masustansyang gulaman, at peptoid na tubig. Ang pangalawang uri, bilang karagdagan sa mga orihinal na sangkap, ay kinabibilangan ng mga sangkap na nagtataguyod ng paglaki ng ilang bakterya. Mayroon ding mga espesyal na media na ginagamit kung saan ang bakterya ay hindi maaaring tumubo sa isang normal na sangkap.
- Elective nutrient media. Ginagamit ang mga ito upang ihiwalay ang isang partikular na uri ng bakterya sa pamamagitan ng pagpigil sa paglaki ng iba. Ang likidong media ng kategoryang ito ay tinatawag na accumulative.
- Ginagamit ang differential diagnostic media upang ihiwalay ang isang kultura sa pamamagitan ng aktibidad na enzymatic nito. Ang mga substrate na pang-imbak ay ginagamit kapag nagdadala ng mga materyales sa lugar ng pag-aaral.
Paghahanda ng media
Ang katumpakan ng mga resulta na nakuha ay nakasalalay sa kalidad ng nutrient medium, samakatuwid, bilang karagdagan sa pagsunod sa recipe, kinakailangan na sumunod sa mga sumusunod na kinakailangan:
- Mga sterile na pinggan. Sa mga kondisyong pang-industriya, kung saan ang produksyon ay isinasagawa sa isang malaking sukat, ang pagluluto ng media ay isinasagawa sa mga espesyal na boiler. Sa mga laboratoryo, kapag kinakailangan upang makakuha ng isang maliit na halaga ng media ng kultura, dapat gamitin ang enamel o mga babasagin na hindi naglalabas ng mga acid at alkalis. Ang lahat ng mga tangke ay pre-washed, anglaw at tuyo.
- Ang dati nang hindi nagamit na mga babasagin ay isterilisado sa hydrochloric acid, kung saan ito ay naiwan sa magdamag, pagkatapos nito ay banlawan alinsunod sa itinatag na regimen.
Ang proseso ng paghahanda ng nutrient media mismo ay binubuo ng mga sumusunod na hakbang:
- Pagluluto, na isinasagawa alinman sa apoy at paliguan ng tubig (para sa mga kondisyon ng laboratoryo), o sa mga boiler at autoclave na may suplay ng singaw (sa isang pang-industriya na sukat).
- Ang pagtatakda ng pinakamainam na ratio ng pH ay nangangailangan ng paggamit ng mga tagapagpahiwatig ng papel, mga potentiometer, mga electrodes ng salamin.
- Ang paglilinaw ay isinasagawa sa pamamagitan ng pagpapasok sa substrate, pinalo ng tubig, puti ng itlog o serum ng dugo, na, sa panahon ng proseso ng pagluluto, ay nagpasok ng mga nasuspinde na mga particle sa sediment.
- Ang likidong media ay sumasailalim sa pagsasala, at batay sa tinunaw na gulaman. Upang gawin ito, gumamit ng tela at papel na moistened na mga filter. Ang paglilinis ng mga substrate ng agar ay makabuluhang mas mahirap, dahil ang pangunahing bahagi ay mabilis na nagpapatigas. Samakatuwid, ang prosesong ito ay madalas na pinapalitan ng pag-aayos.
- Isinasagawa ang sterilization para sa bawat substrate sa isang tiyak na tagal ng panahon at sa kinakailangang temperatura. Ang mga parameter na ito ay tinukoy sa recipe ng pagluluto.
Ang huling yugto ay ang packaging ng nutrient media sa mga pinggan - ito ay mga vial, test tubes, Petri dish. Ang sisidlan ay 2/3 lamang ang napuno dahil sa panahon ng isterilisasyon ang medium ay lumalawak sa volume at maaaring umabot sa plug, na makakaapekto sa kadalisayan at mga katangian ng substrate.
Ang produkto ay ibinubuhos gamit ang mga funnel, syringe, pipette o iba pang mga device.
Ang bawat sisidlan ay may label. Ang pangalan ng produkto ay inilapat sa mga sisidlan, ang dami at petsa ng produksyon ay ipinahiwatig.
Ang natapos na kapaligiran ay dumaan sa ilang mga yugto ng kontrol. Ang unang pagsubok para sa sterility ay isinasagawa sa pamamagitan ng paglalagay ng produkto sa isang termostat.
Ang nutrient medium ay ipinadala sa mga laboratoryo para sa chemical testing, ang layunin nito ay upang magtatag ng isang tumpak na antas ng pH.
Isinasagawa ang biological control, na binubuo sa pagtukoy ng mga nutritional na katangian ng daluyan.
Mga uri ng kulturang media
Ayon sa kanilang layunin, ang mga nutrient na komposisyon ng medium na ginawa ngayon ay maaaring nahahati sa mga sumusunod na kategorya:
- Mga unibersal na kapaligiran. Ang mga ito ay angkop para sa pagpapalaganap ng iba't ibang uri ng pananim.
- Selective o selective na mga kapaligiran. Ginagamit upang ihiwalay ang isang uri ng mikroorganismo.
- Differential diagnostic media, na nagbubukas ng posibilidad na makilala ang bakterya sa pamamagitan ng kanilang mga katangian ng enzymatic, iyon ay, mga produktong basura.
- Mga espesyal na kapaligiran. Ginagamit ang mga ito upang palaguin ang mga pananim na hindi makapagpaparami sa mga unibersal na substrate.
- Ginagamit ang differential selective media para sa mabilis na pagkilala sa bacteria.
- Semi-synthetic nutrient compositions ng medium, na kinabibilangan ng mga bahagi ng natural na pinagmulan.
Nag-aalok ang BioVitrum ng malawak na hanay ng nutrient media, na ibinibigay kapwa sa mga vial na may iba't ibang laki at handa sa mga Petri dish. Ang huli ay tinatakan ng isang espesyal na idinisenyong cellulose film, na nagsisiguro sa sterility ng medium at isang shelf life na hanggang 60 araw.
Ang bentahe ng BioVitrum ay mabilis na paghahatid, mapagkumpitensyang presyo, pagsunod sa mga pamantayan ng GOST. Lahat ng nutrient na komposisyon ng medium ay ginawa sa sarili naming mga pasilidad, nilagyan ng high-tech na kagamitan mula sa Oxoid LTD na hilaw na materyales mula sa isang kilalang tagagawa ng UK.
Sa BioVitrum maaari kang bumili ng 18 mga produkto na nakalista sa catalog, na napapailalim sa multi-stage na kontrol. Ang mga produkto ay binibigyan ng kumpletong hanay ng dokumentasyon at mga marka sa Russian.
100 r bonus sa unang order
Piliin ang uri ng trabaho gawaing kurso Abstract Master's thesis Report on practice Article Report Review Pagsusulit Monograph Paglutas ng problema Plano ng negosyo Mga sagot sa mga tanong malikhaing gawain Pagguhit ng Sanaysay Mga Sanaysay Pagsasalin ng mga Presentasyon Pagta-type ng Iba Pang pagtaas ng pagiging kakaiba ng teksto PhD thesis Gawain sa laboratoryo Tulong online
Pahingi ng presyo
Sa microbiology, ang nutrient medium ay isang medium na naglalaman ng iba't ibang mga compound ng kumplikado o simpleng komposisyon, na ginagamit para sa pagpapalaganap ng mga microorganism sa laboratoryo o
mga kondisyong pang-industriya. Ang anumang medium ng kultura ay dapat sumunod sa mga sumusunod
mga kinakailangan: naglalaman ng lahat ng mga sustansya na kinakailangan para sa paglaki sa isang madaling natutunaw na anyo; magkaroon ng pinakamainam na kahalumigmigan, lagkit, pH, maging isotonic, balanseng may mataas na buffer
kapasidad at, kung maaari, transparent. Mga sangkap na hindi kayang i-synthesize ng mga cell sa kanilang sarili - tinatawag mga kadahilanan ng paglago. Mga organismo na nangangailangan ng kanilang karagdagan n-Xia auxotrophic para sa kani-kanilang koneksyon. Isang pangkat na may kakayahang umunlad sa mga simpleng kapaligiran, prototrophic. Oligotrophic(sa mahihirap), ang kabaligtaran ng grupo para sa kanila ay bacteria copiotrophic– kayang lumaki sa masaganang substrate ng pagkain.
Komposisyon nahahati ang nutrient media sa natural at gawa ng tao. Ang natural na media ay media na binubuo ng mga produkto ng halaman o hayop na pinagmulan na may hindi tiyak komposisyong kemikal. Mga halimbawa - isang halo ng mga produktong degradasyon ng mga protina na nabuo sa panahon ng kanilang hydrolysis. Ang pagkilos ng mga enzyme tulad ng trypsin, pancreatin, papain ay humahantong lamang sa bahagyang (hindi kumpletong) hydrolysis ng mga protina, na nagreresulta sa pagbuo ng peptons. Ang pangunahing layunin ng naturang nutrient media ay paghihiwalay, paglilinang, paggawa ng biomass at pagpapanatili ng kultura.
Kasama rin sa media ng hindi tiyak na komposisyon ang media semi-synthetic. Ang mga kilalang compound ay ipinakilala sa gayong kapaligiran kung malinaw na kinakailangan; at magdagdag din ng isang maliit na halaga ng lebadura o katas ng mais (o anumang iba pang natural na produkto) upang matugunan ang hindi kilalang mga pangangailangan sa paglago. Ang ganitong media ay kadalasang ginagamit sa industriyal na paglilinang ng mga biological na bagay upang makakuha ng mga produktong metabolic.
Sintetikong media- ang mga ito ay media ng isang tiyak na komposisyon, na kinakatawan ng dalisay mga kemikal na compound kinuha sa tiyak na tinukoy na mga konsentrasyon at ratio ng mga indibidwal na elemento.
Ang pangunahing layunin ng naturang nutrient media ay pag-aralan ang mga tampok ng pisyolohiya at metabolismo.
microorganism, paghihiwalay ng mga genetic recombinant, atbp.
Sa pamamagitan ng appointment: Mga elektibong kapaligiran magbigay ng pag-unlad ng isa o buong physiological na grupo ng microorganism. Differential diagnostic Ang mga kapaligiran ay ginagamit para sa mabilis na pagkilala sa mga malapit na nauugnay na microorganism species, para sa pagkilala sa mga species, sa clinical bacteriology. Ang prinsipyo ng pagbuo ng differential-diagnostic media ay nakabatay sa katotohanan na ang iba't ibang uri ng bakterya ay naiiba sa bawat isa sa biochemical na aktibidad at may hindi pantay na hanay ng mga enzyme na sumisira sa mga substrate na bumubuo sa nutrient medium.
Ang komposisyon ng d.-d. isama ang: a) ang pangunahing nutrient medium na nagsisiguro sa pagpaparami ng bakterya; b) isang tiyak na substrate ng kemikal, ang kaugnayan kung saan ay isang tampok na diagnostic para sa isang naibigay na mikroorganismo; c) isang tagapagpahiwatig ng kulay, ang pagbabago ng kulay kung saan ay nagpapahiwatig ng isang biochemical reaksyon at ang pagkakaroon ng enzyme system na ito sa microorganism na pinag-aaralan.
Sa pamamagitan ng pagkakapare-pareho maaaring maging ang mga kapaligiran likido, semi-likido,solid, maluwag. Ang mga produktong likido ay nakukuha sa pamamagitan ng pagtunaw ng ilang mahahalagang hanay ng mga sustansya sa tubig. sa-in, macro- at microelements. Ang paglaki ng mga mikroorganismo sa isang likidong daluyan ay maaaring mangyari sa panaka-nakang (sarado) sistema, sa kasong ito, pagkatapos ng pagbabakuna ng daluyan, ni ang pagdaragdag o ang pag-alis ng anumang mga bahagi, maliban sa bahagi ng gas, ay hindi nangyayari. Sa dumadaloy (tuloy-tuloy) Ang paglilinang ay nailalarawan sa pamamagitan ng patuloy na supply ng mga sariwang sustansya sa bilis na katumbas ng bilis ng pag-alis ng daluyan ( bukas na sistema). Ang paghahanda ng solid media ay nakakamit sa pamamagitan ng pagdaragdag ng ilang mga sealant sa likidong media (agar, gelatin, silica gel, carrageenan). Ang maluwag na media ay ginagamit sa pang-industriyang microbiology para sa paglilinang ng ilang partikular na producer ng mga physiologically active compound. Kasama sa naturang media, halimbawa, pinakuluang dawa, bran.
Bahagi Kanyang kapaligiran may kasamang pangunahing background (peptone at K2HPO4), isang indicator (bromothymol blue, bromocresol purple, Andrede) at isa sa mga carbohydrates o alcohol na pinag-aralan. Matukoy ang pagkakaiba sa pagitan ng maliit at
isang malaking motley row ng Hiss. Kasama sa maliit na serye ng Hiss ang mga sumusunod na carbohydrates at alkohol: glucose, sucrose, lactose, maltose, at mannitol. Kasama sa malalaking motley series ng Giss, bilang karagdagan sa mga bumubuo ng isang maliit na serye, iba pang carbohydrates at alkohol, tulad ng arabinose, rhamnose, sorbitol, dulcite, atbp. Maaaring gamitin ang Giss media sa isang likido o semi-likido na estado (0 ay idinagdag sa likidong daluyan, 5% agar)
Ang paglabas ng mga produktong metabolic ay naitala sa pamamagitan ng pagbabago ng pH ng daluyan. Halimbawa, kung ang Hiss medium ay naglalaman ng bromthymol blue indicator, magbabago ang kulay nito depende sa pH tulad ng sumusunod: pH = 7.0 - berde; pH > 7.0 - asul; pH< 7,0 – желтый.
microorganism anaerobic cultivation microbiology
Para sa paglilinang ng mga microorganism, ginagamit ang nutrient media ng iba't ibang komposisyon, na dapat maglaman ng lahat ng mga sangkap na kinakailangan para sa paglaki. Ang mga pangangailangan ng mga microorganism para sa mga sustansya ay lubhang magkakaibang at natutukoy ng mga katangian ng kanilang metabolismo. Samakatuwid, walang unibersal na media na pantay na angkop para sa paglaki ng lahat ng mga mikroorganismo.
Sa isang malawak na kahulugan, ang nutrient medium ay dapat matugunan ang mga sumusunod na kinakailangan:
1) isama ang cell accessible mapagkukunan ng enerhiya. Para sa ilang mga organismo (phototrophs) ang source na ito ay magaan, para sa iba ito ay isang organic (chemoorganotrophs) o inorganic (chemolithotrophs) substrate.
2) naglalaman ng lahat ng kailangan mga bahagi para sa pagpapatupad ng mga nakabubuo na proseso sa isang hawla. Bukod dito, ang mga sintetikong kakayahan ng mga microorganism ay maaaring mag-iba mula sa paggamit ng carbon dioxide bilang ang tanging pinagmumulan ng carbon (autotrophs) hanggang sa pangangailangan para sa mas pinababang carbon compound - mga acid, alkohol, carbohydrates, atbp. (heterotrophs).
Sa makitid na kahulugan ng salita anumang artificial growth medium ay dapat matugunan ang mga sumusunod na kinakailangan : naglalaman ng lahat ng nutrients na kailangan para sa paglaki sa isang madaling natutunaw na anyo; magkaroon ng pinakamainam na nilalaman ng kahalumigmigan, pinakamainam na lagkit, pinakamainam na pH (pinakamainam para sa isang partikular na mikroorganismo), maging isotonic, balanseng may mataas na kapasidad sa buffering at, kung maaari, transparent.
daluyan ng nutrisyon sa microbiology, tinatawag ang media na naglalaman ng iba't ibang mga compound ng kumplikado o simpleng komposisyon, na ginagamit para sa pagpaparami ng mga microorganism, ang kanilang paglilinang at pangangalaga sa mga kondisyon ng laboratoryo o pang-industriya.
Ang pagpili ng komposisyon ng nutrient medium ay nakasalalay sa isang malaking lawak sa mga layunin ng eksperimento o proseso ng industriya.
Mayroong sumusunod na klasipikasyon ng nutrient media:
· Komposisyon nahahati ang nutrient media sa natural, synthetic at semi-synthetic. Maaari rin silang maiuri bilang media tiyak at walang katiyakan komposisyon. natural ay tinatawag na media na binubuo ng mga produkto ng halaman o hayop na pinagmulan na may hindi tiyak na komposisyon ng kemikal. Ang mga halimbawa ng nutrient media ng ganitong uri ay ang media na pinaghalong mga produktong degradasyon ng mga protina (casein, mammalian muscles) na nabuo sa panahon ng kanilang hydrolysis. Ang nutrient media ng hindi tiyak na komposisyon ay maaari ding isama ang media na nakuha batay sa mga materyales ng halaman: potato agar, tomato agar, decoctions ng cereal, yeast, beer wort, infusions ng hay at straw, atbp. Ang pangunahing layunin ng naturang nutrient media ay paghihiwalay, paglilinang, pagkuha ng biomass at pagpapanatili ng mga kultura ng mga mikroorganismo.
Kabilang sa mga kapaligiran hindi tiyak na komposisyon isama ang mga kapaligiran semi-synthetic. Ang mga kilalang compound ay ipinakilala sa gayong kapaligiran kung malinaw na kinakailangan; at magdagdag din ng isang maliit na halaga ng lebadura o katas ng mais (o anumang iba pang natural na produkto) upang matugunan ang hindi kilalang mga pangangailangan sa paglago. Ang ganitong media ay kadalasang ginagamit sa pang-industriyang paglilinang ng mga biological na bagay upang makakuha ng mga produktong metabolic, halimbawa, upang makakuha ng mga amino acid, antibiotics, bitamina, atbp.
Sintetikong media ay mga kapaligiran tiyak na komposisyon, na kinakatawan ng mga purong kemikal na compound na kinuha sa tiyak na tinukoy na mga konsentrasyon at ratio ng mga indibidwal na elemento. Ang mga ipinag-uutos na bahagi ng naturang mga kapaligiran ay mga di-organikong compound(mga asin) at mga sangkap na naglalaman ng carbon at nitrogen (karaniwang mga kinatawan ay glucose at (NH 4) 2 SO 4. Kadalasan, idinaragdag ang naturang media mga solusyon sa buffer at chelating compounds. Pangunahing layunin naturang nutrient media - ang pag-aaral ng mga katangian ng pisyolohiya at metabolismo ng mga microorganism, ang paghihiwalay ng mga genetic recombinants, atbp.
· Sa pamamagitan ng appointment ang mga kapaligiran ay nahahati sa pangunahing, elektibo (selective) at kaugalian diagnostic. Upang pangunahing isama ang media na ginagamit para lumaki ang maraming bacteria. Ito ay nutrient broth at nutrient agar. Ang ganitong media ay nagsisilbing batayan para sa paghahanda ng mas kumplikadong kulturang media. Mga elektibong kapaligiran magbigay ng katangi-tanging pag-unlad ng isa o buong pisyolohikal na pangkat ng mga mikroorganismo. Halimbawa, upang ihiwalay ang staphylococci, ang sodium chloride sa isang konsentrasyon na 7.5% ay maaaring idagdag sa daluyan. Sa konsentrasyong ito, pinipigilan ang paglaki ng iba pang bakterya. Ginagamit ang elective media sa unang yugto ng paghihiwalay ng purong kultura ng bacteria, i.e. kapag tumatanggap ng kulturang nagpapayaman.
Differential diagnostic na kapaligiran ay ginagamit para sa mabilis na pagkilala sa malapit na nauugnay na mga species ng microorganism, para sa pagtukoy ng mga species, sa clinical bacteriology, atbp. Ang komposisyon ng differential diagnostic medium ay kinabibilangan ng: a) ang pangunahing nutrient medium na nagsisiguro sa pagpaparami ng bacteria; b) isang tiyak na substrate ng kemikal, ang kaugnayan kung saan ay isang tampok na diagnostic para sa isang naibigay na mikroorganismo; c) isang tagapagpahiwatig ng kulay, ang pagbabago ng kulay kung saan ay nagpapahiwatig ng isang biochemical reaksyon at ang pagkakaroon ng enzyme system na ito sa microorganism na pinag-aaralan. Halimbawa, ginagawang posible ng medium ng Endo na makilala ang mga clone na nagbuburo ng lactose mula sa mga clone na hindi.
· Sa pamamagitan ng pagkakapare-pareho maaaring maging ang mga kapaligiran likido, semi-likido, solid, marupok. Media ng likidong kultura nakuha sa pamamagitan ng pagtunaw sa tubig ng isang tiyak na mahahalagang set ng nutrients, macro- at microelements. Sa komposisyon, maaari silang maging natural at sintetiko.
· Media sa solid state sa anyo ng mga siksik na gel ay ginamit sa bacteriology mula pa noong panahon ni R. Koch. Ang pinakamahalagang bentahe ng paggamit ng solid media ay ang mga mikroorganismo ay maaaring lumaki sa kanila sa anyo ng mga kolonya na nabuo mula sa mga indibidwal na selula sa populasyon. Ang paghahanda ng solid nutrient media ay nakakamit sa pamamagitan ng pagdaragdag ng ilang mga sealant sa likidong media, na maaaring maging agar, gelatin, silica gel, carrageenan.
Semi-likidong media naglalaman ng isang sangkap na bumubuo ng gel sa isang mababang (0.3 - 0.7%) na konsentrasyon at may malambot na pagkakapare-pareho na parang halaya. Ang ganitong media ay angkop para sa pag-aaral ng cell motility at chemotaxis, paglilinang microaerophiles.
maramihan ang mga kapaligiran ay isang masa ng mas marami o mas kaunting durog at basang hilaw na materyales (karaniwan ay gulay). Ang kanilang pangunahing layunin ay ang paggamit sa industriya ng pagkain (pagkuha ng toyo o rice vodka), agrikultura(ensiling fodder), atbp.
Sa bacteriological practice, ang dry nutrient media ay madalas na ginagamit, na nakuha sa isang pang-industriya na sukat - tryptic hydrolysates ng murang mga produktong hindi pagkain (basura ng isda, karne at pagkain ng buto, teknikal na casein) kasama ang pagdaragdag ng agar. Ang dry media ay medyo murang hilaw na materyales, maaaring maimbak nang mahabang panahon, maginhawa para sa transportasyon, may medyo karaniwang komposisyon, at ang media ng kultura ay maaaring mabilis at madaling maihanda sa kanilang batayan.
Media para sa lumalaking anaerobic microbes.Meat peptone liver broth Keith - Tarozzi (MPPB). Ang sariwa o nagyelo na atay (mas mabuti kaysa sa baka) ay pinutol sa maliliit na piraso, ibinuhos ng pantay na masa ng tubig mula sa gripo, pinakuluan ng isang oras, sinala sa cotton wool at 3 bahagi ng sabaw ng karne-peptone ay idinagdag sa 1 bahagi ng nakuha na katas. . Ang halo ay pinainit hanggang sa isang pigsa, ang chemically purong karaniwang asin ay idinagdag (1.25 g bawat 1 litro ng daluyan) at ang pH ay nababagay sa 7.6-7.8, pagkatapos nito ay pinakuluan sa loob ng 15 minuto at sinala sa pamamagitan ng papel o moistened cotton filter . Ang mga pinong tinadtad na piraso (1.5-2 g) ng atay ay idinagdag sa na-filter na sabaw, batay sa 1 litro ng sabaw 100 g ng atay (ang atay ay paunang nalinis ng mga pelikula at hugasan ng tubig). Ang ilang mga naturang piraso ay inilalagay sa isang test tube, 7-10 ML ng sabaw ay ibinuhos sa isang mataas na haligi, ang vaseline o paraffin oil ay naka-layer sa ibabaw nito.
Ang sabaw na may mga piraso ng atay ay isterilisado sa ilalim ng sobrang presyon na 0.1 MPa sa sa loob ng 30 min. Upang maalis ang oxygen mula sa test tube, ang medium ay pinakuluan ng 10 minuto bago inoculation at mabilis na pinalamig ng tubig.
Semi-fluid agar para sa anaerobes. Sa MPB magdagdag ng 0.25-0.75% agar-agar at 1% glucose; katamtamang pH 7.4. Ang daluyan ay ibinubuhos sa matataas na hanay sa mga tubo ng pagsubok. I-sterilize gamit ang fractionally flowing steam sa loob ng 15-20 minuto sa loob ng 3 araw.
Media para sa lumalaking lactic acid bacteria.Gatas (buo). Painitin hanggang sa kumulo. Ibuhos sa isang tube flask at ilagay para sa 10-20 oras sa isang malamig na lugar upang pag-aayos ng cream. Pagkatapos ng panahong ito, ang sinagap na bahagi ng gatas ay ibinubuhos sa gripo ng tubo sa mga test tube, na isinasara gamit ang mga plug ng cotton. I-sterilize ang fractionally sa 100 ° C sa loob ng tatlong araw sa loob ng 20 minuto o sa 112 ° C isang beses sa loob ng 30 minuto.
Skimmed milk. Upang makakuha ng skimmed milk, ang buong gatas ay pinaghihiwalay at pagkatapos ay magpatuloy sa parehong paraan tulad ng kapag gumagamit ng buong gatas.
Hydrolyzed milk (ayon kay Bogdanov). Kumuha ng 1 litro na pinakuluang at pinalamig sa 45 ° C skim milk, itakda ang pH sa 7.6-7.8, magdagdag ng 0.5 g ng pancreatin powder (dating diluted sa isang maliit na halaga maligamgam na tubig) o 2-3 g ng durog na pancreas at pagkatapos ng ilang minuto 5 ml ng chloroform. Pagkatapos nito, ang bote ay lubusan na inalog, mahigpit na sarado na may tapon na takip at inilagay sa loob ng 3 araw sa isang termostat sa temperatura na 40 ° C na may pang-araw-araw na pag-alog ng likido. Matapos ang tinukoy na panahon, upang maalis ang chloroform, ang bote ay binuksan, ang likido ay sinala at natunaw ng 2-3 beses na may tubig na gripo. Dalhin ang pH ng medium sa 7.0-7.2 at isterilisado.
Agar mula sa hydrolyzed milk. Ang 1.5-2% agar ay idinagdag sa hydrolyzed milk, natunaw, ibinuhos sa mga test tube at isterilisado sa ilalim ng sobrang presyon ng 0.1 MPa sa sa loob ng 15 min. Lumalaki nang maayos ang lactic acid sticks sa medium na ito.
Serum agar. Ang 7.5 g ng agar ay kinuha bawat 100 ML ng gripo ng tubig, pinakuluan hanggang sa ganap na matunaw, ang tubig ay idinagdag sa orihinal na dami (i.e., sa isang dami na katumbas ng dami ng evaporated na tubig), 400 ML ng pre-prepared whey ay idinagdag, nakalantad sa umaagos na singaw sa loob ng 30 min, sinala sa isang layer ng cotton wool, ibinuhos sa mga test tube at isterilisado sa ilalim ng presyon ng 0.05 MPa sa loob ng 30 minuto.
Repolyo Miyerkules. Ang 200 g ng tinadtad na repolyo (o alfalfa) ay ibinuhos sa 100 ML ng tubig at pinakuluan sa isang kasirola sa loob ng 10 minuto, pinipiga sa isang double layer ng gauze. Ang nagresultang likido ay sinala at natunaw ng 2 beses na may tubig na gripo. 2% glucose at 1% peptone ay idinagdag, ibinuhos sa mga test tube at isterilisado ng tatlong beses na may overpressure na 0.05 MPa sa loob ng 15 minuto.
Medium para sa lumalaking osmophilic yeast. Humigit-kumulang 1 litro ng distilled water ay idinagdag na may 200 g ng preheated honey, 1 g ng potassium diphosphate, 0.5 g ng magnesium sulfate, 0.5 g ng ammonium tartrate, 0.1 g ng sodium chloride at 0.1 g ng potassium chloride. Ang lahat ng mga sangkap ay halo-halong at isterilisado sa ilalim ng sobrang presyon na 0.1 MPa sa loob ng 20 minuto.
Growth medium para sa mga halophile. Ang karaniwang meat-peptone media ay ginagamit sa pagdaragdag ng 10-15 hanggang 20-30% na asin. Bilang karagdagan, sa paggawa ng siksik na nutrient media, ang porsyento ng agar ay nadagdagan din. Isinasagawa ang sterilization sa ilalim ng overpressure na 0.1 MPa sa loob ng 20 minuto.
enrichment media. Mueller Miyerkules. Sa 4.5 g ng chemically pure chalk, na dati nang isterilisado sa pamamagitan ng tuyo na init, magdagdag ng 90 ML ng MPB at isterilisado sa ilalim ng overpressure na 0.1 MPa sa loob ng 20 minuto. Maghanda: a) hyposulfite solution (50 g ng purong mala-kristal na hyposulfite ay ibinuhos hanggang 100 ML na may distilled water, isterilisado na may dumadaloy na singaw sa loob ng 30 minuto); b) solusyon sa yodo (20 g ng metallic iodine at 25 g ng potassium iodide ay ibinuhos hanggang 100 ml na may distilled water). Bago ang paghahasik, 10 ml ng hyposulfite solution at 2 ml ng iodine solution ay sterilely na idinagdag sa sabaw na may tisa. Iling ang timpla habang idinaragdag mo ang bawat sangkap. Ibuhos sa sterile test tubes o flasks.
Miyerkules Killian. Steril na pagdaragdag ng 1 ml hanggang 100 ml ng regular na BCH bago gamitin may tubig na solusyon(1:1000) makikinang na berde.
Ang pagsasaliksik ng bakterya ay nangangailangan ng masusing gawain sa maraming kagamitan at instrumento. Upang ang mga microorganism ay dumami nang mabilis hangga't maaari sa mga kondisyon ng laboratoryo at upang mapanatili ang normal na mahahalagang aktibidad, ginagamit ang espesyal na nutrient media. Ang kanilang komposisyon at biophysical na kondisyon ay angkop para sa aktibong paglaki ng isang bacterial culture.
nutrient media. Microbiology at iba pang mga aplikasyon
Ang mga kolonya ng bakterya sa laboratoryo ay lumaki sa mga pagkaing Petri, na puno ng mala-jelly o semi-likido na nilalaman. Ang mga ito ay nutrient media, ang komposisyon at mga katangian nito ay mas malapit hangga't maaari sa mga natural para sa husay na paglago ng kultura.
Halimbawa, ang ganitong elective na kapaligiran ay angkop lamang para sa pagpaparami ng Escherichia coli. Pagkatapos, mula sa paghahasik ng maraming bakterya sa isang Petri dish, makikita lamang natin ang mga kolonya ng parehong Escherichia coli at wala na. Bago simulan ang trabaho, kinakailangan na magkaroon ng isang mahusay na kaalaman sa metabolismo ng pinag-aralan na bacterium upang matagumpay na mapili ito mula sa isang halo ng iba pang mga species.
Solid, semi-solid at likidong kulturang media
Ang bakterya ay maaaring lumaki hindi lamang sa mga solidong substrate. Ang nutrient media ay naiiba sa bawat isa sa mga tuntunin ng estado ng pagsasama-sama, na depende sa komposisyon sa panahon ng paggawa. Sa una, lahat sila ay may likido na pare-pareho, at kapag ang gelatin o agar ay idinagdag sa isang tiyak na porsyento, ang pinaghalong solidifies.
Ang liquid culture media ay karaniwang matatagpuan sa mga test tube. Kung kinakailangan na lumaki ang bakterya sa ilalim ng gayong mga kondisyon, magdagdag ng solusyon na may sample ng kultura at maghintay ng 2-3 araw. Maaaring iba ang resulta: lumilitaw ang isang precipitate, lumilitaw ang isang pelikula, lumutang ang maliliit na natuklap, o nabubuo ang maulap na solusyon.
Ang solid growth media ay kadalasang ginagamit sa microbiological research upang pag-aralan ang mga katangian ng bacterial colonies. Ang ganitong media ay palaging transparent o translucent, upang posible na matukoy nang tama ang kulay at hugis ng kultura ng mga microorganism.
Paghahanda ng media
Ang mga substrate tulad ng mga pinaghalong meat-peptone batay sa sabaw, gelatin o agar ay napakadaling ihanda. Kung kailangan mong gumawa ng solid o semi-liquid substrate, magdagdag ng 2-3% o 0.2-0.3% gelatin o agar, ayon sa pagkakabanggit, sa likido. Malaki ang papel nila sa pagpapatigas ng pinaghalong, ngunit hindi sila pinagmumulan ng mga sustansya. Kaya, ang nutrient media ay nakuha na angkop para sa paglago ng isang bacterial culture.