Ang buhay ng mga microorganism ay malapit na nakasalalay sa mga kondisyon kapaligiran. Ang lahat ng mga kadahilanan sa kapaligiran na nakakaapekto sa mga mikroorganismo ay maaaring nahahati sa tatlong grupo: pisikal, kemikal at biyolohikal, ang kapaki-pakinabang o mapanirang epekto nito ay depende sa likas na katangian ng salik mismo at sa mga katangian ng mikroorganismo.
Pisikal na mga kadahilanan
Sa mga pisikal na kadahilanan, ang temperatura, pagpapatuyo, nagliliwanag na enerhiya, at ultrasound ay may pinakamalaking impluwensya sa pag-unlad ng mga microorganism.
Temperatura. Ang mahahalagang aktibidad ng bawat mikroorganismo ay nililimitahan ng ilang partikular na limitasyon sa temperatura. Ang pag-asa sa temperatura na ito ay karaniwang ipinahayag ng tatlong pangunahing punto: pinakamababa - ang temperatura sa ibaba kung saan humihinto ang pagpaparami ng mga microbial cell; pinakamabuting kalagayan - ang pinakamahusay na temperatura para sa paglago at pag-unlad ng mga microorganism; maximum - ang temperatura sa itaas kung saan humihina o humihinto ang mahahalagang aktibidad ng mga selula. Ang pinakamainam na temperatura ay karaniwang tumutugma sa mga kondisyon ng temperatura ng natural na tirahan.
Ang lahat ng mga microorganism na may kaugnayan sa temperatura ay nahahati sa psychrophiles, mesophiles at thermophiles.
Ang mga psychrophile (mula sa Greek psychros - malamig, phileo - pag-ibig), o mga microorganism na mapagmahal sa malamig, ay lumalaki sa medyo mababang temperatura: ang pinakamababang temperatura ay 0 ° C, ang pinakamabuting kalagayan ay 10-20 ° C, ang maximum ay 30 ° C. Kasama sa pangkat na ito ang mga mikroorganismo, na naninirahan sa hilagang dagat at karagatan, lupa, dumi sa alkantarilya. Kasama rin dito ang luminous at iron bacteria, pati na rin ang mga mikrobyo na nagdudulot ng pagkasira ng pagkain sa lamig (sa ibaba 0 ° C).
Mesophiles (mula sa Greek mesos - gitna) - ang pinakamalawak na grupo, kabilang ang karamihan sa mga saprophytes at lahat ng pathogenic microorganisms. Ang pinakamabuting kalagayan na temperatura para sa kanila ay 28-37°C, ang pinakamababa ay 10°C, ang pinakamataas ay 45°C.
Thermophiles (mula sa Greek termos - init, init), o mga microorganism na mapagmahal sa init, ay bubuo sa mga temperatura na higit sa 55 ° C, ang minimum na temperatura para sa kanila ay 30 ° C, ang pinakamabuting kalagayan ay 50-60 ° C, at ang maximum ay 70 -75 ° C. Ang mga ito ay matatagpuan sa mainit na mga bukal ng mineral, ang ibabaw na layer ng lupa, self-heating substrates (dumi, dayami, butil), ang mga bituka ng mga tao at hayop. Mayroong maraming mga anyo ng spore sa mga thermophile.
Ang mataas at mababang temperatura ay may iba't ibang epekto sa mga mikroorganismo. Ang ilan ay mas sensitibo sa mataas na temperatura. Bukod dito, kung mas mataas ang temperatura na lampas sa maximum, mas mabilis ang pagkamatay ng mga microbial cell ay nangyayari, na dahil sa denaturation (coagulation) ng mga cell protein.
Ang mga vegetative form ng mesophilic bacteria ay namamatay sa temperatura na 60°C sa loob ng 30-60 minuto, at sa 80-100°C - pagkatapos ng 1-2 minuto. Ang mga bacterial spores ay mas lumalaban sa mataas na temperatura. Halimbawa, ang mga spore ng anthrax bacilli ay nakatiis na kumukulo sa loob ng 10-20 minuto, at ang mga spore ng Clostridium botulism - 6 na oras. presyon 1 atm (sa autoclave) sa loob ng 30 min.
Ang pagkilos ng mataas na temperatura sa mga microorganism ay ang batayan ng isterilisasyon - ang kumpletong pagpapalabas ng iba't ibang mga bagay mula sa mga microorganism at ang kanilang mga spores (tingnan sa ibaba).
Maraming mga microorganism ang lubos na lumalaban sa mababang temperatura. Ang salmonella typhoid at Vibrio cholerae ay nabubuhay nang mahabang panahon sa yelo. Ang ilang mga microorganism ay nananatiling mabubuhay sa mga likidong temperatura ng hangin (-190°C), habang ang mga bacterial spores ay maaaring makatiis sa mga temperatura hanggang -250°C.
Ilang uri lamang ng pathogenic bacteria ang sensitibo sa mababang temperatura (halimbawa, bordetella pertussis at parapertussis, Neisseria meningococcus, atbp.). Ang mga pag-aari na ito ng mga microorganism ay isinasaalang-alang sa mga diagnostic ng laboratoryo at sa panahon ng transportasyon ng materyal na pagsubok - ito ay inihatid sa laboratoryo na protektado mula sa paglamig.
Ang pagkilos ng mababang temperatura ay humihinto sa mga proseso ng putrefactive at fermentation, na malawakang ginagamit upang mapanatili ang pagkain sa mga refrigeration unit, cellar, at glacier. Sa mga temperatura sa ibaba 0 ° C, ang mga mikrobyo ay nahuhulog sa isang estado ng nasuspinde na animation - isang pagbagal sa mga proseso ng metabolic ay nangyayari at huminto ang pagpaparami. Gayunpaman, sa pagkakaroon ng naaangkop na mga kondisyon ng temperatura at isang nutrient medium, ang mga mahahalagang function ng microbial cell ay naibalik. Ang pag-aari na ito ng mga microorganism ay ginagamit sa laboratory practice upang mapanatili ang mga kultura ng microbes sa mababang temperatura. Ang isang mabilis na pagbabago sa mataas at mababang temperatura (nagyeyelo at lasaw) ay mayroon ding masamang epekto sa mga microorganism - ito ay humahantong sa pagkalagot ng mga lamad ng cell.
pagpapatuyo. Ang tubig ay mahalaga para sa normal na paggana ng mga microorganism. Ang pagpapatayo ay humahantong sa pag-aalis ng tubig ng cytoplasm, pagkagambala sa integridad cytoplasmic membrane, bilang isang resulta kung saan ang nutrisyon ng mga microbial cell ay nabalisa at ang kanilang kamatayan ay nangyayari.
Ang tiyempo ng pagkamatay ng iba't ibang uri ng mga mikroorganismo sa ilalim ng impluwensya ng pagpapatayo ay makabuluhang naiiba. Kaya, halimbawa, ang pathogenic na Neisseria (meningococci, gonococci), leptospira, maputlang treponema at iba pa ay namamatay kapag natuyo pagkatapos ng ilang minuto. Ang Vibrio cholerae ay nakatiis sa pagpapatuyo sa loob ng 2 araw, salmonella typhoid - 70 araw, at Mycobacterium tuberculosis - 90 araw. Ngunit ang pinatuyong plema ng mga pasyente ng tuberculosis, kung saan ang mga pathogen ay protektado ng isang tuyong kaluban ng protina, ay nananatiling nakakahawa sa loob ng 10 buwan.
Ang mga spores ay partikular na lumalaban sa pagpapatuyo, gayundin sa iba pang mga impluwensya sa kapaligiran. Ang mga spore ng anthrax bacilli ay nagpapanatili ng kakayahang tumubo sa loob ng 10 taon, at mga spore ng amag - hanggang 20 taon.
Ang masamang epekto ng pagpapatuyo sa mga mikroorganismo ay matagal nang ginagamit upang mapanatili ang mga gulay, prutas, karne, isda at mga halamang gamot. Kasabay nito, minsan sa mga kondisyon ng mataas na kahalumigmigan, ang mga naturang produkto ay mabilis na lumala dahil sa pagpapanumbalik ng mahahalagang aktibidad ng mga mikrobyo.
Para sa pag-iimbak ng mga kultura ng mga mikroorganismo, bakuna at iba pang biological na paghahanda, ang paraan ng freeze-drying ay malawakang ginagamit. Ang kakanyahan ng pamamaraan ay nakasalalay sa katotohanan na ang mga microorganism o paghahanda ay unang napapailalim sa pagyeyelo, at pagkatapos ay pinatuyo sila sa ilalim ng vacuum. Kasabay nito, ang mga microbial cell ay pumapasok sa isang estado ng suspendido na animation at pinapanatili ang kanilang mga biological na katangian sa loob ng ilang buwan o taon.
nagniningning na enerhiya. Sa kalikasan, ang mga microorganism ay patuloy na nakalantad sa solar radiation. Ang direktang liwanag ng araw ay nagiging sanhi ng pagkamatay ng maraming microorganism sa loob ng ilang oras, maliban sa photosynthetic bacteria (green at purple sulfur bacteria). Ang mapanirang epekto ng sikat ng araw ay dahil sa aktibidad ng ultraviolet rays (UV rays). Inactivate nila ang mga cell enzymes at sinisira ang DNA. Ang mga pathogen bacteria ay mas sensitibo sa UV rays kaysa saprophytes. Samakatuwid, mas mahusay na mag-imbak ng mga microbial culture sa laboratoryo sa dilim. Ang karanasan ni Buchner ay nagpapakita sa bagay na ito.
Sa isang Petri dish na may manipis na layer ng agar, ang isang saganang inoculation ng anumang bacterial culture ay isinasagawa. Sa panlabas na ibabaw ng seeded cup, ang mga titik na pinutol mula sa itim na papel ay nakadikit, na bumubuo, halimbawa, ang salitang "typhus". Ang tasa, na nakabaligtad, ay nakalantad sa direktang liwanag ng araw sa loob ng 1 oras. Pagkatapos ay aalisin ang mga papel, at ang tasa ay inilalagay para sa isang araw sa isang termostat sa 37 ° C. Ang paglaki ng bakterya ay sinusunod lamang sa mga lugar na iyon ng agar na ay protektado mula sa UV rays sa pamamagitan ng nakadikit na mga titik. Ang natitirang bahagi ng agar ay nananatiling malinaw, ibig sabihin, walang paglago ng mga microorganism (Larawan 11).
Ang kahalagahan ng sikat ng araw bilang isang natural na kadahilanan sa pagpapabuti ng panlabas na kapaligiran ay mahusay. Nagpapalaya ito ng hangin, tubig mula sa mga likas na reservoir, itaas na mga layer ng lupa mula sa mga pathogen bacteria.
Ang bactericidal (bacteria-destroying) action ng UV rays ay ginagamit upang isterilisado ang panloob na hangin (mga operating room, dressing room, mga kahon, atbp.), pati na rin ang tubig at gatas. Ang mga lamp ang pinagmumulan ng mga sinag na ito. ultraviolet radiation, mga ilawan ng germicidal.
Iba pang mga uri ng nagliliwanag na enerhiya - X-ray, α-, β-, γ-ray ay may masamang epekto sa mga microorganism lamang sa malalaking dosis, mga 440-280 J / kg. Ang pagkamatay ng mga mikrobyo ay dahil sa pagkasira ng mga istrukturang nuklear at cellular DNA. Ang mga maliliit na dosis ng radiation ay nagpapasigla sa paglaki ng mga microbial cell. Ang mga mikroorganismo ay higit na lumalaban sa radioactive radiation kaysa sa mas matataas na organismo. Mga kilalang thionic bacteria na naninirahan sa mga deposito ng uranium ores. Ang mga bakterya ay natagpuan sa tubig ng mga nuclear reactor sa isang konsentrasyon ng ionizing radiation na 20-30 kJ/kg.
Ang bactericidal effect ng ionizing radiation ay ginagamit upang mapanatili ang ilang partikular na produkto ng pagkain, isterilisado ang mga biological na paghahanda (sera, bakuna, atbp.), habang ang mga katangian ng materyal na isterilisado ay hindi nagbabago.
AT mga nakaraang taon ang paraan ng radiation ay isterilisado ang mga disposable na produkto - polystyrene pipettes, Petri dishes, wells para sa serological reactions, syringes, pati na rin ang suture material - catgut, atbp.
Ultrasound nagdudulot ng malaking pinsala sa mga microbial cell. Sa ilalim ng pagkilos ng ultrasound, ang mga gas sa likidong daluyan ng cytoplasm ay isinaaktibo, at ang mataas na presyon ay lumitaw sa loob ng cell (hanggang sa 10,000 atm). Ito ay humahantong sa isang pahinga pader ng cell at pagkamatay ng cell. Ang ultratunog ay ginagamit upang isterilisado ang pagkain (gatas, katas ng prutas), Inuming Tubig.
Mataas na presyon. Ang mga bakterya at lalo na ang kanilang mga spores ay lumalaban sa mekanikal na presyon. Sa kalikasan, may mga bakterya na naninirahan sa mga dagat at karagatan sa lalim na 1000-10000 m sa ilalim ng presyon mula 100 hanggang 900 atm. Ang ilang mga uri ng bakterya ay maaaring makatiis ng presyon hanggang sa 3000-5000 atm, at mga bacterial spores - kahit na 20,000 atm.
Mga Salik ng Kemikal
Impluwensya mga kemikal na sangkap sa mga microorganism ay naiiba depende sa likas na katangian ng compound ng kemikal, ang konsentrasyon nito, ang tagal ng pagkakalantad sa mga microbial cell. Depende sa konsentrasyon, ang isang kemikal na substansiya ay maaaring maging mapagkukunan ng nutrisyon o magkaroon ng isang mapagpahirap na epekto sa mahahalagang aktibidad ng mga microorganism. Halimbawa, ang 0.5-2% na solusyon ng glucose ay nagpapasigla sa paglaki ng mga mikrobyo, at ang 20-40% na mga solusyon sa glucose ay nakakaantala sa pagpaparami ng mga microbial cell.
Maraming mga kemikal na compound na may masamang epekto sa mga microorganism ay ginagamit sa medikal na kasanayan bilang mga disinfectant at antiseptics.
Ang mga kemikal na ginagamit para sa pagdidisimpekta ay tinatawag na mga disinfectant. Ang pagdidisimpekta ay nauunawaan bilang mga hakbang na naglalayong sirain ang mga pathogenic microorganism sa iba't ibang mga bagay sa kapaligiran. Kasama sa mga disinfectant ang mga halogen compound, phenol at mga derivatives nito, mga asing-gamot ng mabibigat na metal, ilang acid, alkalis, alkohol, atbp. Nagdudulot sila ng pagkamatay ng mga microbial cell, na kumikilos sa pinakamainam na konsentrasyon para sa isang tiyak na oras. Maraming mga disinfectant ang may nakakapinsalang epekto sa mga tisyu ng macroorganism.
Ang mga antiseptiko ay mga kemikal na sangkap na maaaring maging sanhi ng pagkamatay ng mga mikroorganismo o pagkaantala sa kanilang paglaki at pagpaparami. Ginagamit ang mga ito para sa mga therapeutic purpose (chemotherapy), pati na rin para sa pagdidisimpekta ng mga sugat, balat, at mauhog na lamad ng isang tao. Ang hydrogen peroxide, mga solusyon sa alkohol ng yodo, makikinang na berde, mga solusyon ng potassium permanganate, atbp., ay may mga katangiang antiseptiko. Ang ilang mga antiseptikong sangkap (acetic, sulfurous, benzoic acid, atbp.) sa mga dosis na hindi nakakapinsala sa mga tao ay ginagamit para sa pangangalaga ng pagkain.
Ayon sa mekanismo ng pagkilos, ang mga kemikal na may aktibidad na antimicrobial ay maaaring nahahati sa ilang grupo.
1. Ang mga surfactant (fatty acid, sabon at iba pang detergent) ay nagdudulot ng pagbaba ng tensyon sa ibabaw, na humahantong sa pagkagambala sa paggana ng cell wall at cytoplasmic membrane ng mga microorganism.
2. Ang Phenol, cresol at ang kanilang mga derivatives ay nagdudulot ng coagulation ng microbial proteins. Ginagamit ang mga ito para sa pagdidisimpekta ng mga nakakahawang materyal sa mga microbiological na kasanayan at mga nakakahawang sakit na ospital.
3. Ang mga ahente ng oxidizing, na nakikipag-ugnayan sa mga microbial na protina, ay nakakagambala sa aktibidad ng mga enzyme, nagiging sanhi ng denaturation ng protina. Ang mga aktibong ahente ng oxidizing ay chlorine, ozone, na ginagamit upang disimpektahin ang inuming tubig. Ang mga chlorine derivatives (chlorine, chloramine) ay malawakang ginagamit para sa mga layunin ng pagdidisimpekta. Ang mga katangian ng oxidizing ay hydrogen peroxide, potassium permanganate, yodo, atbp.
4. Ginagamit ang formaldehyde bilang 40% na solusyon (formalin) para sa pagdidisimpekta. Pinapatay nito ang mga vegetative at spore form ng microorganisms. Hinaharang ng Formalin ang mga amino group ng microbial cell proteins at nagiging sanhi ng kanilang denaturation.
5. Ang mga mabibigat na metal na asing-gamot (mercury, lead, zinc, ginto, atbp.) ay nag-coagulate ng mga microbial cell protein, na nagiging sanhi ng kanilang pagkamatay. Ang ilang mga metal (pilak, ginto, mercury, atbp.) ay may bactericidal effect sa mga microorganism sa hindi gaanong konsentrasyon. Ang ari-arian na ito ay tinatawag na oligodynamic action (mula sa Latin na oligos - maliit, dinamys - lakas). Napatunayan na ang tubig sa mga sisidlang pilak ay hindi nabubulok dahil sa bactericidal action ng mga silver ions. Para sa pag-iwas sa blennorrhea * ang mga bagong silang ay matagal nang ginagamit ang 1% na solusyon ng silver nitrate. Mga solusyon sa koloidal mga organikong compound ang pilak (protargol, collargol) ay ginagamit din bilang isang lokal na antiseptiko.
* (Ang Blennorrhea ay isang pamamaga ng conjunctiva ng mata na dulot ng gonococci.)
Ang mga paghahanda ng mercury ay may malakas na antimicrobial effect. Mula noong sinaunang panahon, ang mercury bichloride, o sublimate (sa isang dilution na 1:1000), ay ginagamit para sa pagdidisimpekta. Gayunpaman, mayroon itong nakakalason na epekto sa mga tisyu ng macroorganism at limitado ang paggamit nito.
6. Ang mga tina (makikinang na berde, rivanol, atbp.) ay may pag-aari na pumipigil sa paglaki ng bakterya. Ang mga solusyon ng isang bilang ng mga tina ay ginagamit bilang mga ahente ng antiseptiko, at ipinakilala din sa komposisyon ng ilang nutrient media upang pigilan ang paglaki ng nauugnay na microflora.
Ang mapanirang epekto ng isang bilang ng mga pisikal at kemikal na mga kadahilanan sa mga microorganism ay bumubuo ng batayan ng mga aseptiko at antiseptikong pamamaraan na malawakang ginagamit sa medikal at sanitary na kasanayan.
Ang asepsis ay isang sistema ng mga hakbang sa pag-iwas na pumipigil sa kontaminasyon ng microbial ng isang bagay (sugat, surgical field, kultura ng mga microorganism, atbp.), batay sa mga pisikal na pamamaraan.
Antiseptics - isang hanay ng mga hakbang na naglalayong sirain ang mga microorganism sa sugat, buong katawan o sa mga bagay sa kapaligiran, gamit ang iba't ibang mga disinfecting na kemikal.
Biological na mga kadahilanan
Sa ilalim ng mga kondisyon ng natural na tirahan, ang mga mikroorganismo ay hindi umiiral sa paghihiwalay, ngunit nasa mga kumplikadong relasyon, na nababawasan pangunahin sa symbiosis, metabiosis at antagonism.
Ang Symbiosis ay ang cohabitation ng mga organismo ng iba't ibang species, na nagdudulot sa kanila ng kapwa benepisyo. Sa parehong oras, magkasama sila ay mas mahusay kaysa sa bawat isa sa kanila nang hiwalay.
Umiiral ang mga symbiotic na relasyon sa pagitan ng nodule bacteria at leguminous na halaman, sa pagitan ng filamentous fungi at blue-green algae (lichens): Symbiosis ng lactic acid bacteria at alcohol yeast ay ginagamit upang maghanda ng ilang produktong lactic acid (kefir, koumiss).
Ang Metabiosis ay isang uri ng relasyon kung saan ang mga metabolic na produkto ng isang uri ng microorganism ay lumilikha ng mga kinakailangang kondisyon para sa pag-unlad ng iba. Halimbawa, ang mga putrefactive na mikroorganismo na nasisira mga protina, mag-ambag sa akumulasyon ng mga ammonium compound sa kapaligiran at lumikha ng mga kanais-nais na kondisyon para sa paglaki at pag-unlad ng nitrifying bacteria. At ang pag-unlad ng anaerobes sa well-aerated na lupa ay magiging imposible nang walang aerobes na sumisipsip ng libreng oxygen.
Ang mga metabiotic na relasyon ay laganap sa mga microorganism sa lupa at pinagbabatayan ang cycle ng mga substance sa kalikasan.
Ang antagonismo ay isang anyo ng ugnayan kung saan ang isang mikroorganismo ay pumipigil sa pag-unlad ng isa pa o maaaring maging sanhi ng kumpletong pagkamatay nito. Ang mga magkasalungat na relasyon ay nabuo sa mga microorganism sa pakikibaka para sa pagkakaroon. Saanman sila nakatira, mayroong patuloy na pakikibaka sa pagitan nila para sa mga mapagkukunan ng pagkain, oxygen sa hangin, at tirahan. Kaya, ang karamihan sa mga pathogenic na bakterya, na nakapasok sa panlabas na kapaligiran (lupa, tubig) na may mga pagtatago ng mga pasyente, ay hindi makatiis ng pangmatagalang kumpetisyon sa maraming saprophytes at mamatay nang medyo mabilis.
Ang antagonism ay maaaring dahil sa direktang pagkilos ng mga microorganism sa isa't isa o sa pagkilos ng kanilang mga produktong metabolic. Halimbawa, nilalamon ng protozoa ang bakterya, habang ang mga phage ay naglilinis sa kanila. Ang mga bituka ng mga bagong silang ay pinaninirahan ng lactic acid bacteria na Bifidobacterium bifidum. Sa pamamagitan ng pagtatago ng lactic acid, pinipigilan nila ang paglaki ng putrefactive bacteria at sa gayon ay pinoprotektahan ang marupok na organismo ng mga sanggol mula sa mga sakit sa bituka. Ang ilang mga mikroorganismo sa proseso ng buhay ay gumagawa ng iba't ibang mga sangkap na may masamang epekto sa bakterya at iba pang mga mikrobyo. Kasama sa mga sangkap na ito ang mga antibiotic (tingnan ang "Antibiotics").
mga tanong sa pagsusulit
1. Anong mga pisikal na salik ang nakakaapekto sa mahahalagang aktibidad ng mga mikroorganismo?
2. Anong mga sangkap ang nauuri bilang mga disinfectant at paano sila nagkakaiba sa mekanismo ng pagkilos sa mga mikroorganismo?
3. Ilista ang mga ugnayang umiiral sa pagitan ng mga mikroorganismo?
Isterilisasyon
Ang sterilization ay despawning, ibig sabihin, ang kumpletong paglabas ng mga bagay sa kapaligiran mula sa mga microorganism at kanilang mga spores.
Isinasagawa ang sterilization sa iba't ibang paraan:
1) pisikal (pagkalantad sa mataas na temperatura, UV rays, paggamit ng mga bacterial filter);
2) kemikal (paggamit ng iba't ibang disinfectant, antiseptics);
3) biological (paggamit ng antibiotics).
Sa pagsasanay sa laboratoryo, karaniwang ginagamit ang mga pisikal na pamamaraan ng isterilisasyon.
Ang posibilidad at kapakinabangan ng paggamit ng isa o ibang paraan ng isterilisasyon ay dahil sa mga katangian ng materyal na isterilisado, ang pisikal at kemikal na mga katangian nito.
Mga pisikal na pamamaraan
Ang pag-aapoy sa apoy ng isang burner o nagniningas ay isang paraan ng isterilisasyon kung saan ang bagay ay ganap na nabubulok, dahil ang parehong mga vegetative cell at spores ng mga microorganism ay namamatay. Karaniwan ang mga calcined bacteriological loop, spatula, pipette, glass slide at coverslip, maliliit na instrumento. Ang mga gunting at scalpel ay hindi dapat isterilisado sa pamamagitan ng calcination, dahil ang ibabaw ng pagputol ay nagiging mapurol sa ilalim ng pagkilos ng apoy.
Dry heat sterilization
Isinasagawa ang isterilisasyon sa pamamagitan ng tuyo na init o mainit na hangin sa mga Pasteur oven (mga drying oven). Ang Pasteur oven ay isang double-walled cabinet na gawa sa mga materyales na lumalaban sa init - metal at asbestos. Painitin ang cabinet gamit ang mga gas burner o electric heater. Ang mga cabinet na may electric heating ay nilagyan ng mga regulator na nagbibigay ng kinakailangang temperatura. Upang makontrol ang temperatura, mayroong isang thermometer na ipinasok sa butas sa tuktok na dingding ng kabinet.
Ang tuyo na init ay pangunahing nag-isterilize ng mga kagamitang babasagin sa laboratoryo. Ang mga pagkaing inihanda para sa isterilisasyon ay maluwag na inilalagay sa oven upang matiyak ang pare-pareho at maaasahang pag-init ng materyal na isterilisado. Ang pinto ng kabinet ay mahigpit na sarado, ang pampainit ay naka-on, ang temperatura ay dinadala sa 160-165 ° C at isterilisado sa temperatura na ito sa loob ng 1 oras. Sa pagtatapos ng isterilisasyon, ang pagpainit ay naka-off, ngunit ang pinto ng kabinet ay hindi binuksan hanggang ang oven ay lumamig; Kung hindi, ang malamig na hangin na pumapasok sa loob ng cabinet ay maaaring magdulot ng mga bitak sa maiinit na pinggan.
Ang isterilisasyon sa Pasteur oven ay maaaring isagawa sa iba't ibang temperatura at pagkakalantad (oras ng isterilisasyon) (Talahanayan 1).
Ang mga likido (nutrient media, isotonic sodium chloride solution, atbp.), mga bagay na gawa sa goma at mga sintetikong materyales ay hindi maaaring isterilisado ng tuyo na init, dahil ang mga likido ay kumukulo at bumubuhos, at ang goma at sintetikong mga materyales ay natutunaw.
Upang makontrol ang isterilisasyon sa Pasteur oven, ang mga sutla na sinulid ay binasa sa isang kultura ng spore-forming bacteria, pinatuyo, inilagay sa isang sterile Petri dish at inilagay sa Pasteur oven. Isinasagawa ang sterilization sa temperatura na 165 ° C sa loob ng 1 oras (para sa kontrol, ang ilan sa mga thread ay naiwan sa temperatura ng kuwarto). Pagkatapos ang isterilisado at kontrol na mga sinulid ay inilalagay sa ibabaw ng agar sa isang Petri dish o inilagay sa mga test tube na may sabaw at inilublob sa isang thermostat sa temperatura na 37°C sa loob ng 2 araw. Sa wastong operasyon ng Pasteur oven, sa mga test tube o tasa na may nutrient media kung saan inilagay ang mga isterilisadong sinulid, hindi magkakaroon ng paglaki, dahil ang bacterial spores ay mamamatay, habang ang bacterial spores sa mga sinulid na hindi pa isterilisado (kontrol) ay mamamatay din. tumubo sa nutrient media paglago ay mapapansin.
Upang matukoy ang temperatura sa loob ng Pasteur oven, maaari mong gamitin ang sucrose o nakakain na granulated na asukal, caramelized sa temperatura na 165-170 ° C.
Paghahanda ng mga babasagin sa laboratoryo para sa isterilisasyon sa Pasteur oven. Bago ang isterilisasyon, ang mga kagamitang babasagin sa laboratoryo (Petri dish, graduated at Pasteur pipettes, vials, flasks, test tubes) ay dapat na lubusan na hugasan, tuyo at balutin sa papel, kung hindi, pagkatapos ng isterilisasyon, maaari itong muli na mahawahan ng air bacteria.
Ang mga petri dish ay nakabalot sa papel ng isa o higit pang piraso o inilagay sa mga espesyal na kaso ng metal.
Ang mga cotton swab ay ipinapasok sa itaas na dulo ng mga pipette upang maiwasan ang pagpasok ng materyal sa pagsubok sa bibig. Ang mga natapos na pipette ay nakabalot sa mahabang piraso ng papel na 4-5 cm ang lapad. Ang dami ng nakabalot na pipette ay nakatala sa papel. Sa mga kaso, ang mga nagtapos na pipette ay isterilisado nang walang karagdagang pambalot ng papel.
Tandaan. Kung ang graduation sa mga pipette ay hindi gaanong nakikita, ito ay naibalik bago isterilisasyon. Ang pintura ng langis ay inilalapat sa pipette at, hindi pinapayagan ang pintura na matuyo, ang barium sulfate powder ay ipinahid dito ng isang tela. Pagkatapos nito, ang labis na pintura ay tinanggal gamit ang isang basahan, na nananatili lamang sa mga bingaw ng pagtatapos. Ang mga pipette na ginagamot sa ganitong paraan ay dapat banlawan.
Ang matalim na dulo ng Pasteur pipette ay tinatakan sa apoy ng burner at nakabalot sa papel, 3-5 piraso bawat isa. Maingat na balutin ang mga pipette ng Pasteur upang hindi masira ang mga selyadong dulo ng mga capillary.
Ang mga vial, flasks, test tube ay sarado gamit ang cotton-gauze stoppers. Ang cork ay dapat magkasya sa leeg ng sisidlan para sa 2/3 ng haba nito, hindi masyadong masikip, ngunit hindi masyadong maluwag. Ang isang takip ng papel ay inilalagay sa ibabaw ng mga tapon para sa bawat sisidlan (maliban sa mga test tube). Ang mga test tube ay itinali sa 5-50 piraso at balot ng papel.
Tandaan. Sa mataas na temperatura, ang papel kung saan nakabalot ang mga tasa at pipette, at cotton wool, ay nagiging dilaw at maaaring maging char, kaya ang bawat bagong grado ng papel na nakuha ng laboratoryo ay dapat na masuri sa tinatanggap na rehimen ng temperatura.
mga tanong sa pagsusulit
1. Ano ang ibig sabihin ng salitang isterilisasyon?
2. Ano ang mga paraan ng isterilisasyon?
3. Ano ang isterilisado sa pamamagitan ng pag-ihaw sa apoy?
4. Ilarawan ang aparato at mode ng pagpapatakbo ng Pasteur oven.
5. Ano ang isterilisado sa Pasteur oven?
6. Paano inihahanda ang mga babasagin para sa isterilisasyon?
7. Bakit imposibleng isterilisado ang culture media at mga bagay na goma sa Pasteur oven?
Mag-ehersisyo
Maghanda ng mga Petri dish, graduated pipettes, Pasteur pipettes, test tubes, flasks at vial para sa isterilisasyon.
Isterilisasyon sa pamamagitan ng pagpapakulo
Ang pagpapakulo ay isang paraan ng isterilisasyon na ginagarantiyahan ang isterilisasyon sa kondisyon na walang mga spores sa isterilisadong materyal. Ginagamit ang mga ito para sa pagproseso ng mga syringe ng mga instrumento, mga kagamitan sa salamin at metal, mga tubo ng goma, atbp.
Ang pagpapakulo ng isterilisasyon ay karaniwang isinasagawa sa isang sterilizer - isang hugis-parihaba na kahon ng metal na may masikip na takip. Ang materyal na dapat isterilisado ay inilalagay sa mesh sa sterilizer at puno ng tubig. Upang mapataas ang kumukulo at maalis ang katigasan ng tubig, magdagdag ng 1-2% sodium bikarbonate (mas mainam na gumamit ng distilled water). Ang sterilizer ay sarado na may takip at nagpainit. Ang simula ng isterilisasyon ay itinuturing na sandali ng tubig na kumukulo, ang oras ng pagkulo ay 15-30 minuto. Sa pagtatapos ng isterilisasyon, ang mesh na may mga tool ay tinanggal ng mga hawakan sa gilid na may mga espesyal na kawit, at ang mga tool sa loob nito ay kinuha gamit ang mga sterile tweezers o forceps, na pinakuluan kasama ang natitirang mga tool.
Isinasagawa ang steam sterilization sa dalawang paraan: 1) steam under pressure; 2) dumadaloy na singaw.
Sterilisasyon ng presyon ng singaw ginawa sa isang autoclave. Ang pamamaraang ito ng isterilisasyon ay batay sa epekto ng puspos na singaw ng tubig sa mga isterilisadong materyales sa presyon na mas mataas sa atmospera. Bilang resulta ng naturang isterilisasyon, ang parehong mga vegetative at spore form ng mga microorganism ay namamatay sa iisang paggamot.
Autoclave (Larawan 12) - isang napakalaking boiler, na natatakpan ng isang metal na pambalot sa labas, hermetically selyadong may takip, na kung saan ay mahigpit na screwed sa boiler na may hinged bolts. Ang isa pa, mas maliit na diameter, na tinatawag na sterilization chamber, ay ipinasok sa panlabas na boiler. Ang mga bagay na dapat isterilisado ay inilalagay sa silid na ito. Sa pagitan ng parehong mga boiler ay may isang libreng puwang na tinatawag na silid ng tubig-singaw. Ang tubig ay ibinubuhos sa silid na ito sa pamamagitan ng isang funnel na naayos sa labas sa isang tiyak na antas, na minarkahan sa isang espesyal na tubo ng pagsukat ng tubig. Kapag ang tubig ay pinakuluan sa isang silid ng singaw, ang singaw ay ginawa. Ang sterilization chamber ay nilagyan ng outlet cock na may safety valve para makatakas ang singaw kapag tumaas ang presyon sa itaas ng kinakailangang antas. Ang isang manometer ay ginagamit upang matukoy ang presyon na nilikha sa silid ng isterilisasyon.
kanin. 12. Scheme ng autoclave. M - panukat ng presyon; PC - balbula ng kaligtasan; B - funnel para sa tubig; K 2 - tapikin para sa pagpapalabas ng tubig; K 3 - tapikin para sa paglabas ng singaw
Ang normal na atmospheric pressure (760 mm Hg) ay kinukuha bilang zero. Mayroong tiyak na kaugnayan sa pagitan ng mga pagbabasa ng pressure gauge at temperatura (Talahanayan 2).
Ang mga autoclave na may awtomatikong kontrol sa mode ay kasalukuyang magagamit. Bilang karagdagan sa karaniwang pressure gauge, nilagyan ang mga ito ng electrocontact pressure gauge, na pumipigil sa pagtaas ng presyon sa itaas. itakda ang halaga at sa gayon ay tinitiyak ang pare-pareho ng nais na temperatura sa autoclave.
Ang iba't ibang nutrient media (maliban sa mga naglalaman ng mga katutubong protina), mga likido (isotonic sodium chloride solution, tubig, atbp.) ay isterilisado na may singaw sa ilalim ng presyon; appliances, lalo na ang mga may bahaging goma.
Ang temperatura at tagal ng autoclaving ng nutrient media ay tinutukoy ng kanilang komposisyon, na tinukoy sa recipe para sa paghahanda ng nutrient medium. Halimbawa, ang simpleng media (meat-peptone agar, meat-peptone broth) ay isterilisado sa loob ng 20 minuto sa 120 ° C (1 atm). Gayunpaman, sa temperatura na ito imposibleng isterilisado ang media na naglalaman ng mga katutubong protina, carbohydrates at iba pang mga sangkap na madaling mabago sa pamamagitan ng pag-init. Ang media na may carbohydrates ay ini-sterilize sa fractionally sa 100°C o sa isang autoclave sa 112°C (0.5 atm) sa loob ng 10-15 minuto. Ang iba't ibang mga likido, mga aparato na may mga hose ng goma, mga plug, mga kandila ng bakterya at mga filter ay isterilisado sa loob ng 20 minuto sa 120 ° C (1 atm).
Pansin! Sa mga autoclave, ang mga nahawaang materyal ay na-neutralize din. Ang mga tasa at test tube na naglalaman ng mga kultura ng mga microorganism ay inilalagay sa mga espesyal na metal na balde o mga tangke na may mga butas sa takip para sa pagpasok ng singaw at isterilisado sa isang autoclave sa 126 ° C (1.5 atm) sa loob ng 1 oras. Ang mga instrumento ay isterilisado sa parehong paraan pagkatapos magtrabaho may bacteria na nagdudulot ng kontrobersya.
Tanging ang mga espesyal na sinanay na tao lamang ang pinapayagang magtrabaho kasama ang autoclave, na dapat mahigpit at tumpak na sundin ang mga panuntunang tinukoy sa mga tagubilin na nakalakip sa aparato.
Autoclaving technique. 1. Bago magtrabaho, suriin ang kakayahang magamit ng lahat ng bahagi at ang pagla-lap ng mga gripo.
2. Sa pamamagitan ng funnel na nakalagay sa labas ng boiler, ang tubig (distilled or boiled) ay ibinubuhos hanggang sa itaas na marka ng water gauge glass upang hindi mabuo ang sukat. Ang gripo sa ilalim ng funnel ay sarado.
3. Ang materyal na isterilisado ay inilalagay sa isang espesyal na mata sa silid ng isterilisasyon. Ang mga bagay ay hindi dapat i-load ng masyadong mahigpit, dahil ang singaw ay dapat na malayang dumaan sa pagitan ng mga ito, kung hindi, hindi sila mag-iinit sa tamang temperatura at maaaring manatiling hindi sterile.
4. Ang gasket ng goma sa takip ay pinahiran ng chalk para sa mas mahusay na sealing.
5. Ang talukap ng mata ay sarado at naka-bolted sa katawan ng autoclave, at ang mga bolts ay pinaikot sa mga pares na crosswise.
6. Buong buksan ang exhaust cock na kumukonekta sa sterilization chamber sa hangin sa labas, at simulan ang pag-init ng autoclave. Ang autoclave ay karaniwang pinainit ng gas o kuryente.
Kapag ang autoclave ay pinainit, ang tubig ay kumukulo, ang nagresultang singaw ay tumataas sa pagitan ng mga dingding ng mga boiler at sa pamamagitan ng mga espesyal na butas sa dingding ng panloob na boiler (tingnan ang Fig. 12), pumapasok sa silid ng isterilisasyon at lumabas sa pamamagitan ng bukas na outlet cock. Una, ang singaw ay tumakas kasama ng hangin na nasa autoclave. Mahalaga na ang lahat ng hangin ay ilalabas mula sa autoclave, kung hindi, ang pagbabasa ng pressure gauge ay hindi tumutugma sa temperatura sa autoclave.
Ang hitsura ng isang tuluy-tuloy na malakas na jet ng singaw ay nagpapahiwatig ng kumpletong pag-alis ng hangin mula sa autoclave; pagkatapos nito, ang outlet cock ay sarado at ang presyon sa loob ng autoclave ay nagsisimulang tumaas nang paunti-unti.
7. Ang simula ng isterilisasyon ay isinasaalang-alang ang sandali kapag ang mga pagbabasa ng pressure gauge ay umabot sa tinukoy na halaga. Ang pag-init ay kinokontrol upang ang presyon sa autoclave ay hindi nagbabago para sa isang tiyak na oras.
8. Matapos ang oras ng isterilisasyon ay lumipas, ang pag-init ng autoclave ay tumigil, ang singaw ay inilabas sa pamamagitan ng outlet cock. Kapag bumaba sa zero ang pressure gauge needle, buksan ang takip. Upang maiwasan ang mga paso mula sa singaw na natitira sa autoclave, buksan ang takip patungo sa iyo.
Ang antas ng temperatura sa autoclave, i.e. ang kawastuhan ng pressure gauge, ay maaaring suriin. Para dito, ginagamit ang iba't ibang mga sangkap na may isang tiyak na punto ng pagkatunaw: antipyrine (113 ° C), resorcinol at sulfur (119 ° C), benzoic acid (120 ° C). Ang isa sa mga sangkap na ito ay halo-halong may hindi gaanong halaga ng tina (magenta o methylene blue) at ibinuhos sa isang glass tube, na tinatakan at inilagay sa isang patayong posisyon sa pagitan ng materyal na isterilisado. Kung sapat ang temperatura, matutunaw ang sangkap at magiging kulay ng kaukulang pangkulay.
Upang suriin ang pagiging epektibo ng isterilisasyon, isang test tube na may kilalang spore culture ay inilalagay sa autoclave. Pagkatapos ng autoclaving, ang tubo ay inilipat sa isang termostat sa loob ng 24-48 na oras, ang kawalan o pagkakaroon ng paglago ay nabanggit. Ang kawalan ng paglago ay nagpapahiwatig ng tamang operasyon ng aparato.
Sterilisasyon ng singaw ginawa sa Koch apparatus. Ang pamamaraang ito ay ginagamit sa mga kaso kung saan ang bagay na isterilisado ay nagbabago sa temperatura na higit sa 100 ° C. Ang fluid na singaw ay nag-isterilize ng nutrient media na naglalaman ng urea, carbohydrates, gatas, patatas, gelatin, atbp.
Ang Koch apparatus (boiler) ay isang metal na silindro na nakatakip sa labas (upang mabawasan ang paglipat ng init) na may felt o asbestos. Ang silindro ay sarado na may isang korteng kono na takip na may butas para makatakas ang singaw. Sa loob ng silindro mayroong isang stand, hanggang sa antas kung saan ibinuhos ang tubig. Ang isang balde na may butas ay inilalagay sa stand, kung saan inilalagay ang materyal na isterilisado. Ang Koch apparatus ay pinainit ng gas o kuryente. Ang oras ng isterilisasyon ay binibilang mula sa sandali ng malakas na paglabas ng singaw sa mga gilid ng takip at mula sa labasan ng singaw. I-sterilize sa loob ng 30-60 minuto. Sa pagtatapos ng isterilisasyon, ang pag-init ay tumigil. Ang balde na may materyal ay tinanggal mula sa aparato at iniwan sa temperatura ng silid hanggang sa susunod na araw. Ang pag-init ay isinasagawa sa loob ng 3 araw nang sunud-sunod sa temperatura na 100 ° C sa loob ng 30-60 minuto. Ang pamamaraang ito ay tinatawag na fractional sterilization. Sa unang pag-init, ang mga vegetative form ng microbes ay namamatay, habang ang mga spore ay nananatili. Sa araw, ang mga spores ay may oras upang tumubo at maging mga vegetative form na namamatay sa ikalawang araw ng isterilisasyon. Dahil posible na ang ilan sa mga spores ay walang oras upang tumubo, ang materyal ay pinananatili para sa isa pang 24 na oras, at pagkatapos ay isinasagawa ang isang ikatlong isterilisasyon. Ang sterilization na may tuluy-tuloy na singaw sa Koch apparatus ay hindi nangangailangan ng espesyal na kontrol, dahil ang sterility ng inihandang nutrient media ay nagsisilbing indicator ng tamang operasyon ng device. Ang steam sterilization ay maaari ding gawin sa isang autoclave na nakabukas ang takip at nakabukas ang outlet cock.
mga tanong sa pagsusulit
1. Anong media ng kultura ang maaaring isterilisado ng singaw?
2. Ano ang isang sterilizer at paano ito gumagana?
3. Bakit dapat gamitin ang distilled water para sa pagpapakulo ng isterilisasyon?
4. Ilarawan ang aparato at mode ng pagpapatakbo ng autoclave.
5. Ano ang isterilisado sa isang autoclave?
6. Ano ang kumokontrol sa tamang isterilisasyon sa autoclaving?
7. Ano ang steam sterilization?
8. Ilarawan ang aparato ng Koch apparatus.
9. Ano ang layunin ng fractional sterilization?
Mag-ehersisyo
Punan ang form.
Ang fractional sterilization ay maaari ding isagawa sa isang Koch coiler.
Ang Koch Coagulator ay ginagamit upang i-coagulate ang whey at egg nutrient media, at kasabay ng compaction ng medium, ito ay isterilisado.
Koch coiler ay isang flat metal box na may double walls, na natatakpan sa labas ng heat-insulating material. Ang tubig ay ibinubuhos sa puwang sa pagitan ng mga dingding sa pamamagitan ng isang espesyal na butas na matatagpuan sa itaas na bahagi ng panlabas na dingding. Ang butas ay sarado gamit ang isang takip kung saan ipinasok ang isang thermometer. Isara ang device gamit ang dalawang takip: salamin at metal. Sa pamamagitan ng takip ng salamin, maaari mong obserbahan ang proseso ng clotting. Ang mga test tube na may media ay inilalagay sa ilalim ng coiler sa isang hilig na posisyon.
Ang pag-init ng coiler ay isinasagawa gamit ang gas o kuryente. Ang media ay isterilisado nang isang beses sa temperatura na 90 ° C sa loob ng 1 oras o fractionally - 3 araw na sunud-sunod sa 80 ° C sa loob ng 1 oras.
Tyndallization* - fractional sterilization sa mababang temperatura - ginagamit para sa mga sangkap na madaling masira at ma-denatured sa temperatura na 60 ° C (halimbawa, mga likidong protina). Ang materyal na isterilisado ay pinainit sa isang paliguan ng tubig o sa loob mga espesyal na aparato na may mga thermostat sa temperatura na 56-58 ° C para sa isang oras para sa 5 araw nang sunud-sunod.
* (Ang paraan ng isterilisasyon ay ipinangalan kay Tyndall, na nagmungkahi nito.)
Pasteurisasyon- isterilisasyon sa 65-70 ° C para sa 1 oras, iminungkahi ni Pasteur para sa pagkasira ng mga non-spore form ng microbes. I-pasteurize ang gatas, alak, beer, fruit juice at iba pang produkto. Ang gatas ay pasteurized upang maalis ang lactic acid at pathogenic bacteria (Brucella, Mycobacterium tuberculosis, Shigella, Salmonella, Staphylococcus, atbp.). Ang pasteurization ng beer, fruit juice, wine ay pumapatay ng mga microorganism na nagdudulot ng iba't ibang uri ng fermentation. Ang mga pasteurized na pagkain ay pinakamahusay na pinananatiling palamigan.
mga tanong sa pagsusulit
1. Ano ang layunin at aparato ng Koch coiler?
2. Ano ang mga paraan ng isterilisasyon sa coiler?
3. Ano ang tyndalization?
4. Ano ang pasteurization?
Sterilization sa pamamagitan ng ultraviolet irradiation
Ang sterilization na may UV rays ay isinasagawa gamit ang mga espesyal na pag-install - bactericidal lamp. Ang mga sinag ng UV ay may mataas na aktibidad na antimicrobial at maaaring maging sanhi ng pagkamatay ng hindi lamang mga vegetative na selula, kundi pati na rin ang mga spores. Ginagamit ang UV irradiation upang isterilisado ang hangin sa mga ospital, operating room, institusyon ng mga bata, atbp. Sa isang microbiological laboratory, ang isang kahon ay ginagamot ng UV rays bago magtrabaho.
mga tanong sa pagsusulit
1. Ano ang mga katangian ng ultraviolet rays?
2. Sa anong mga kaso ginagamit ang isterilisasyon sa pamamagitan ng ultraviolet radiation?
Mechanical sterilization na may bacterial filter
Ang filtration sterilization ay ginagamit sa mga kaso kung saan ang mga bagay na isterilisado ay nagbabago kapag pinainit. Isinasagawa ang pagsasala gamit ang mga bacterial filter na gawa sa iba't ibang mga pinong buhaghag na materyales. Ang mga butas ng mga filter ay dapat sapat na maliit (hanggang sa 1 µm) upang magbigay ng mekanikal na pagpapanatili ng bakterya, kaya itinuturing ng ilang mga may-akda ang pagsasala bilang isang mekanikal na paraan ng isterilisasyon.
Ang paraan ng pagsasala ay nag-isterilize ng nutrient media na naglalaman ng protina, serum, ilang antibiotics, at naghihiwalay din ng bacteria mula sa mga virus, phage at exotoxin.
Sa microbiological practice, ang Seitz asbestos filters, membrane filters at Chamberlan at Berkefeld filters (candles) ay ginagamit.
Ang mga filter ng Seitz ay mga disc na ginawa mula sa pinaghalong asbestos at cellulose. Ang kanilang kapal ay 3-5 mm, diameter ay 35-140 mm. Ang domestic na industriya ay gumagawa ng mga filter ng dalawang grado: "F" (pag-filter) - pinapanatili ang mga nasuspinde na particle, ngunit dumadaan sa bakterya; "SF" (sterilizing) - na may mas maliliit na pores, nananatili ang bacteria, ngunit nagpapasa ng mga virus. Ang mga gusot na plato ng asbestos, pati na rin ang mga plato na may mga basag at bitak, ay hindi angkop para sa trabaho.
Ang mga filter ng lamad ay ginawa mula sa nitrocellulose. Ang mga ito ay mga puting disc na 0.1 mm ang kapal at 35 mm ang lapad. Depende sa laki ng butas, ang mga ito ay itinalagang bilang 1, 2, 3, 4, at 5 (Talahanayan 3).
Ang Filter No. 1 ay pinakaangkop para sa isterilisasyon. Bilang karagdagan sa mga nakalista, gumagawa din sila ng tinatawag na pre-filter, na idinisenyo upang palayain ang na-filter na likido mula sa malalaking particle na nilalaman nito.
Ang mga filter ng Chamberlant at Berkefeld (mga kandila) ay mga guwang na silindro na sarado sa isang dulo. Ang mga kandila ng chamberlain ay gawa sa kaolin na may halong buhangin at kuwarts. Ang mga ito ay na-standardize ayon sa laki ng butas ng butas at tinutukoy ang L 1 , L 2 , L 3 ... L 13 . Ang mga filter ng Berkefeld (mga kandila) ay inihanda mula sa infusor earth, ang mga ito ay itinalagang V, N, W sa laki ng mga pores, na tumutugma sa diameter ng pore na 3-4, 4-7, 8-12 microns.
Ang pagtatrabaho sa mga filter ng bakterya ay isinasagawa bilang mga sumusunod. Ang filter ay dapat na maayos sa isang espesyal na may hawak, na ipinasok sa filter receiver. Ang tatanggap ay karaniwang isang prasko ng Bunsen. Ang mga may hawak, sa karamihan ng mga kaso na gawa sa hindi kinakalawang na asero, ay binubuo ng dalawang bahagi: ang itaas, na hugis ng isang silindro na walang ilalim, at ang mas mababang, isang sumusuportang bahagi, na nagtatapos sa isang tubo. Ang mga filter ng Seitz, na ang magaspang na ibabaw ay nakataas, ay inilalagay sa metal na grid at naka-screwed nang mahigpit sa pagitan ng tuktok at ibaba ng lalagyan. Ang naka-mount na filter ay naayos sa isang rubber stopper na ipinasok sa leeg ng Bunsen flask. Ang isang cotton swab ay ipinasok sa outlet tube ng flask, na konektado sa isang vacuum pump. Ang handa na pag-install ay nakabalot sa papel at isterilisado sa isang autoclave sa isang presyon ng 1 atm para sa 20-30 minuto. Ang buong device sa assembled form ay tinatawag ding Seitz filter (Fig. 13).
Kaagad bago ang pagsasala, ang dulo ng labasan ng prasko ng Bunsen ay ikinonekta ng isang goma na tubo sa isang oil o water jet pump. Ang mga joints ng iba't ibang bahagi ay puno ng paraffin upang lumikha ng higpit. Ang likidong sasalain ay ibubuhos sa silindro ng apparatus at ang bomba ay nakabukas upang lumikha ng vacuum sa receiver. Bilang resulta ng nagresultang pagkakaiba sa presyon, ang na-filter na likido ay dumadaan sa mga pores ng filter papunta sa receiver, at ang mga mikrobyo ay nananatili sa ibabaw ng filter.
Ang mga filter ng lamad ay isterilisado sa pamamagitan ng pagpapakulo sa distilled water bago gamitin. Upang maiwasan ang pag-twist ng mga filter, inilalagay muna sila sa distilled water, pinainit sa temperatura na 50-60 ° C, at pinakuluan sa mababang init sa loob ng 30 minuto, binabago ang tubig ng 2-3 beses. Ang may hawak ng filter at receiver ay isterilisado nang maaga, ang aparato ay naka-mount sa ilalim ng mga kondisyon ng aseptiko. Upang hindi mapunit ang filter ng lamad sa metal mesh, ang mga bilog ng sterile filter na papel ay inilalagay sa ilalim nito. Pagkatapos, gamit ang mga sterile tweezer na may makinis na mga tip, kunin ang membrane filter mula sa sterilizer at ilagay ito sa grid ng suporta na may makintab na ibabaw pababa.
Ang mga kandila (Chamberlant) na isterilisado sa isang autoclave ay konektado sa pamamagitan ng isang goma na tubo sa isang receiver at ibinababa sa isang sisidlan (karaniwang isang silindro) na may isang sinala na likido. Nagaganap ang pagsasala gamit ang isang vacuum pump. Ang isang sterile filtrate ay pumapasok sa receiver, at ang bakterya ay pinananatili ng mga pores ng kandila.
Ang mga filter ng lamad at asbestos ay idinisenyo para sa solong paggamit. Ang mga kandila pagkatapos gamitin ay pinakuluan sa tubig mula sa gripo, pagkatapos ay i-calcine sa isang muffle furnace.
Bago ang kasunod na paggamit, ang mga kandila ay sinusuri para sa integridad. Ang kandila ay ibinababa sa isang sisidlan na may tubig at ang hangin ay dinadaanan. Kung lumilitaw ang mga bula ng hangin sa ibabaw ng kandila, kung gayon ang mga bitak ay nabuo sa kandila at hindi ito magagamit.
mga tanong sa pagsusulit
1. Ano ang paraan ng isterilisasyon ng filter? Ano ang isterilisado sa pamamaraang ito?
2. Anong bacterial filter ang alam mo? Paano naka-mount ang filtering device, anong mga kondisyon ang dapat sundin?
Mga pamamaraan ng kemikal
Ang ganitong uri ng sterilization ay ginagamit sa isang limitadong lawak, at ito ay pangunahing nagsisilbi upang maiwasan ang bacterial contamination ng nutrient media at immunobiological na paghahanda (mga bakuna at sera).
Ang mga sangkap tulad ng chloroform, toluene, at eter ay kadalasang idinaragdag sa nutrient media. Kung kinakailangan upang palayain ang daluyan mula sa mga preservative na ito, ito ay pinainit sa isang paliguan ng tubig sa 56 ° C (ang mga preservative ay sumingaw).
Para sa pag-iingat ng mga bakuna, ginagamit ang sera, mertiolate, boric acid, formalin, atbp.
biological isterilisasyon
Ang biological sterilization ay batay sa paggamit ng mga antibiotics. Ang pamamaraang ito ay ginagamit sa paglilinang ng mga virus.
mga tanong sa pagsusulit
1. Ano ang chemical sterilization at kailan ito ginagamit?
2. Ano ang biological sterilization?
Ang mga pangunahing pamamaraan ng isterilisasyon ay ipinakita sa talahanayan. 4.
1 (Ang sterilization ay hindi kumpleto: ang mga spore ay nananatili sa isterilisadong materyal.)
2 (Ang sterilization ay hindi kumpleto: ang mga virus ay nananatili sa isterilisadong materyal.)
Pagdidisimpekta
Iba't ibang disinfectant ang ginagamit sa microbiological practice: 3-5% phenol solutions, 5-10% Lysol solutions, 1-5% chloramine solutions, 3-6% hydrogen peroxide solutions, 1-5% formalin solutions, sublimate solutions in dilution 1: 1000 (0.1%), 70° alcohol, atbp.
Ang ginugol na pathological na materyal (nana, feces, ihi, plema, dugo, cerebrospinal fluid) ay dinidisimpekta bago ito ibuhos sa alkantarilya. Ang pagdidisimpekta ay isinasagawa gamit ang dry bleach o 3-5% chloramine solution.
Ang mga pipette na kontaminado ng pathological material o microbial cultures (graded at Pasteur), glass spatula, slides at coverslips ay inilubog sa isang araw sa mga glass jar na may 3% na solusyon ng phenol o hydrogen peroxide.
Sa pagkumpleto ng trabaho na may nakakahawang materyal, ang katulong sa laboratoryo ay dapat tratuhin ang lugar ng trabaho at mga kamay gamit ang isang disinfectant solution. Ang ibabaw ng desktop ay pinupunasan ng isang piraso ng cotton wool na binasa ng isang 3% na phenol solution. Ang mga kamay ay dinidisimpekta ng 1% chloramine solution. Upang gawin ito, magbasa-basa ng cotton ball o gauze na may disinfectant solution at punasan ang kaliwang kamay, pagkatapos ay ang kanan, at pagkatapos ay hugasan ang kanilang mga kamay ng maligamgam na tubig at sabon.
Ang pagpili ng disinfectant, ang konsentrasyon nito at ang tagal ng pagkakalantad (exposure) ay depende sa mga biological na katangian ng microbe at sa kapaligiran kung saan ang contact ng disinfectant na may mga pathogenic microorganism ay magaganap. Halimbawa, ang sublimate, phenol, alkohol ay hindi angkop para sa pagdidisimpekta ng mga substrate ng protina (pus, dugo, plema), dahil sa ilalim ng kanilang impluwensya ay nangyayari ang coagulation ng protina, at pinoprotektahan ng coagulated protein ang mga microorganism mula sa pagkakalantad sa mga disinfectant.
Kapag nagdidisimpekta ng materyal na nahawaan ng mga spore form ng microorganism, isang 5% na solusyon ng chloramine, 1-2.5% na solusyon ng activated chloramine, 5-10% na solusyon ng formalin at iba pang mga sangkap ay ginagamit.
Ang pagdidisimpekta, na isinasagawa sa buong araw sa kurso ng trabaho, ay tinatawag na kasalukuyang, at sa pagtatapos ng trabaho - pangwakas.
Mga disinfectant at reseta para sa paghahanda ng mga gumaganang solusyon mula sa kanila. Ang chlorine lime ay isang puting bukol na pulbos na may malakas na amoy ng murang luntian, hindi ito ganap na natutunaw sa tubig. Ang epekto ng bactericidal ay nakasalalay sa nilalaman ng aktibong kloro, ang halaga nito ay mula 28 hanggang 36%. Ang bleach na naglalaman ng mas mababa sa 25% na aktibong chlorine ay hindi angkop para sa pagdidisimpekta.
Kung hindi maayos ang pag-imbak, ang bleach ay nabubulok at nawawala ang ilan sa aktibong chlorine. Ang agnas ay pinadali ng init, kahalumigmigan, sikat ng araw, kaya ang bleach ay dapat na naka-imbak sa isang tuyo, madilim na lugar, sa isang mahigpit na saradong lalagyan.
Ang dry bleach ay ginagamit upang disimpektahin ang mga dumi ng mga tao at hayop (sa rate na 200 g bawat 1 litro ng dumi at 10 g bawat 1 litro ng ihi).
Paghahanda ng paunang 10% clarified bleach solution. Kumuha ng 1 kg ng dry bleach, ilagay sa isang enameled bucket at gilingin. Pagkatapos ay ibuhos ang malamig na tubig hanggang sa dami ng 10 litro, ihalo nang mabuti, takpan ng takip at mag-iwan ng isang araw sa isang cool na lugar. Pagkatapos nito, ang nagresultang 10% na nilinaw na solusyon ay maingat na pinatuyo at sinala sa pamamagitan ng ilang mga layer ng gauze o sinala sa pamamagitan ng isang siksik na tela. Mag-imbak sa mga bote ng madilim na salamin, sarado na may takip na gawa sa kahoy, sa isang malamig na lugar, hindi hihigit sa 10 araw. Ang mga gumaganang solusyon ng kinakailangang konsentrasyon ay inihanda mula sa pangunahing solusyon kaagad bago ang kanilang paggamit. Ang halaga ng pangunahing solusyon na kinakailangan para sa paghahanda ng 0.2-10% clarified na solusyon ng bleach ay ibinibigay sa talahanayan. 5.
Ang konsentrasyon ng mga nilinaw na solusyon sa pagpapaputi mula 0.2 hanggang 10% ay pinili depende sa likas na katangian ng bagay na madidisimpekta at ang paglaban ng pathogen.
Chloramine - mala-kristal na sangkap puti o madilaw na kulay, naglalaman ng 24-28% aktibong klorin. Mahusay itong natutunaw sa tubig sa temperatura ng silid, kaya ang mga solusyon nito ay inihanda kaagad bago ang pagdidisimpekta. Gumamit ng 0.2-10% na solusyon ng chloramine. Ang ratio sa pagitan ng porsyento ng konsentrasyon ng solusyon at ang halaga ng chloramine sa gramo bawat 1 at 10 litro ay ibinibigay sa talahanayan. 6.
I-dissolve ang chloramine sa isang baso o enamel bowl. Kapag nag-iimbak ng mga solusyon sa chloramine sa isang madilim na lalagyan ng salamin na may ground stopper, ang kanilang aktibidad ay nagpapatuloy hanggang sa 15 araw.
activated chloramine. Ang mga katangian ng pagdidisimpekta ng chloramine ay pinahusay sa pamamagitan ng pagdaragdag ng isang activator dito sa isang ratio na 1:1 o 1:2. Ang mga compound ng ammonium - chloride, sulfate, ammonium nitrate - ay ginagamit bilang isang activator. Ang activated chloramine ay ginagamit sa isang konsentrasyon ng 0.5, 1 at 2.5%. Ihanda kaagad ang mga ito bago gamitin. Ang chloramine at ammonium salt ay hiwalay na tinitimbang. Una, ang chloramine ay natunaw sa tubig, at pagkatapos ay idinagdag ang activator.
Ang bentahe ng mga activated chloramine solution kumpara sa mga conventional ay kapag ang isang activator ay idinagdag, ang pagpapalabas ng aktibong chlorine ay pinabilis. Samakatuwid, ang gamot ay may masamang epekto hindi lamang sa mga vegetative na anyo ng mga microorganism, kundi pati na rin sa kanilang mga spores. Ginagamit ang activated chloramine sa mas mababang konsentrasyon at sa mas mababang exposure.
Ang Phenol (carbolic acid) ay isang walang kulay na kristal na hugis ng karayom na may matalim na katangian ng amoy. Sa ilalim ng pagkilos ng liwanag, hangin at kahalumigmigan, ang mga kristal ay nakakakuha ng isang pulang-pula na kulay. Itago sa saradong madilim na garapon ng salamin at sa isang lugar na protektado mula sa liwanag.
Ang phenol ay natutunaw sa tubig, alkohol, eter, mataba na langis. Ang pagkakaroon ng mataas na hygroscopicity, ito ay sumisipsip ng kahalumigmigan mula sa kapaligiran at nagiging likido. Ang likidong carbolic acid ay naglalaman ng 90% crystalline phenol at 10% na tubig.
Mag-apply ng 3-5% may tubig na mga solusyon carbolic acid, na inihanda mula sa crystalline phenol at liquid carbolic acid ayon sa scheme na ipinapakita sa talahanayan. 7. Ang aktibidad ng phenol ay tumataas kapag ito ay natunaw sa mainit na tubig (40-50 ° C).
Pansin! Ang mala-kristal na phenol o likidong carbolic acid, na nakukuha sa balat, ay maaaring maging sanhi ng pangangati ng balat, at sa mataas na konsentrasyon - matinding pagkasunog. Samakatuwid, ang carbolic acid ay dapat hawakan nang may mahusay na pag-iingat. Kapag gumagawa ng mga solusyon, magsuot ng guwantes na goma o, sa matinding kaso, lubricate ang iyong mga kamay ng petroleum jelly.
Kung ang carbolic acid ay nadikit sa balat, agad itong hugasan ng maligamgam na tubig at sabon o 40 ° ethyl alcohol.
Tandaan. Para sa paghahanda ng mga solusyon sa disinfectant ng phenol, mas maginhawa at mas ligtas na gumamit ng likidong carbolic acid.
mga tanong sa pagsusulit
1. Anong mga disinfectant ang ginagamit sa microbiological practice?
2. Ilarawan hitsura at ang mga pangunahing katangian ng bleach, chloramine, phenol.
3. Anong mga solusyon ng mga disinfectant ang ginagamit upang disimpektahin ang materyal na nahawaan ng mga spore form ng microorganism?
Mag-ehersisyo
Maghanda ng 2 litro ng 5% working solution ng clarified bleach; 500 ml ng 3% chloramine solution, 300 ml ng 1% activated chloramine solution.
Pansin! Bago mo simulan ang paghahanda ng mga solusyon, gawin ang mga kalkulasyon.
Ang mahahalagang aktibidad ng mga microorganism ay nakasalalay sa mga kondisyon ng pagkakaroon. Ang mga kanais-nais na kondisyon para sa kanilang pag-iral ay kahalumigmigan, init, at pagkakaroon ng mga sustansya. Ang pagpapatayo, acidic na kapaligiran, mababang temperatura, kakulangan ng mga sustansya, atbp. ay pumipigil sa pag-unlad ng mga mikroorganismo.
Karamihan sa mga produktong pagkain ay chemically favorable environment para sa pagkakaroon ng microbes. Samakatuwid, ang mga produktong pagkain ay maaari lamang maimbak sa ilalim ng hindi kanais-nais na mga kondisyon para sa mga mikroorganismo. Sa pagsasalita tungkol sa impluwensya ng mga pisikal na kadahilanan sa kapaligiran sa mga microorganism, ang ibig nilang sabihin ay ang mga kondisyon sa kapaligiran na nakakaapekto sa kanilang pag-unlad at hatiin sila sa tatlong pangunahing grupo: pisikal, kemikal at biyolohikal. Ang mga pisikal na kondisyon (mga kadahilanan) ay kinabibilangan ng: temperatura, halumigmig ng kapaligiran, konsentrasyon ng mga sangkap na natunaw sa kapaligiran; radiation.
Epekto ng temperatura sa mga mikroorganismo.
Ang pag-unlad ng lahat ng mga microorganism ay posible sa isang tiyak na temperatura. Ang mga mikroorganismo ay kilala na maaaring umiral sa mababa (-8°C at mas mababa) at sa mataas na kondisyon ng temperatura, halimbawa, ang mga naninirahan sa mga hot spring ay sumusuporta sa mahahalagang aktibidad sa temperatura na 80-95°C. Karamihan sa mga mikrobyo ay mas gusto ang mga limitasyon sa temperatura na 15-35°C. Makilala:
- pinakamainam, pinaka-kanais-nais na temperatura para sa pag-unlad;
- ang maximum kung saan huminto ang pag-unlad ng mga mikrobyo ng isang partikular na species;
- minimum, sa ibaba kung saan ang mga mikrobyo ay huminto sa pag-unlad.
May kaugnayan sa antas ng temperatura, ang mga mikroorganismo ay nahahati sa tatlong grupo:
- psychrophytes - lumago nang maayos sa mababang temperatura,
- mesophylls - karaniwang umiiral sa katamtamang temperatura,
- thermophile - umiiral sa patuloy na mataas na temperatura.
Ang mga mikrobyo ay medyo mabilis na umaangkop sa mga makabuluhang pagbabago sa temperatura. Samakatuwid, ang isang bahagyang pagbaba o pagtaas sa antas ng temperatura ay hindi ginagarantiyahan ang paghinto ng pag-unlad ng mga microorganism.
Impluwensya ng mataas na temperatura.
Ang mga temperatura na mas mataas kaysa sa pinakamataas ay nagiging sanhi ng pagkamatay ng mga microorganism. Sa tubig, karamihan sa mga vegetative form ng bacteria ay namamatay sa loob ng isang oras kapag pinainit hanggang 60°C; hanggang 70°C - sa loob ng 10-15 minuto, hanggang 100°C - sa ilang segundo. Sa hangin, ang pagkamatay ng mga microorganism ay nangyayari sa isang mas mataas na temperatura - hanggang sa 170 ° C at sa itaas sa loob ng 1-2 oras. Ang mga spore form ng bakterya ay mas lumalaban sa init, maaari silang makatiis na kumukulo sa loob ng 4-5 na oras.
Ang mga paraan ng pasteurization at isterilisasyon ay batay sa kakayahan ng mga mikrobyo na mamatay sa ilalim ng impluwensya ng mataas na temperatura. Pasteurization - ay isinasagawa sa isang temperatura ng 60-90 ° C, habang ang mga vegetative form ng mga cell mamatay, at spore cell mananatiling mabubuhay. Samakatuwid, ang mga pasteurized na produkto ay dapat na mabilis na palamigin at iimbak sa ilalim ng mga kondisyon ng refrigerator. Ang sterilization ay ang kumpletong pagkasira ng lahat ng anyo ng mga microorganism, kabilang ang mga spores. Isinasagawa ang sterilization sa temperatura na 110-120°C at mataas na presyon.
Gayunpaman, ang mga spores ay hindi namamatay kaagad. Kahit na sa 120°C, ang kanilang kamatayan ay nangyayari sa loob ng 20-30 minuto. Isterilize nila ang de-latang pagkain, ilang mga medikal na materyales, mga substrate kung saan lumaki ang mga mikroorganismo sa mga laboratoryo. Ang epekto ng isterilisasyon ay nakasalalay sa dami at husay na komposisyon ng microflora ng bagay ng isterilisasyon, ang kemikal na komposisyon nito, pagkakapare-pareho, dami, masa, atbp.
Impluwensya ng mababang temperatura.
Kadalasan, ang epekto ng mababang temperatura ay hindi nauugnay sa pagkamatay ng mga microorganism, ngunit sa pagsugpo at pagtigil ng kanilang pag-unlad. Mas mahusay na pinahihintulutan ng mga mikroorganismo ang mababang temperatura. Maraming mga mikrobyo na nagdudulot ng sakit na pumapasok sa kapaligiran ay kayang tiisin ang malupit na taglamig nang hindi nawawala ang kanilang pathogenicity. Ang temperatura kung saan ang mga nilalaman ng cell ay nagyeyelo pinaka-negatibong nakakaapekto sa pag-unlad ng mga microorganism.
Ang nagbabawal na epekto ng mababang temperatura sa microbes ay ginagamit upang mag-imbak ng iba't ibang mga produkto na pinalamig sa temperatura na 0-4°C, at nagyelo - sa temperatura na -6-20°C at mas mababa. Ang epekto ng mababang temperatura sa mga frozen na pagkain ay nagpapabuti sa epekto ng tumaas na osmotic pressure. Dahil ang karamihan sa tubig ay naging yelo, ang natitirang likidong bahagi ng tubig ay naglalaman ng lahat ng mga dissolved substance na nakapaloob sa masa ng produkto. Nagdudulot ito ng pagtaas ng osmotic pressure, na, sa turn, ay pumipigil sa pag-unlad ng mga mikrobyo.
Ang pagyeyelo ay ginagamit upang mag-imbak ng karne, isda, prutas, semi-tapos na mga gulay, mga produktong culinary, handa na pagkain, atbp. Ang paghinto ng microbial development ay may bisa lamang hangga't ang mababang temperatura ay nagpapatuloy. Kapag tumaas ang temperatura, nagsisimula ang mabilis na pag-unlad at pagpaparami ng mga mikrobyo, na nagiging sanhi ng pagkasira ng mga produktong pagkain.
Samakatuwid, ang mababang temperatura ay nagpapabagal lamang sa mga proseso ng biochemical nang hindi nagkakaroon ng isang sterilizing effect. Ang paulit-ulit na pagyeyelo ng parehong mga produkto ay nag-aambag sa mabilis na pagbagay ng mga mikrobyo sa mababang temperatura at pinahuhusay ang kanilang posibilidad. Samakatuwid, kinakailangan upang maiwasan ang pagbabagu-bago ng temperatura sa panahon ng pag-iimbak ng mga produkto.
Kabilang sa mga pangunahing pisikal na kadahilanan na nakakaapekto
ang mga mikroorganismo sa kanilang natural na tirahan at sa mga kondisyon ng laboratoryo ay kinabibilangan ng temperatura, pagpapatuyo, hydrostatic pressure, radiant energy, at iba pa.
Ang epekto ng temperatura. Ang temperatura ay isa sa pinakamahalagang salik sa buhay ng mga mikrobyo. Maaari itong maging pinakamainam, i.e. ang pinaka-kanais-nais para sa pag-unlad, pati na rin ang maximum kapag ang mga proseso ng buhay ay pinigilan; minimal, na humahantong sa paghina o pagtigil ng paglago. Ang mga mikroorganismo, ayon sa kanilang pagbagay sa ilang mga kondisyon ng temperatura, ay pinagsama sa tatlong pangkat ng physiological:
mga psychrophile
mesophile
mga thermophile
Psychrophilic microorganisms - mga naninirahan sa malamig na bukal,
malalim na dagat at karagatan na may pinakamainam na temperatura na 15-20 0 С, ang paglago ay posible mula sa 0 0 Mula hanggang 35 0 C. Kabilang dito ang luminous bacteria, iron bacteria at iba pa.
Ang mesophilic bacteria ay nabubuhay sa katamtamang temperatura na may pinakamainam na 30-37 0 C, hindi bababa sa 3 0 C at hanggang sa maximum na 45 0 C. Kabilang dito ang karamihan sa mga saprophyte at lahat ng pathogens.
Ang mga thermophilic bacteria ay nangangailangan ng mas mataas na temperatura para sa kanilang pag-unlad - mula 35 hanggang 80 0 C, sa pinakamabuting kalagayan - 50-60 0 C. Matatagpuan ang mga ito sa mga hot spring, digestive tract ng mga hayop, at sa mga lupa ng mainit na klima.
Iba-iba ang epekto ng mataas at mababang temperatura ng mga mikrobyo. Ang mababang temperatura ay karaniwang hindi nagiging sanhi ng pagkamatay ng mga mikrobyo, ngunit naantala lamang ang kanilang paglaki at pagpaparami. Ang mahahalagang aktibidad ng maraming mikrobyo ay pinapanatili sa isang temperatura na malapit sa absolute zero. Kaya, ang Escherichia ay nananatiling mabubuhay sa - 190 0 Mula hanggang 4 na buwan, at brucella sa -40 0 Ang C ay nakaimbak nang higit sa 6 na buwan. Gayunpaman, dapat tandaan na kapag ang pagyeyelo ay nangyayari nang walang pagbuo ng mga kristal (-190), kung gayon ang temperatura na ito ay hindi gaanong mapanira kaysa sa temperatura (-20), kung saan nabuo ang mga kristal ng yelo, na humahantong sa mekanikal na pinsala at hindi maibabalik na mga proseso sa ang microbial cell.
Ang mababang temperatura ay humihinto sa mga proseso ng putrefactive at fermentation.
Ang mataas na temperatura, lalo na ang naka-pressure na pag-init ng singaw, ay nakakapinsala sa mga mikrobyo. Kung mas lumalampas ang temperatura sa maximum, mas mabilis ang pagkamatay ng mga vegetative form ng microorganism: sa 60 0 C - pagkatapos ng 30 minuto, sa 80-100 0 C - pagkatapos ng 1 min. Ang mga bacterial spores ay mas lumalaban sa mataas na temperatura.
Ang pagkilos ng bactericidal ng mataas na temperatura ay batay sa pagsugpo ng mga enzyme, denaturation ng protina, at paglabag sa osmotic barrier. Ang pagkakalantad sa mataas na temperatura ay pinagbabatayan ng maraming paraan ng thermal sterilization, na pangunahing isinasagawa sa isang autoclave (sa 120 0 C, na may presyon na 1 atm, 30 minuto), o sa pamamagitan ng pagkulo, fractional sterilization na may dumadaloy na singaw (sa 100 0 C, tatlong araw na sunud-sunod sa loob ng 30 minuto), pagkakalantad sa tuyong init (sa 170 0 Mula 1.5 oras) - nang mas detalyado sa LPZ. Ang terminong isterilisasyon ay nauunawaan bilang isang kaganapan na naglalayong ganap na sirain ang lahat ng mga mikrobyo sa isterilisadong materyal (mga bangkay ng hayop, mga kagamitang babasagin sa laboratoryo, nutrient media, ginamit na microbial culture).
epekto ng pagpapatayo. Ang pagpapatuyo, na humahantong sa pag-aalis ng tubig, ay nakakapinsala sa mga mikroorganismo. Sa isang bacterial cell, dahil sa dehydration, bumabagal ang mga proseso ng buhay, humihinto ang proseso ng reproduction, ang cell ay napupunta sa isang anabiotic state. Ang dehydration ng mga vegetative bacterial cell sa karamihan ng mga kaso ay nagiging sanhi ng kanilang pagkamatay (lalo na ang mga pathogenic). Ang mga spore form ng microbes sa tuyo na estado ay maaaring manatili sa loob ng maraming taon. Sa pagsasanay sa laboratoryo, upang mapanatili ang mga microbial culture, ang paraan ng sublimation - dehydration sa mababang temperatura - ay malawakang ginagamit. Ginagamit ang paraang ito sa pagpapatuyo ng mga bakuna, kultura ng museo, therapeutic at diagnostic sera, at iba pang biological na produkto.
Impluwensya ng hydrostatic at osmotic pressure. Ang hydrostatic pressure na lumampas sa 108-110 MPa ay nagiging sanhi ng denaturation ng protina, hindi aktibo ng enzyme, pinatataas ang electrolytic dissociation, pinatataas ang lagkit ng maraming likido, na negatibong nakakaapekto sa mahahalagang aktibidad ng mga microbes at kadalasang humahantong sa kanilang kamatayan. Karamihan sa mga mikrobyo ay maaaring makatiis ng presyon na humigit-kumulang 65 MPa sa loob ng isang oras. May mga barotolerant (113-116 MPa) microorganism na naninirahan sa kailaliman ng karagatan, mga balon ng langis. Mataas na presyon ng dugo (10 3 – 10 6 Pa) na sinamahan ng mataas na temperatura (120 0 C) ay ginagamit sa mga autoclave para sa layunin ng neutralisasyon (isterilisasyon) ng mga materyales.
Ang osmotic pressure ng medium, na tinutukoy ng konsentrasyon ng mga sangkap na natunaw dito, ay may malaking impluwensya sa paglaki ng mga microorganism. Sa loob ng bakterya, ang osmotic pressure ay tumutugma sa presyon ng isang 10-20% sucrose solution. Kung ang isang microbial cell ay inilagay sa isang kapaligiran na may mas mataas na osmotic pressure, pagkatapos ay ang plasmolysis (pagkawala ng tubig at pagkamatay ng cell) ay magaganap, kung ito ay inilagay sa isang kapaligiran na may mababang osmotic pressure, pagkatapos ay ang tubig ay papasok sa cell, ang cell maaaring pumutok ang dingding - plasmoptosis. Ang mga phenomena na ito ay ginagamit sa industriya at sa pang-araw-araw na buhay para sa pangangalaga ng mga produkto (mga pipino, kamatis, repolyo, atbp.).
Gayunpaman, may mga microorganism na gustong tumubo sa mataas na konsentrasyon ng asin - mga halophile. Halimbawa, panganganakMicrococcus, Sarcinalahi sa mataas na konsentrasyon ng 20-30%NaCL. Ginagamit ang ari-arian na ito sa pagsasanay sa laboratoryo upang pag-iba-iba ang mga mikroorganismo na ito mula sa iba pang katulad.
Ang epekto ng iba't ibang uri ng radiation sa mga mikroorganismo. Iba't ibang uri ng radiation bactericidal effect sa microbes. Gayunpaman, ang antas ng pagkilos na ito ay nakasalalay sa uri ng enerhiya ng radiation, dosis nito at tagal ng pagkakalantad.
Ang sinag ng araw ay isang pisikal na kadahilanan na may malakas na epekto sa mga mikrobyo. Maraming mga pathogenic microorganism ang namamatay kapag nakalantad sa sikat ng araw sa loob ng 10-30 minuto, ang ilan pagkatapos ng 2 oras (tuberculosis bacillus), spores ng bacilli - pagkatapos ng ilang oras. Ang nakakalat na liwanag ay mas mahina. Sa pagsasagawa, ang paglilinang ng mga microorganism ay isinasagawa sa dilim, sa mga thermostat. Ang nakikitang liwanag ay may positibong epekto lamang sa mga bacteria na bumubuo ng pigment. Ang bactericidal effect ng liwanag ay nauugnay sa pagbuo ng mga hydroxyl radical at iba pang mga aktibong sangkap sa cell.
Ang mga sinag ng ultraviolet (100-380 nm) ay malawakang ginagamit para sa sanitasyon ng hangin sa mga gusali ng hayop, laboratoryo at industriyal na pagawaan, mga kahon upang matiyak ang mga kondisyon ng aseptiko para sa mga pananim. Sa kasong ito, ginagamit ang mga lamp na mercury-quartz (PRK) o bactericidal (BUV). Ang mekanismo ng pagkilos ng UFL ay upang sugpuin ang pagtitiklop ng DNA.
Ang mga radioactive gamma-ray at X-ray ay may bahagyang mahinang epekto sa mga mikrobyo, dahil sa katotohanan na ang mga bagay na i-sterilize ay dapat na malapit sa pinagmulan ng radiation. Ginagamit ang mga ito upang sirain ang mga mikrobyo sa mga instrumento, sa mga dressing, at biological na mga produkto.
Dahil sa kakulangan ng oras, mababasa mo ang epekto ng ultrasound, kuryente at iba pang pisikal na mga kadahilanan sa mga microorganism sa iyong sarili.
2. Ang mga mikrobyo, tulad ng lahat ng nabubuhay na bagay, ay lubhang sensitibo sa mga salik sa kapaligiran. Kapag lumitaw ang mga kanais-nais na impulses, ang mga mikrobyo ay nagmamadali sa bagay ng pangangati, ang mga hindi kanais-nais na impulses ay nagtataboy sa kanila. Ang kababalaghang ito ay tinatawag na chemotaxis. Ang mga sangkap na may kapaki-pakinabang na epekto sa microbial cell (meat extract, peptone) ay nagdudulot ng positibong chemotaxis; makapangyarihan, nakakalason na mga sangkap (mga acid, alkalis, atbp.) na humahantong sa labis na pagpapasigla o depresyon, na humahantong sa negatibong chemotaxis. Ang mga nakakalason na sangkap na pumapasok sa bacterial cell ay nakikipag-ugnayan sa mga mahahalagang bahagi nito at nakakagambala sa kanilang mga function. Nagdudulot ito ng paghinto ng paglaki ng microorganism (bacteriostatic action) o pagkamatay (bactericidal action). Ang mga kemikal na sangkap ng iba't ibang grupo ay may epektong bactericidal: mga acid (H 2 KAYA 4 , NSL, HNO 3 ), mga alkohol (methyl, ethyl, atbp.), mga surfactant (fatty acid, pulbos, sabon), phenol at mga derivatives nito, mga asing-gamot ng mabibigat na metal (lead, tanso, sink, mercury), mga ahente ng oxidizing (chlorine, yodo,KMhindi 4 , N 2 O 2 ), grupo ng formaldehyde, mga tina (br. berde, rivanol, atbp.). Ang mekanismo ng pagkilos ng antimicrobial ng mga sangkap na ito ay naiiba. Ang ilan sa kanila (formaldehyde, acids, alkalis, atbp.) ay nagdudulot ng coagulation ng protina, binabago ng iba ang reaksyon ng kapaligiran, at ang iba ay nakakasira sa cell wall.
Ang pagkilos ng mga kemikal sa microbes ay tumataas sa pagtaas ng temperatura ng solusyon sa 60-70 0 , pagtaas sa konsentrasyon ng kemikal, tagal. Ang likas na katangian ng materyal kung saan kinakailangan upang sirain ang mga mikrobyo ay mahalaga din - sa pataba, ang mga bangkay ng hayop, nana, mga mikrobyo ay hindi gaanong naa-access, at para sa kanilang pagdidisimpekta, ang pangmatagalang pagkakalantad sa mataas na puro solusyon ng mga kemikal ay kinakailangan.
Upang sirain ang mga vegetative form ng bakterya, isang 5% na solusyon ng phenol, lysol o chloramine, 10-20% quicklime solution, 2% formaldehyde solution, 4% na mainit na sodium hydroxide solution ay kadalasang ginagamit, na nagiging sanhi ng kanilang pagkamatay sa karaniwan pagkatapos ng 1-2 oras. Ang mga spore ng Bacillus ay namamatay kapag nalantad sa 3% formaldehyde solution, 20% bleach solution, 5% phenol solution sa loob ng 10-24 na oras.
Sa ilang mga kaso, ang mga kemikal ay ginagamit sa anyo ng isang aerosol; ginagamit din ang mga gas.
Ang pagkilos ng antimicrobial ng mga kemikal ay ang batayan ng pagdidisimpekta - isang kaganapan na naglalayong sirain ang mga pathogenic microbes ng isang tiyak na uri. Hindi tulad ng isterilisasyon, hindi sinisira ng pagdidisimpekta ang lahat ng mga species - maraming saprophyte ang hindi sensitibo sa isang partikular na disinfectant at nananatiling mabubuhay.
3. Ang pagkilos ng mga biological na kadahilanan ay ipinakita lalo na sa antagonism ng mga mikrobyo, kapag ang mga produktong basura ng ilang mga mikrobyo ay nagdudulot ng pagkamatay ng iba. Ang modernong teorya ng antibiotics ay patuloy na konektado sa problema ng microbial antagonism.
Antibiotics (gr.anti- laban,bios- buhay) - mga sangkap ng pinagmulan ng microbial, hayop at halaman na pumipigil sa pag-unlad at biochemical na aktibidad ng mga microbes na sensitibo sa kanila. Sa pamamagitan ng pinagmulan, ang mga antibiotic ay nahahati sa mga sumusunod na grupo:
Ang mga antibiotic na nakahiwalay sa mga kabute.
Ang mga amag ay ang pinaka-aktibong gumagawa ng mga antibiotic.
fungi at actinomycetes. Ang amag na penicillium ay bumubuo ng malawakang ginagamit na antibiotic na penicillin, at aspergillus at mucor - fumagatsin, aspergillin, clavicin. Karamihan sa mga antibiotic ay nakahiwalay sa actinomycetes: streptomycin, tetracycline, biomycin, neomycin, nystatin at iba pa.
Mga antibiotic na nakahiwalay sa bacteria.
Ang mga producer ay iba't ibang bacteria. Higit sa lahat
saprophytes na may matinding biochemical na aktibidad, na naninirahan sa lupa. Kabilang dito ang gramicidin, colicin, pyocyanin, subtilin, polymyxins, bacitracin, lysozyme, at iba pang bacterial enzymes.
Antibiotics ng pinagmulan ng hayop.
Biologically malapit sa antibiotics ang ilan
mga sangkap na itinago ng mga tisyu ng hayop na maaaring piliing makaapekto sa ilang uri ng mikrobyo. Ito ay erythrin, na nakahiwalay sa mga erythrocytes ng hayop; ecmolin na nagmula sa tissue ng isda.
Antibiotics ng pinagmulan ng halaman.
Mga nakakalason na pabagu-bago ng isip na inilalabas ng mga halaman (sibuyas, bawang,
malunggay, mustasa, aloe, nettle, juniper, atbp.) na tinatawag. phytoncides. Natuklasan noong 1928 ni B.N. Tokin. Ang ilang mga phytoncides ay nakahiwalay sa purong anyo: alicin - mula sa bawang, raffinine - mula sa mga buto ng labanos, atbp.
Ang mga antibiotic ay maaaring magkaroon ng bactericidal (pagpatay) o bacteriostatic (growth-inhibiting) effect sa mga microorganism. Ang ari-arian na ito ay depende sa uri ng antibyotiko, ang konsentrasyon nito, ang sensitivity ng microorganism dito at iba pang mga kadahilanan. Ang bawat antibiotic ay may partikular na antimicrobial spectrum ng pagkilos: may mga antibiotic na kumikilos sa ilang uri ng microorganism (penicillin, gramicidin), at mga antibiotic na may malawak na spectrum ng aktibidad na antimicrobial (levomycetin, tetracycline, atbp.). Ang mekanismo ng pagkilos ng mga antibiotics sa mga microorganism ay batay sa isang paglabag sa synthesis ng cell wall at mga lamad nito, o isang paglabag sa synthesis ng DNA. RNA at protina. Halimbawa, ang penicillin ay nakakagambala sa pagbuo ng isang bacterial wall, ang levomycetin ay negatibong nakakaapekto sa RNA at synthesis ng protina.
Kaugnay ng malawakan at pangmatagalang paggamit ng mga antibiotic bilang mga gamot, ang mga uri ng microbes na lumalaban sa antibiotic ay lumitaw at kumalat nang napakalawak, lalo na.Lmga form na sanhi ng iba't ibang mga nakakahawang sakit. Ang mekanismo para sa pagbuo ng mga lumalaban na anyo ng mga mikrobyo ay medyo kumplikado: ang paggawa ng mga adaptive enzymes (eg penicillinase), ang synthesis ng mga natural na metabolites na pumipigil sa pagkilos ng antimetabolites ng mga chemotherapy na gamot (hal. staphylococci ay gumagawa ng para-aminobenzoic acid at nagiging insensitive sa gamot na ito. At bilang resulta din ng mutations, conjugation, transformation, transduction.
Ang isang paunang pagpapasiya ng sensitivity ng mga microorganism ay nagpapahintulot sa iyo na piliin ang pinaka-aktibong antibyotiko at pagkatapos ay gamitin ito bilang isang therapeutic na gamot. Ang pagpapasiya ng sensitivity ng microbes sa antibiotics ay isinasagawa sa pamamagitan ng paraan ng pagsasabog sa agar o sa pamamagitan ng paraan ng serial dilutions - higit pang mga detalye sa LPZ.
Mga bacteriaophage. Ang antimicrobial effect ay ibinibigay sa pamamagitan ng lysis ng microbial cell: una ay nakakahawa, pagkatapos ay nagpaparami, na bumubuo ng maraming supling, at nagli-lyses ng cell, na sinamahan ng paglabas ng mga particle ng phage sa tirahan ng bacterial.
Ang mga bacteriaophage ay malawak na ipinamamahagi sa lupa, tubig, dumi ng mga may sakit at malulusog na hayop, mga tao at matatagpuan sa karamihan ng mga uri ng bakterya. Natuklasan sila ni D. Errel noong 1917.
Ang phage ay may mahusay na tinukoy na mga katangian ng antigenic. Kapag ang phage ay pinangangasiwaan nang parenteral, ang mga antibodies ay nabuo sa katawan na neutralisahin ang aktibidad ng lytic ng phage at may mataas na pagtitiyak. Ayon sa mga katangian ng antigenic, ang mga phage ay nahahati sa mga variant ng serological.
Ayon sa antas ng pagtitiyak, ang mga phage ay maaaring nahahati sa tatlong grupo: polyphages lyse related bacteria, monophage - bacteria ng isang species, at phages - ilang partikular na variant lang ng ganitong uri ng bacteria.
Karamihan sa mga phage ay hindi aktibo sa 65-70 0 C. Ang mas mababang temperatura ay binabawasan ang aktibidad ng phage. Ang Phages ay medyo madaling tiisin ang pagyeyelo sa -185. 0 C, at makatiis din ng pagpapatayo. Ang Phage ay mas lumalaban sa mga disimpektante kaysa sa bakterya.
Ang phage ay kumikilos lamang sa mga nabubuhay na selula ng bakterya sa proseso ng kanilang aktibong paglaki. Depende sa likas na katangian ng ipinakitang aksyon, ang mga virulent at temperate phage ay nakikilala. Virulent phages, kapag tumagos sila sa isang bacterial cell, dumami dito at nagiging sanhi ng lysis; Ang mga temperate phage ay hindi nagiging sanhi ng lysis, ngunit nananatili sa isang estado ng lysogeny.
Ang laki ng mga bacteriophage, tulad ng mga virus, ay maliit - 8-100 nm. Ang kanilang hugis ay kahawig ng isang spermatozoon - isang proseso ng buntot na may iba't ibang haba na umaalis mula sa isang bilugan o multifaceted na ulo. Gayunpaman, kung minsan may mga phage na kulang sa proseso. Ang Bacteriophage ay isang non-cellular formation. Wala itong shell, nucleus, cytoplasm, i.e. mga elemento ng cell. Binubuo ito ng isang molekula ng nucleic acid (mas madalas na DNA, mas madalas na RNA) at isang kaluban ng protina na nakapalibot dito. Ang nucleic acid (40-50%) ay matatagpuan sa loob ng ulo, ang isang kaluban ng protina (50-60%) ay sumasaklaw sa parehong proseso ng ulo at buntot, sa dulo kung saan mayroong mga espesyal na hibla na nagpapadali sa pagkakabit ng phage sa microbial membrane. Ang mga lipid at enzyme sa phage particle ay nasa kaunting halaga - mga 2%.
Ginagamit ang mga bacteriaophage para sa mga diagnostic ng phage, pag-type ng phage ng bakterya, at para sa pag-iwas at paggamot ng mga nakakahawang sakit. Para sa higit pang mga detalye tingnan ang LPZ.
Federal State Educational Institution of Higher Professional Education
Moscow akademya ng estado veterinary medicine at biotechnology na pinangalanang »
_____________________________________________________
Impluwensya ng pisikal, kemikal at biyolohikal na mga salik
para sa mga mikroorganismo
Moscow - 2011
Gryaznev ng pisikal, kemikal at biyolohikal na mga kadahilanan sa mga mikroorganismo / Lektura .- M .: FGOU VPO MGAVMiB.- 20s.
Ito ay inilaan para sa mga mag-aaral ng mas mataas na institusyong pang-edukasyon sa mga specialty 111801 - "Beterinaryo Medicine", 020207 - "Biophysics", 020208 - "Biochemistry", 110501 - "Vetsanexpertiza", 080 - "Commodity Science at Expertise of Goods", 111100 - "Zootechnics".
Mga Reviewer:
doktor ng mga agham ng beterinaryo, propesor
Inaprubahan ng pang-edukasyon, pamamaraan at klinikal na komisyon ng Faculty of Veterinary Medicine ng Federal State Educational Institution of Higher Professional Education ng Moscow State Academy of Medical and Biological Safety (Mga minuto na may petsang Marso 21, 2011).
Ang impluwensya ng pisikal, kemikal at biyolohikal na mga kadahilanan sa mga mikroorganismo
Panimula.
1. Mga pisikal na salik na nakakaapekto sa mga mikroorganismo.
2. Mga salik na kemikal.
3. Biyolohikal na mga salik.
4. Isterilisasyon.
5. Ang kakayahang umangkop ng mga mikroorganismo sa masamang salik sa kapaligiran.
Konklusyon.
Mga tanong para sa pagpipigil sa sarili
Panitikan
1., Burlakova G. I., sinasanay ni Shaikova ang mga mag-aaral sa disiplina na "Microbiology" na may mga gawain sa pagsusulit: Textbook. - M .: FGOU VPO MGAVMiB, 2008.
2., Rodionova // Mga rekomendasyong metodolohikal para sa pag-aaral ng disiplina at pagsasagawa ng independiyenteng gawain para sa mga mag-aaral ng faculty ng veterinary medicine na full-time, part-time at part-time na edukasyon.- M .: FGOU VPO MGAVMiB.- 2008.
3., Gosmanov microbiology at immunology: Textbook.- M.: KolosS.- 2006.
4., Skorodumov tikum sa beterinaryo microbiology.- M.: KolosS.- 2008.
5. Pozdeev microbiology: Textbook para sa mga unibersidad.- M.: Geotar-Med.- 2001.
6., Bannikova morphology ng mga populasyon ng pathogenic bacteria.- M.: Kolos. 2007.
Panimula
Ang buhay ng mga microorganism ay malapit na umaasa sa mga kondisyon sa kapaligiran, kaya ang mga microorganism ay dapat na patuloy na umangkop dito.
Ang parehong mga tao, hayop at halaman, pati na rin ang mga mikroorganismo, ay lubos na naiimpluwensyahan ng iba't ibang mga kadahilanan sa kapaligiran. Maaari silang nahahati sa tatlong grupo: pisikal, kemikal at biyolohikal.
Mga kadahilanan sa kapaligiran na antimicrobial |
Pisikal | Kemikal | Biyolohikal |
Ang mga resulta ng pagkilos ng mga kadahilanan sa kapaligiran sa mga microorganism:
1. Paborable.
2. Hindi kanais-nais (bacteriostatic at bactericidal action).
3. Pagbabago ng mga katangian ng mga mikroorganismo.
4. Walang pakialam.
Ang mga salik sa kapaligiran na antimicrobial ay ginagamit sa isterilisasyon, pagdidisimpekta, paggamot, asepsis at antisepsis, atbp.
1. Mga pisikal na salik na nakakaapekto sa mga mikroorganismo
Sa mga pisikal na kadahilanan, ang pinakamalaking impluwensya sa mga microorganism ay ibinibigay ng:
1. Temperatura.
2. Pagpapatuyo (lyophilization).
3. Radiant energy (enerhiya ng microwave, ultraviolet ray, ionizing radiation).
4. Ultrasound.
5. Presyon (atmospheric, hydrostatic, osmotic).
6. Kuryente.
7. Kaasiman ng kapaligiran (pH ng kapaligiran).
8. Ang pagkakaroon ng oxygen.
9. Humidity at lagkit ng tirahan.
Temperatura - isa sa pinakamakapangyarihang salik na nakakaimpluwensya sa mga mikroorganismo. Sila ay maaaring mabuhay o mamatay, o umangkop at lumalaki.
Mga epekto ng temperatura sa bakterya:
1. Ang kakayahan ng mga microorganism na mabuhay pagkatapos ng mahabang pananatili sa matinding kondisyon ng temperatura.
2. Ang kakayahan ng mga microorganism na lumaki sa ilalim ng matinding kondisyon ng temperatura.
Ang mahahalagang aktibidad ng bawat mikroorganismo ay nililimitahan ng ilang partikular na limitasyon sa temperatura.
Ang pagdepende sa temperatura na ito ay karaniwang ipinahayag na may tatlong puntos:
§ minimum (min) na temperatura - sa ibaba kung saan humihinto ang pagpaparami;
§ pinakamainam (opt) temperatura - ang pinakamahusay na temperatura para sa paglago at pag-unlad ng mga microorganism;
§ maximum (max) na temperatura - ang temperatura kung saan bumagal o tuluyang huminto ang paglaki ng cell.
Ang pinakamabuting kalagayan na temperatura ay karaniwang katumbas ng temperatura sa paligid.
Ang lahat ng mga microorganism na may kaugnayan sa temperatura ay maaaring kondisyon na nahahati sa 3 grupo: psychrophiles, mesophylls, thermophiles.
Mga saprophyte
Yersinia
Pseudomonas
Klebsiella
Listeria at iba pa.
Ang pinakamainam na temperatura para sa paglaki at pagpaparami ng mga psychrophile
Mga Psychrophile ay mga microorganism na mapagmahal sa malamig na lumalaki sa mababang temperatura: min t - 0°C, opt t - mula 10-20°C, max t - hanggang 35°C. Kasama sa mga microorganism na ito ang mga naninirahan sa hilagang dagat at mga reservoir, pati na rin ang ilang mga pathogen bacteria - ang mga sanhi ng ahente ng yersiniosis, pseudomonosis, klebsiellosis, listeriosis, atbp.
Sa pagkilos ng mababang temperatura, maraming mga microorganism ang napaka-lumalaban. Halimbawa, Listeria, Vibrio cholerae, ilang uri ng Pseudomonas atrobacter ay maaaring maimbak sa yelo nang mahabang panahon nang hindi nawawala ang kanilang kakayahang mabuhay.
Ang ilang mga microorganism ay maaaring makatiis ng mga temperatura hanggang sa minus 190°C, habang ang mga bacterial spores ay maaaring makatiis ng mga temperatura hanggang sa minus 250°C. Ang epekto ng mababang temperatura ay humihinto sa mga proseso ng putrefactive at fermentation, kaya gumagamit kami ng mga refrigerator sa pang-araw-araw na buhay.
Sa mababang temperatura, ang mga microorganism ay nahuhulog sa isang estado ng nasuspinde na animation, kung saan ang lahat ng mahahalagang proseso sa cell ay bumagal. Gayunpaman, marami sa mga psychrophile ang may kakayahang mabilis na magdulot ng pagkasira ng microbial ng pagkain at feed na nakaimbak sa 0°C.
Karamihan sa mga pathogenic at oportunistikong microorganism
Ang pinakamainam na temperatura para sa paglago at pagpaparami ng mga mesophile
mesophile- ito ang pinakamalawak na pangkat ng mga bakterya, na kinabibilangan ng mga saprophyte at halos lahat ng mga pathogenic microorganism, dahil ang opt na temperatura para sa kanila ay 37°C (temperatura ng katawan), min t - 10°C, max t - 50°C.
Mga Thermophile- bacteria na mapagmahal sa init, nabubuo sa mga temperaturang higit sa 55°C, min t para sa kanila - 40°C, max t - hanggang 100°C. Ang mga microorganism na ito ay nabubuhay pangunahin sa mga hot spring. Sa mga thermophile, mayroong maraming mga spore form (B. stearothermophilus. B. aerothermophilus) at anaerobes.
https://pandia.ru/text/78/203/images/image006_13.jpg" width="335 height=140" height="140">
Mga vegetative na anyo ng spores
Mga saklaw ng temperatura ng pagkamatay ng mga microorganism
Ang mga bacterial spores ay mas lumalaban sa mataas na temperatura kaysa sa mga vegetative form ng bacteria. Halimbawa, ang mga spore ng anthrax bacilli ay makatiis na kumukulo ng 2 oras.
Ang lahat ng mga microorganism, kabilang ang mga spore, ay namamatay sa temperatura na 165-170°C sa loob ng 1 oras.
Ang pagkilos ng mataas na temperatura sa mga microorganism ay ang batayan ng isterilisasyon.
pagpapatuyo. Ang tubig ay mahalaga para sa normal na paggana ng mga microorganism. Ang pagpapatayo ay humahantong sa pag-aalis ng tubig ng cytoplasm at pagkagambala sa integridad ng cytoplasmic membrane, na humahantong sa pagkamatay ng cell.
Ang ilang mga microorganism (maraming uri ng cocci) sa ilalim ng impluwensya ng pagpapatuyo ay namamatay pagkalipas ng ilang minuto.
Ang mas lumalaban sa pagpapatuyo ay ang mga sanhi ng tuberculosis, na maaaring manatiling mabubuhay hanggang 9 na buwan, pati na rin ang mga capsular form ng bacteria.
Ang mga spores ay partikular na lumalaban sa pagkatuyo. Halimbawa, ang mga anthrax spores ay maaaring mabuhay sa lupa nang higit sa 100 taon.
Para sa pag-iimbak ng mga microorganism sa mga museo ng microbial culture at ang paggawa ng mga dry vaccine na paghahanda mula sa bakterya, ang pamamaraan freeze drying.
Ang kakanyahan ng pamamaraan ay nakasalalay sa katotohanan na sa mga freeze-dryer - lyophilizers, ang mga microorganism ay unang nagyelo at pagkatapos ay pinatuyo sa isang positibong temperatura sa ilalim ng vacuum. Kasabay nito, ang cytoplasm ng bakterya ay nagyeyelo at nagiging yelo, at pagkatapos ang yelo na ito ay sumingaw at ang cell ay nananatiling buhay (ang paglipat ng tubig mula sa isang nagyelo na estado hanggang sa isang gas na estado, na lumalampas sa likidong yugto - pangingimbabaw).
frozen bacteria (akohakbang sa pag-freeze ng pagpapatayo)
Pagbuo ng extracellular(a) at intracellular(b) yelo sa panahon ng freeze drying ng bacteria
I-freeze ang pinatuyong diplococci
Sa wastong freeze drying, ang mga microbial cell ay pumapasok sa isang estado ng suspendido na animation at pinapanatili ang kanilang mga biological na katangian sa loob ng ilang taon.
Live na pinatuyo ng Lifil(a) at patay(b) bakterya
Kung ang rehimen ng freeze-drying ay hindi sinusunod (at ito ay naiiba para sa iba't ibang uri ng bakterya), pagkatapos ay ang cell wall ng bakterya ay masira at sila ay mamatay.
nagniningning na enerhiya. Mayroong iba't ibang anyo ng nagliliwanag na enerhiya, na nailalarawan sa pamamagitan ng iba't ibang mga katangian, lakas at likas na katangian ng pagkilos sa mga mikroorganismo.
Sa kalikasan, ang mga bacterial cell ay patuloy na nakalantad sa solar radiation.
Ang direktang sikat ng araw ay may masamang epekto sa mga microorganism. Ito ay tumutukoy sa ultraviolet spectrum ng sikat ng araw (UV rays).
Mga halaman Photosynthesis Phototropism photoperiodism | bakterya Phototaxis Mga mutasyon bactericidal aksyon | Hayop at tao Photoerythema Photodynamics |
Dahil sa mataas na aktibidad ng kemikal at biyolohikal na likas sa mga sinag ng UV, nagiging sanhi sila ng hindi aktibo na mga enzyme sa mga mikroorganismo, pamumuo ng mga protina, sirain ang DNA, na nagreresulta sa pagkamatay ng cell. Sa kasong ito, tanging ang ibabaw lamang ng mga na-irradiated na bagay ang nadidisimpekta dahil sa mababang lakas ng pagtagos ng mga sinag na ito.
Ang mga pathogen bacteria ay mas sensitibo sa pagkilos ng UV rays kaysa saprophytes, samakatuwid, sa bacteriological laboratoryo, ang mga microorganism ay lumaki at nakaimbak sa dilim.
Ipinapakita ng karanasan ni Buchner kung gaano nakakapinsala ang mga sinag ng UV sa bakterya: ang isang Petri dish na may siksik na daluyan ay inihahasik ng tuluy-tuloy na damuhan. Ang bahagi ng paghahasik ay natatakpan ng papel, at ang Petri dish ay inilalagay sa araw, at pagkatapos ng ilang sandali (15-30 minuto) ito ay inilagay sa isang termostat.
Sibol lamang ang mga mikroorganismo na nasa ilalim ng papel. Samakatuwid, ang kahalagahan ng sikat ng araw para sa pagdidisimpekta sa kapaligiran ay napakataas.
Ginagamit para sa mga layuning ito, ang mga device na naglalabas ng ultrasound ay tinatawag na ultrasonic disintegrators (US).
Mataas na presyon. Ang mga bakterya, at lalo na ang mga spores, ay napaka-lumalaban sa mataas na atmospheric o hydrostatic pressure (barophilic microorganisms). Sa kalikasan, may mga bakterya na naninirahan sa mga dagat at karagatan sa lalim ng m sa ilalim ng presyon mula 100 hanggang 900 atm. Ang mga bacteria na ito ay saprophytic at nabibilang sa archaea.
Ang mga bakterya ay nagpaparaya sa presyon ng atm, at mga spores ng bakterya - hanggang sa 20,000 atm. Sa ganoong mataas na presyon, ang aktibidad ng bacterial enzymes at toxins ay nabawasan.
Ang pinagsamang pagkilos ng mataas na temperatura at mataas na presyon ay ginagamit sa mga steam sterilizer (autoclaves) para sa steam sterilization sa ilalim ng pressure.
Ang isang mahalagang kadahilanan ay intracellular osmotic pressure sa iba't ibang microorganism.
Impluwensya ng osmotic pressure sa isang microbial cell:
1. Ang plasmolysis (pagkawala ng tubig at pagkamatay ng cell) ay nangyayari sa mga microorganism kung sila ay inilalagay sa isang kapaligiran na may mas mataas na osmotic pressure.
2. Plasmoptisis (pagpasok ng tubig sa cell at pagkalagot ng cell wall) - nangyayari sa mga microorganism kapag lumipat sila sa isang kapaligiran na may mababang osmotic pressure.
https://pandia.ru/text/78/203/images/image034.jpg" width="219" height="142">Hydrogen" href="/text/category/vodorod/" rel="bookmark"> mga ion ng hydrogen .
Para sa mga acidophile, ang pinakamainam na pH para sa buhay ay -6.0-7.0; para sa alkaliphiles - 9.0-10.0; para sa mga neutralophile - 7.5.
Ang halaga ng pH ay may malaking epekto sa synthesis ng isang partikular na metabolite.
Sa ilang mga kaso, ang pinakamabuting kalagayan para sa paglago ng kultura at pagbuo ng produkto ay hindi pareho. Habang tumataas ang temperatura ng paglilinang, lumiliit ang saklaw ng mga pinahihintulutang halaga ng pH.
Katamtamang lagkit tinutukoy ang diffusion ng nutrients mula sa volume ng medium hanggang sa ibabaw ng cell.
2. Mga salik na kemikal
Nabatid na ang mga pagbabago sa komposisyon at konsentrasyon ng mga sustansya sa nutrient medium ay maaaring makapagpabagal, huminto o makapagpasigla sa paglaki at pagpaparami ng populasyon ng bakterya. Samakatuwid, ang mga kadahilanan ng kemikal ay maaaring makaapekto sa mahahalagang aktibidad ng mga microorganism.
Ang antas ng epekto ng isang kemikal na ahente sa isang microorganism ay maaaring iba. Depende ito sa compound ng kemikal, konsentrasyon nito, tagal ng pagkakalantad, pati na rin sa mga indibidwal na katangian ng microorganism.
Aksyon ng bacterial ay naitala kung ang kemikal na sangkap ay pumipigil sa pagpaparami ng bakterya, at pagkatapos ng pagtanggal nito, ang proseso ng pagpaparami ay naibalik.
Aksyon ng bacterial nagiging sanhi ng hindi maibabalik na pagkamatay ng mga mikroorganismo.
Ang ilang mga kemikal ay walang malasakit sa bakterya, ang iba ay maaaring pasiglahin ang kanilang mga proseso ng pag-unlad o maging pagkain para sa bakterya. Halimbawa, ang asin NaCl ay idinagdag sa maliit na halaga sa nutrient media.
Ang mga kemikal na maaaring magkaroon ng bactericidal effect sa iba't ibang grupo ng mga microorganism ay ginagamit upang pagdidisimpekta.
Pagdidisimpekta(pagkasira ng impeksyon, pagdidisimpekta ng mga bagay sa kapaligiran) ay isang hanay ng mga hakbang na naglalayong sirain ang mga pathogen ng mga nakakahawang sakit sa kapaligiran.
Sa ibang salita, pagdidisimpekta- ito ang pagkasira ng mga pathogenic microorganism sa panlabas na kapaligiran sa tulong ng mga kemikal na may antimicrobial effect.
Ang mga kemikal na kumikilos sa mga mikroorganismo ay kinabibilangan ng:
1. Mga ahente ng oxidizing.
2. Mga surfactant.
3. Halogens.
4. Mga asin ng mabibigat na metal.
5. Mga asido.
6. Alkalis.
7. Alak.
8. Phenols, cresols at mga derivatives nito.
9. Aldehydes (formaldehyde, formalin).
10. Mga tina.
Sa pamamagitan ng mekanismo ng pagkilos na antimicrobial Ang lahat ng mga kemikal ay nahahati sa 5 klase:
1. Denaturing proteins - coagulate at fold proteins.
2. Saponifying proteins - humantong sa pamamaga at pagkatunaw ng mga protina.
3. Oxidizing proteins - makapinsala sa sulfhydryl group ng mga aktibong protina.
4. Reaktibo sa mga grupo ng pospeyt ng mga nucleic acid.
5. Surfactants - nagdudulot ng pinsala sa cell wall.
Mga Denaturant:
§ phenol, cresol at ang kanilang mga derivatives - ang bactericidal action ay nauugnay sa pinsala sa cell wall at denaturation ng cytoplasmic proteins;
§ formaldehyde - pagkilos ng bactericidal dahil sa pag-aalis ng tubig ng mga layer sa ibabaw at denaturation ng protina;
§ alkohol - pagkilos ng bactericidal dahil sa kakayahang mag-alis ng tubig at mag-coagulate ng mga protina;
§ heavy metal salts (sublimate, mertiolate, salts of mercury, silver, zinc, lead, copper) - ang mga positibong sisingilin na mga metal ions ay na-adsorbed sa negatibong sisingilin na ibabaw ng bakterya at binabago ang permeability ng kanilang cytoplasmic membrane, habang binabago ang istraktura ng respiratory enzymes at i-uncoupling ang mga proseso ng oksihenasyon at phosphorylation sa mitochondria.
Nagsabon ng mga protina - alkalis, slaked lime.
Oxidizing protina(chlorine, bromine, yodo-containing, hydrogen peroxide, potassium permanganate) - naglalabas ng aktibong atomic oxygen, na nagiging sanhi ng chain reaction ng free radical lipid peroxidation, na humahantong sa pagkasira ng mga lamad at protina ng mga microorganism.
Mga surfactant(mga fatty acid, sabon, detergent, detergent) - baguhin ang ratio ng enerhiya ng ibabaw ng microbial cell (nagbabago ang singil mula negatibo patungo sa positibo), na nakakagambala sa permeability at osmotic na balanse.
Halogens(naglalaman ng chlorine: bleach, chloramine B, dichlor-1, sulfochloranthin, chlorcin, atbp.; naglalaman ng iodine: solusyon sa alkohol ng yodo, iodinol, iodoform, solusyon ng Lugol, atbp.) - sirain ang mga istrukturang enzymatic ng bacterial cell, pinipigilan ang hydrolytic at dehydrogenase na aktibidad ng bakterya, inactivate ang mga enzyme tulad ng amylases at protease, denature cytoplasmic proteins, at naglalabas ng atomic oxygen, na may epekto sa oxidizing sa mga microorganism.
Mga tina(makikinang na berde, rivanol, tripoflavin, methylene blue) - may kaugnayan sa mga pangkat ng phosphoric acid ng mga nucleic acid at nakakagambala sa proseso ng paghahati ng bakterya. Maraming mga tina ang ginagamit bilang bahagi ng antiseptics.
Bactericidal effect mga acid(salicylic, boric) at alkalis(caustic soda) sa mga mikroorganismo ay sanhi ng:
§ dehydration ng mga microorganism;
§ pagbabago sa pH ng medium;
§ ang pagbuo ng acid at alkaline albuminates.
Isang bagong henerasyon ng mga disinfectant - Quaternary ammonium compounds (QAC) at ang kanilang mga asin.
Ang isa sa mga pinaka-epektibong disinfectant ngayon ay ang Veltolen - isang likidong concentrate batay sa isang natatanging domestic, patented na substance na "Velton" (CHAS clathrate na may urea).
Ang Veltolen ay may bactericidal, fungicidal, sporulicidal at virucidal effect sa mababang konsentrasyon, hindi nakakapinsala sa mga hayop at tao, at environment friendly.
Mga mekanismo ng antimicrobial na aksyon ng Veltolen
Antimicrobial effect ng isang 0.5% na solusyon ng Veltolen sa anthrax pathogen B. anthracis sa pagkakalantad ng 5 minuto. nagiging sanhi ng vacuolization ng cytoplasm ng bacteria at exfoliation ng cell wall.
saB.anthracissa isang exposure ng 5 min.
Antimicrobial effect ng isang 0.5% na solusyon ng Veltolen sa Siberian pathogen sa pagkakalantad ng 15 minuto. nagiging sanhi ng pag-exfoliation ng cell wall, pagkalagot nito at vacuolization ng cytoplasm.
Antimicrobial action ng 0.5% Veltolen solution
saB.anthracissa isang exposure ng 15 min.
Antimicrobial effect ng isang 0.5% na solusyon ng Veltolen sa Siberian pathogen sa pagkakalantad ng 60 minuto. nagiging sanhi ng pagkasira ng karamihan sa mga bacterial cell na may pagkawala ng cell wall at paglabas ng cellular debris. Ang ilan sa mga spores sa ilalim ng pagkilos ng Veltolen ay bumubuo ng mga numero ng myelin.
Antimicrobial action ng 0.5% Veltolen solution
saB.anthracissa isang exposure ng 60 min.
Ang aktibidad ng iba't ibang mga disinfectant ay hindi pareho at depende sa oras ng pagkakalantad, konsentrasyon, temperatura ng mga solusyon sa disinfectant at sa kapaligiran.
Ang pagdidisimpekta sa tulong ng mga kemikal bilang isang bahagi ay kasama sa isang hanay ng mga hakbang na naglalayong sirain ang mga microorganism hindi lamang sa kapaligiran, kundi pati na rin sa macroorganism, halimbawa, sa isang sugat, at ang batayan ng asepsis at antisepsis.
Asepsis ay isang hanay ng mga hakbang sa pag-iwas na naglalayong pigilan ang pagpasok ng mga mikroorganismo sa sugat o katawan ng isang tao at isang hayop.
Mga antiseptiko- ito ay isang hanay ng mga hakbang na naglalayong sirain ang mga microorganism sa sugat o sa katawan sa kabuuan, upang maiwasan at maalis ang nagpapasiklab na proseso.
Mga antiseptiko ay mga antimicrobial substance na ginagamit upang disimpektahin ang mga biological surface.
Kasama sa mga antiseptic na kemikal ang mga tina (methylene blue, brilliant green) - mayroon silang denaturing at lytic effect, at mga derivatives ng 8-hydroxy-quinoline (quinosol, nitroxalin, quinolone) at nitrofuran (furatsilin, furazolidone), na nakakagambala sa biosynthetic at enzymatic na proseso sa ang bacterial cell.
3. Biyolohikal na mga salik
Upang biological na mga kadahilanan, negatibong nakakaapekto sa mga mikroorganismo, kasama ang:
§ microorganisms-antagonists;
§ probiotics;
§ bacteriophage;
§ proteksiyon na mga kadahilanan ng katawan (cellular at humoral).
Sa panlabas na kapaligiran at sa katawan ng mga tao at hayop, mayroong isang malaking bilang ng iba't ibang uri ng mga microorganism na nakikipag-ugnayan sa isa't isa sa iba't ibang paraan.
bakterya ng lactic acid
Predation Isang pag-atake ng isang species ng bakterya sa isa pa upang magamit ang iba pang mga species bilang pagkain.
https://pandia.ru/text/78/203/images/image049.jpg" width="302" height="201"> 
Bdellovibrio bacteriovorustumagos sa salmonella
Neutralismo- Ang mga mikroorganismo ay walang anumang epekto sa isa't isa.
Ang pinakamalaking interes sa agham at pagsasanay ay ang iba't ibang biologically active substance na nabuo sa panahon ng buhay ng mga microorganism, at isa sa mga ito ay antibiotics.
Mga antibiotic- mga produktong metabolic ng mga nabubuhay na organismo o ang kanilang mga analogue na nakuha sa synthetically, na may kakayahang piliing pumipigil sa paglaki ng mga microorganism.
Ang terminong "antibiotic" ay iminungkahi ni V. Vuimen noong 1889 upang italaga ang aktibong ahente ng proseso ng "antibiosis", iyon ay, ang paglaban na ginagawa ng isang buhay na organismo sa isa pa.
Noong 1929, natuklasan ni A. Fleming ang penicillin, na noong 1940 ay nakahiwalay sa mala-kristal na anyo.
Ang mekanismo ng pagkilos ng mga antibiotics sa bakterya
Pag-uuri ng mga antibiotics
Ayon sa biyolohikal pinagmulan | Ayon sa mekanismo ng biological action | Ayon sa spectrum ng biological kanino aksyon | Sa pamamagitan ng kemikal na istraktura |
eubacteria Genus Pseudomo-nas: pyocyanin, viscosine. | Pinipigilan ang synthesis ng cell wall (penicillins, cephalosporins) | Makitid na spectrum (penicillins, cephalosporins) | Mga acyclic compound (mycosamine, pyrosamine) |
actinomycetes Genus Streptomyces: tetracyclines, streptomycins, erythromycin. Genus Micromono-spora: gentamicin, sisomycin. | Lumalabag sa pag-andar ng mga lamad (nystatin, candicidin) | Malawak na spectrum (tetracyclines, chloramphenicol, gentamicin, tobramycin) | Alicyclic compounds (actidion, thuic acid). Tetracyclines |
cyanobacteria (malingolide) | Pinipigilan ang RNA synthesis (kanamycin, neomycin) at DNA synthesis (actidion, edein) | Anti-tuberculosis (streptomycin, kanamycin) | Mga mabangong compound (gallic acid, chloramphenicol). |
Mga kabute (penicillins) | Purine at pyrimidine synthesis inhibitors (azaserine) | Mga antifungal (nystatin, candicin) | Mga heterocyclic compound na naglalaman ng oxygen (penicillic acid, carlin oxide) |
Mga lichen, halaman, algae(usnic acid, chlorellin) | Pinipigilan ang synthesis ng protina (kanamycin, tetracyclines, erythromycin, chloramphenicol) | Antitumor (adriamycin) | macrolides (erythromycin) |
Pinagmulan ng hayop (interferon, ecmolin) | Mga inhibitor sa paghinga (usnic acid, pyocyanin). Oxidative phosphorylation inhibitors (valinomycin, oligomycin) | Antiamebic (fumagillin) | Aminoglycosides (tobramycin, gentamicin, streptomycins). Polypeptides (gramicidins) |
"Pearl necklace phenomenon" sa causative agent ng anthrax kapag lumaki sa isang nutrient medium na may penicillin
Bilang resulta ng pagkilos ng penicillin sa B. anthracis, ang cell wall ng pathogen ay nawasak, ang mga spherical protoplast ay nabuo, na magkakaugnay sa anyo ng isang string ng mga kuwintas.
Ang penicillin ay maaaring maging sanhi ng pagkasira ng cell wall sa maraming uri ng bacteria. Hanggang kamakailan lamang, ang staphylococci at streptococci ay lalong sensitibo dito.
Karamihan sa mga gramo-negatibong bakterya ay nakabuo ng resistensya sa penicillin dahil sa kanilang kakayahang mag-synthesize ng enzyme penicillinase, na sumisira sa penicillin.
https://pandia.ru/text/78/203/images/image055.jpg" width="204" height="169">.jpg" width="224" height="168">DIV_ADBLOCK169">
Mga posibleng mekanismo ng pagkilos ng probiotics:
1. Pagpigil sa mga live na pathogenic at oportunistikong microorganism.
a) paggawa ng mga antibacterial substance - bacteriocins;
b) kumpetisyon para sa mga mapagkukunan ng pagkain;
c) kumpetisyon para sa mga adhesion receptor.
2. Epekto sa microbial antagonism.
a) pagbaba sa aktibidad ng enzymatic;
b) pagtaas sa aktibidad ng enzymatic.
3. Pagpapasigla ng kaligtasan sa sakit.
b) pagtaas sa aktibidad ng macrophage.
Mga paghahanda ng probiotic na ginawa sa mga bansa -
Member States at ang mga uri ng microorganism na ginagamit sa kanila
Isang gamot | Uri ng mga mikroorganismo |
Liquid acidophilus na gatas, mga produktong klase ng yoghurt (laganap) | L. acidophilus, B. bifidum, B. longum |
Biograd, Bifiyogurt Yoga-Line, Laktopriv, Eugalin, Vitacidophilus, Omniflora Mutaflor, Kolivit, Symbioflor, Lactana-B (Germany) | L. acidophilus, S. thermophilus, B. longum, B. bifidum, E. coli |
Gefilak, Baktolak (Finland) | L. rhamnosum, L. casei, S. faecium |
Yocult, Bifider, Toyocerin, Lakris, Graugen, Kalsporin, Miarizan, Korolak, Biofermin, Balantol, Lactofed (Japan) | L. rhamnosum, L. casei, E. coli, B. cereus, L. sporo-genes, B. subtilis, B. thermophilus, C. butyricum, B. pseudolongum, S. faecalis, L. acidophilus, B. toyo |
Biokos (Czech Republic) | B. bifidum, L. acidophilus, P. acidilactis |
Sinelak, Ortobacter, Bifidigen, Liobifidus, Probiomin, Normoflor, Biolactal (France) | L. bulgaricus, L. acidophilus, B. longum E. coli, S. thermophilus, B. bifidum |
Infloran (Switzerland) | S. thermophilus, L. bulgaricus, L. acidophilus |
Pioneer (Spain) | Kumplikado ng bituka microflora |
Ventrax ocido (Sweden) | L. acidophilus, S. faecium, S. thermophilus |
Gastrofarm, Normoflor (Bulgaria) | L. acidophilus, L. bulgaricus |
Bio-Plus2 (Germany, Denmark) | B. subtilis, B. licheniformis |
Proteksin, Pripalak (Holland) | |
Baktisubtil (Yugoslavia) | |
Acid Pak 4 Way, Lacto Sak (USA) | S. thermophilus, L. acidophilus |
Bilang karagdagan sa mga nakalistang uri ng bacteria, ang Saccaharomyces cerevisiae, Candida pintolopesii, Aspergillus niger at Aspergillus orysae ay ginagamit bilang bahagi ng probiotics para sa mga hayop sa ilang bansa.
Ang lactic acid bacteria na malawakang ginagamit para sa produksyon ng mga probiotics ay kinabibilangan ng lactic acid streptococci (S. lactis at S. cremoris) at lactobacilli (L. acidophilum, L. casei, L. plantarum, L. bulgaricum).
Metabolites ng lactic acid bacteria at ang kanilang mga regulatory function
Mekanismo ng pagkilos | Biological na epekto |
lactic acid |
|
Synergy na kumbinasyon sa acetic, propionic, butyric acids. Synthesis ng intra- at extracellular lactoferrin. | Pagpigil sa paglaki ng mga pathogenic microorganism. Nabawasan ang synthesis ng mga lason sa mga amag ng pagkain. |
Carbon dioxide |
|
Panatilihin ang anaerobic na kondisyon at mataas na partial pressure. | Nabawasan ang potensyal sa paghinga sa aerobic intestinal bacteria. |
Hydrogen peroxide |
|
Ang pagbuo ng hypothiocyanate sa bakterya. Pagkaubos ng sistema ng enzyme sa mga microorganism na umaasa sa catalase. Hindi aktibo ng cellular enzymes. | Nakakalason na epekto sa catalase-positive microflora. Nabawasan ang synthesis ng protina, limitadong paghahatid ng genetic na impormasyon, nabawasan ang mga kadahilanan ng pagdirikit sa Gram-negative na bakterya. |
Pagbubuklod ng anti-lysozyme factor sa enteropathogenic bacteria. Lysis ng bacterial cell wall. | Nadagdagang aktibidad ng phagocytic ng macrophage. Nabawasan ang aktibidad ng kolonisasyon sa Gram-negative bacteria. Nonspecific stimulation ng macrophage. |
Bacteriocins |
|
Paghihigpit ng synthesis ng protina. Paglabag sa mga proseso ng transportasyon sa pamamagitan ng lamad ng cell, isang pagbawas sa synthesis ng DNA, compaction ng nuclear material, mga pagbabago sa ribosomes at lysosomes. | Bactericidal at bacteriostatic action. Pagpigil sa mga proseso ng paghahati ng bakterya, paglabag sa paghahatid ng namamana na impormasyon. Pagkasira ng mga bono ng receptor. |
Sa Russia, ang mga purong kultura ng lactic acid bacteria ay ginamit mula noong 1890. Ang isang mahusay na kontribusyon sa pagbuo ng mga pamamaraan para sa paghahanda ng mga purong kultura, pag-iingat sa kanila sa isang tuyo na anyo at paggamit ng mga ito sa paggawa ng mga produktong fermented na gatas ay ginawa ni at.
Dry heat sterilization- isinasagawa sa Pasteur ovens (dry oven). Isa itong double-walled cabinet na gawa sa metal at asbestos, pinainit ng kuryente at nilagyan ng thermometer. Ang tuyo na init ay pangunahing nag-isterilize ng mga kagamitang babasagin sa laboratoryo. Ang pagdidisimpekta ng materyal sa loob nito ay nangyayari sa 160°C sa loob ng 1 oras.
Sa mga bacteriological laboratories, ang ganitong uri ng isterilisasyon ay ginagamit, tulad ng calcination sa ibabaw ng apoy (flombing). Ang pamamaraang ito ay ginagamit para sa pagdidisimpekta ng mga bacteriological loop, spatula, pipette. Para sa calcination sa ibabaw ng apoy, ginagamit ang mga spirit lamp o gas burner.
Upang pisikal na paraan nalalapat din ang isterilisasyon UV rays at x-ray. Ang ganitong isterilisasyon ay isinasagawa sa mga kaso kung saan ang mga bagay na dapat isterilisado ay hindi makatiis sa mataas na temperatura.
Tyndalization(two-stage sterilization) ay ginagamit upang disimpektahin ang materyal na kontaminado ng bacterial spores. Sa kasong ito, dalawang mga mode ng pag-init ng materyal ang ginagamit - ang unang mode ay pinakamainam para sa pagtubo ng mga spores at ang paglipat ng spore form ng bakterya sa isang vegetative, at ang pangalawang mode ay naglalayong sirain ang mga vegetative cells ng mga mikroorganismo.
Mekanikal na isterilisasyon(filter sterilization) - isinasagawa gamit ang mga filter (ceramic, salamin, asbestos) at lalo na ang mga ultrafilter ng lamad mula sa mga colloidal na solusyon ng nitrocellulose.
Morphology" href="/text/category/morfologiya/" rel="bookmark"> morpolohiya (pagbibilog, pagpapahaba ng cell), mga katangiang pangkultura (hindi bumubuo ng pigment ang staphylococci sa kawalan ng oxygen), biochemical o enzymatic na katangian (produksyon ng adaptive enzymes sa Escherichia - enzyme lactase sa isang medium na may lactose.) Sa phenotypic variability, bilang panuntunan, pagkatapos ng isang tiyak na oras ay may pagbabalik sa orihinal na estado ("ang bagong phenotype" ay nawala).
2. Pagbabago ng genotype(minana) - nangyayari bilang resulta ng mutasyon at genetic recombinations. Sa kasong ito, ang pagbabago sa phenotype ay nauugnay sa isang pagbabago sa genotype at ito ay minana. Walang pagbabalik sa orihinal na phenotype.
Mga mutasyon(mula sa Latin mutatio - to change) - ito ay patuloy na minanang mga pagbabago sa istruktura sa mga gene na nauugnay sa muling pagsasaayos ng mga nucleotide sa molekula ng DNA. Sa panahon ng mga mutasyon, nagbabago ang mga bahagi ng mga genome (i.e., ang namamanang kagamitan).
Ang mga bacterial mutations ay maaaring kusang-loob (kusang) at sapilitan (naka-target), iyon ay, lumilitaw ang mga ito bilang resulta ng paggamot ng mga microorganism na may mga espesyal na mutagens (mga kemikal, temperatura, radiation, atbp.).
Ang bacterial mutations ay maaaring magresulta sa:
§ pagbabago sa morphological properties ng microorganisms;
§ pagbabago sa mga katangiang pangkultura;
§ ang paglitaw ng paglaban sa mga gamot sa mga mikroorganismo;
§ pagpapahina ng mga katangian ng pathogen, atbp.
Upang genetic recombinations isama ang mga recombinations ng mga gene na nangyayari bilang resulta ng pagbabago, transduction at conjugation.
Pagbabago Ang paglipat ng genetic material mula sa isang donor bacterium patungo sa isang tatanggap na bacterium gamit ang nakahiwalay na DNA mula sa isa pang cell.
Ang mga bakterya na maaaring tumanggap ng DNA ng isa pang cell ay tinatawag na karampatang.
Ang estado ng kakayahan ay madalas na tumutugma sa yugto ng paglago ng logarithmic.
Para sa pagbabagong-anyo, kinakailangan upang lumikha ng mga espesyal na kondisyon, halimbawa, kapag ang mga inorganikong phosphate ay idinagdag sa nutrient medium, ang dalas ng pagbabagong-anyo ay tumataas.
transduction ay ang paglipat ng namamana na materyal mula sa isang donor bacterium patungo sa isang tatanggap na bacterium ng isang bacteriophage.
Halimbawa, ang bacteriophage ay maaaring magparami ng flagellar transduction, enzymatic properties, antibiotic resistance, toxigenicity, at iba pang mga katangian.
Conjugation- paglipat ng genetic na materyal mula sa isang bacterium patungo sa isa pa sa pamamagitan ng direktang pakikipag-ugnay. Bukod dito, mayroong isang one-way na paglipat ng genetic na materyal - mula sa donor hanggang sa tatanggap. Ang isang paunang kinakailangan para sa conjugation ay ang donor ay may cytoplasmic circular DNA molecule - isang plasmid at isang tiyak na fertility factor F. Ang Gram-negative bacteria ay may sex F-hairs kung saan nangyayari ang paglipat ng genetic material. Ang mga cell na gumaganap ng papel ng isang donor ay itinalagang F +, at ang mga tatanggap - F–-.
3. Intermediate variability - dissociation. Sa isang homogenous na populasyon ng bakterya, lumilitaw ang mga cell ng iba't ibang mga biological na katangian, na bumubuo ng dalawang anyo ng mga kolonya - R (magaspang, may punit na mga gilid, kadalasang nauugnay sa pagkuha ng mga pathogenic na katangian ng bakterya) at S (bilog, makinis, makintab).
Konklusyon
Ang mga mikroorganismo sa panlabas na kapaligiran ay apektado ng isang malaking bilang ng iba't ibang mga salungat na kadahilanan, na ginagawang patuloy silang mapabuti, umangkop at nagbabago.
Ito ay ang hindi kanais-nais na mga kadahilanan sa kapaligiran na siyang nagtutulak na puwersa ng speciation para sa mga microorganism.
Mga tanong para sa pagpipigil sa sarili
1. Ang mga resulta ng pagkilos ng mga salik sa kapaligiran sa mga mikroorganismo.
2. Anong mga pisikal na salik ang may pinakamalaking epekto sa mga mikroorganismo?
3. Ano ang hanay ng temperatura para sa pagpapalaki ng iba't ibang uri ng mikroorganismo?
4. Ano ang kakanyahan ng freeze drying ng mga microorganism?
5. Ilarawan ang karanasan ni Buchner.
6. Kahalagahan ng osmotic pressure para sa bacteria.
7. Anong mga grupo ang inuri ng mga mikroorganismo na may kaugnayan sa konsentrasyon ng mga hydrogen ions sa kapaligiran?
8. Ano ang disinfection at disinfectants?
9. Pag-uuri ng mga kemikal ayon sa mekanismo ng pagkilos na antimicrobial.
10. Ano ang tinatawag na antiseptics?
11. Ilista ang mga biyolohikal na salik na negatibong nakakaapekto sa mga mikroorganismo.
12. Anong relasyon sa pagitan ng bacteria ang nagdudulot ng antagonistic symbiosis?
13. Ano ang mekanismo ng pagkilos ng antibiotics sa bacteria?
14. Pangalanan ang mga posibleng mekanismo ng pagkilos ng probiotics.
15. Anong mga grupo ang nahahati sa mga bacteriophage?
16. Ano ang filter sterilization?
17. Ano ang mga pagkakaiba sa pagitan ng phenotypic at genotypic variability ng bacteria.
Ang mga pangunahing pisikal na kadahilanan na nakakaapekto sa mga microorganism kapwa sa kanilang natural na tirahan at sa mga kondisyon ng laboratoryo ay kinabibilangan ng temperatura, liwanag, kuryente, pagpapatuyo, iba't ibang uri ng radiation, osmotic pressure, atbp.
Temperatura. Ang impluwensya ng temperatura sa mga mikroorganismo ay hinuhusgahan ng kanilang kakayahang lumaki at dumami sa loob ng ilang mga limitasyon ng temperatura. Para sa bawat uri ng mga microorganism, ang pinakamainam na temperatura ng pag-unlad ay tinutukoy. Depende sa mga limitasyon ng temperatura na ito, ang bakterya ay nahahati sa tatlong physiological na grupo:
· Psychrophilic microorganisms (psychrophiles) - ay maaaring lumago at dumami mula 0 0 C hanggang 30 ... 35 0 C, at ang pinakamabuting kalagayan na temperatura ay 15 ... 20 0 C. Kabilang sa mga kinatawan ng pangkat na ito ay ang mga naninirahan sa hilagang dagat, lupa, wastewater.
· Mesophilic bacteria - ay maaaring lumago at dumami sa mga temperatura mula 10 0 C hanggang 40 ... 45 0 C, ang pinakamabuting kalagayan na temperatura ay 30 ... 37 0 C. Ang pinakamalawak na grupo ng mga microorganism, kabilang dito ang karamihan sa mga saprophytes at lahat ng pathogenic mga mikroorganismo.
· Thermophilic bacteria - ay maaaring lumaki at dumami sa hanay ng temperatura mula 35 0 С hanggang 70 ... 75 0 С, ang pinakamabuting kalagayan na temperatura ay 50 ... 60 0 С. tao
· Lubhang thermophilic bacteria - maaaring umiral sa mga temperatura mula 40 hanggang 93 0 C at mas mataas. Ang posibilidad ng pagkakaroon sa mataas na temperatura ay dahil sa espesyal na komposisyon ng mga bahagi ng lipid ng mga lamad ng cell, ang mataas na thermal stability ng mga protina, enzymes at mga istruktura ng cellular.
Iba ang epekto ng mataas at mababang temperatura sa mga mikroorganismo. Sa mababang temperatura, ang cell ay pumapasok sa isang estado ng anabiosis, kung saan maaari itong umiral nang mahabang panahon. Kaya, ang Escherichia ay nananatiling mabubuhay sa -190 0 C hanggang 4 na buwan, ang causative agent ng listeriosis sa -10 0 C hanggang 3 taon. Ang mababang temperatura ay humihinto sa mga proseso ng putrefactive at fermentation. Ang prinsipyong ito ay batay sa pangangalaga ng mga produkto sa mga refrigerator.
Ang mataas na temperatura ay nakakapinsala sa mga mikrobyo. Kung mas mataas ang temperatura, mas maikli ang oras na kinakailangan para sa inactivation ng mga microorganism. Ang epekto ng bactericidal ng mataas na temperatura ay batay sa pagkasira ng mga enzyme dahil sa denaturation ng protina at paglabag sa osmotic barrier.
Ang iba't ibang uri ng mga microorganism ay may iba't ibang paglaban sa mataas na temperatura, ang paglaban ng mga spores at vegetative na mga cell ay makabuluhang naiiba. Kaya, ang karamihan sa mga vegetative form ng pathogenic microorganism ay namamatay sa temperatura na 80...100 0 C sa loob ng 1 minuto, at ang mga anthrax spores ay maaaring makatiis sa pagkulo ng higit sa 1 oras.
Ang pagkilos ng nakikitang radiation (liwanag) .
Nakikita (scattered light), na may wavelength na 300 ... 1000 nm, ay may kakayahang pigilan ang paglaki at mahahalagang aktibidad ng karamihan sa mga microorganism. Kaugnay nito, ang paglilinang ng mga mikroorganismo ay isinasagawa sa dilim. Ang nakikitang liwanag ay may positibong epekto lamang sa bacteria na gumagamit ng liwanag para sa photosynthesis.
Ang direktang sikat ng araw ay kumikilos sa mga mikroorganismo nang mas aktibo kaysa sa diffused light. Ang bactericidal effect ng liwanag ay nauugnay sa pagbuo ng mga hydroxyl radical at iba pang highly reactive substance na sumisira sa mga substance na bumubuo sa cell. Halimbawa, ang mga enzyme ay hindi aktibo.
Ang mga saprophytic microorganism ay mas lumalaban sa liwanag kaysa sa mga pathogen. Ito ay dahil sa ang katunayan na sila, na mas madalas na nakalantad sa direktang sikat ng araw, ay mas inangkop sa kanila. Sa bagay na ito, dapat tandaan ang mahusay na papel sa kalinisan ng sikat ng araw. Ito ay nasa ilalim ng impluwensya ng solar radiation na ang paglilinis sa sarili ng hangin, ang itaas na mga layer ng lupa at tubig ay nangyayari.
Ultraviolet radiation .
Ang ultraviolet radiation na may wavelength na 295 ... 200 nm ay bactericidal active, iyon ay, maaari itong magkaroon ng masamang epekto sa mga microorganism. Ang mekanismo ng pagkilos ng ultraviolet radiation ay nakasalalay sa kakayahan nitong bahagyang o ganap na sugpuin ang pagtitiklop ng DNA at sirain ang mga ribonucleic acid (lalo na ang mRNA).
Ang radiation ng ultraviolet ay malawakang ginagamit para sa sanitasyon ng hangin sa mga gusali ng hayop, laboratoryo, industriyal na workshop, microbiological box. Para sa air disinfection, gumagawa ang industriya ng iba't ibang lamp. Sa pagsasanay sa pag-aalaga ng hayop, ang mga pag-install ng IKUF-1 ay malawakang ginagamit bilang pinagmumulan ng ultraviolet at infrared radiation.
ionizing radiation .
Ang ionizing (X-ray) radiation ay electromagnetic radiation na may wavelength na 0.006 ... 10 nm. Depende sa wavelength, ang gamma radiation, beta radiation at alpha radiation ay nakikilala. Ang gamma radiation ay may pinaka-aktibong epekto sa mga biological na bagay, ngunit kahit na ang mga bactericidal properties nito ay mas mababa kaysa sa bactericidal properties ng ultraviolet radiation. Ang pagkamatay ng bakterya ay nangyayari lamang kapag sila ay na-irradiated na may malalaking dosis mula 45,000 hanggang 280,000 roentgens. Ang ilang mga species ay maaaring mabuhay sa tubig ng mga nuclear reactor, kung saan ang halaga ng radioactive exposure ay umabot sa 2 ... 3 milyong roentgens. Bukod dito, nakuha ang data na ang epekto ng maliliit na dosis ng gamma radiation sa mga pathogenic microorganism ay maaaring mapahusay ang kanilang mga virulent na katangian.
Ang mekanismo ng pagkilos ng X-ray ay upang sirain ang mga istrukturang nuklear, lalo na ang mga nucleic acid ng cytoplasm, na humahantong sa pagkamatay ng isang microbial cell o pagbabago sa mga genetic na katangian nito (mutation).
Kuryente.
Ang electric current ng mababa at mataas na dalas ay sumisira sa mga mikroorganismo. Ang mga ultra-high frequency na alon ay may partikular na malakas na bactericidal effect. Pina-vibrate nila ang mga molekula ng lahat ng elemento ng cell, bilang isang resulta kung saan mayroong isang mabilis at pare-parehong pag-init ng buong masa ng cell, anuman ang temperatura sa paligid. Bilang karagdagan, natagpuan na ang matagal na pagkakalantad sa mga high-frequency na alon ay humahantong sa electrophoresis ng ilang bahagi ng nutrient medium. Ang mga resultang compound ay hindi aktibo ang microbial cell.
Ultrasound.
Ang mekanismo ng pagkilos ng bactericidal ng ultrasound (mga alon na may dalas na 20,000 Hz) ay ang isang cavitation na lukab ay nabuo sa cytoplasm ng mga microorganism sa isang likidong daluyan, na puno ng likidong singaw, ang presyon ay lumitaw sa bula, na humahantong sa ang pagkawatak-watak ng mga istruktura ng cytoplasmic. Ang ultratunog ay ginagamit upang isterilisado ang pagkain at disimpektahin ang mga bagay.
Aeroionization.
Ang mga air ion na may positibo o negatibong singil ay lumalabas sa hangin sa panahon ng artipisyal o natural na ionization. Ang mga negatibong sisingilin na ion ay may pinakamalaking epekto sa bakterya, na kumikilos na sa mga katamtamang konsentrasyon (5 * 10 4 sa 1 cm 3 ng hangin). Ang mga positibong sisingilin na ion ay may hindi gaanong binibigkas na bactericidal na epekto, nagagawa nilang pigilan ang paglaki at pag-unlad ng mga microorganism lamang sa mataas na konsentrasyon (10 6 sa 1 cm 3 ng hangin). Ang lakas ng mga ion ng hangin ay nakasalalay sa kanilang konsentrasyon, tagal ng pagkakalantad at distansya mula sa pinagmulan. Ang mga air ions ay ginagamit para sa pagdidisimpekta ng hangin ng mga lugar ng tirahan, mga workshop ng mga negosyo, mga institusyong medikal.
Halos lahat ng mga kadahilanan ng pisikal na impluwensya sa mga microorganism ay maaaring gamitin para sa layunin ng isterilisasyon. Ang sterilization ay ang pagkasira ng pathogenic at non-pathogenic microorganisms, ang kanilang mga vegetative at spore form sa anumang bagay. Isinasailalim ang sterilization sa nutrient media, glassware, instrumento, dressing, gown. Ang sterilization ay sumasailalim din sa hangin at mga bagay sa mga microbiological box.
Ang mekanismo ng pagkilos ng iba't ibang mga pamamaraan ng isterilisasyon ay hindi pareho, ngunit ang bawat isa ay batay sa kakayahang makagambala sa mga mahahalagang proseso ng isang microbial cell (denaturasyon ng mga protina, pagsugpo sa pag-andar ng mga sistema ng enzyme).
Mga pamamaraan ng pisikal na isterilisasyon:
1. Pag-aapoy (nagniningas). Ang mga bagay na metal ay nakalantad (mga loop, karayom, scalpel, gunting, spatula).
2. Isterilisasyon sa pamamagitan ng pagpapakulo. Ang pagkulo ay nagpapasterilize ng mga karayom, hiringgilya, sipit, gunting, scalpel at iba pang mga instrumento, na inilatag sa mga sterilizer sa mga pagsingit ng sala-sala. Ang distilled water ay ibinubuhos sa sterilizer sa isang sapat na halaga upang ganap na masakop ang mga instrumento. 2% sodium bikarbonate ay maaaring idagdag sa tubig. Pakuluan ng 25 - 30 minuto.
3. Dry heat sterilization. Isinasagawa ang sterilization gamit ang dry heated air sa isang double-walled oven (Pasteur oven). Sa labas, ang cabinet ay nilagyan ng materyal na lumalaban sa init. Ang kontrol sa temperatura ay isinasagawa gamit ang isang sensor ng temperatura. Ang malinis at paunang tuyo na babasagin na nakabalot sa papel na parchment ay isterilisado sa oven. Mga mode ng sterilization: 155…160 0 -2 oras; 165…170 0 – 1…1.5 na oras; 180 0 - 1 oras. Ang oras ng pagkakalantad ay nabanggit mula sa sandaling maabot ng temperatura ang itinakdang halaga.
4. isterilisasyon ng singaw. Isinasagawa ang sterilization sa Koch apparatus, na isang sisidlan na may maluwag na saradong takip. Sa ilalim ng aparato ay may isang lattice stand, sa antas kung saan ibinuhos ang tubig. Ang isang sisidlan na may slatted bottom ay inilalagay sa stand, kung saan may mga bagay na dapat isterilisado (nutrient media). Sa panahon ng pagkulo ng tubig, ang mga singaw ay nabuo na nagpapainit sa mga nilalaman ng sisidlan. Oras ng isterilisasyon - 30 ... 40 minuto. Ang solong isterilisasyon ay sumisira lamang sa mga vegetative na anyo ng bakterya, at ang mga spores ay nagpapanatili ng kanilang kakayahang mabuhay, ang isterilisasyon ay isinasagawa "fractionally" - tatlong araw sa isang hilera. Sa ganitong paraan, ang media na may carbohydrates, gatas, media na may gelatin ay isterilisado, iyon ay, mga substrate na hindi makatiis sa pag-init sa itaas 100 0 C, matagal na pagkakalantad sa singaw o tuyo na init.
5. Tyndalization- ito ay fractional sterilization sa isang paliguan ng tubig sa 56 ... 58 0 C para sa 5 ... 6 na araw: sa unang araw sila ay pinainit sa loob ng 2 oras, sa mga susunod na araw - para sa 1 oras. Ang pamamaraan ay ginagamit para sa isterilisasyon ng mga materyales na nawasak sa mga temperatura sa itaas 58...60 0 C - mga sangkap na naglalaman ng mga protina (serum ng dugo).
6. Pasteurisasyonay isang paraan ng hindi kumpletong isterilisasyon na ginagamit upang mapanatili ang nutritional value ng isang produktong pagkain, na maaaring mabawasan sa pamamagitan ng pagkulo. Ang produkto ay pinainit sa 80 0 C sa loob ng 30 minuto, at pagkatapos ay mabilis na pinalamig hanggang 4...8 0 C. Ang mabilis na paglamig ay humahadlang sa pagtubo ng spore at kasunod na paglaki ng bacterial.
7. Steam sterilization sa ilalim ng presyon (autoclaving). Ito ang pinakamabisang paraan ng isterilisasyon. Ang prinsipyo ng isterilisasyon ay batay sa katotohanan na ang purong puspos na singaw ng tubig sa mataas na presyon, condensing, ay nagpapataas ng temperatura sa loob ng autoclave sa itaas ng kumukulo. Sa pagtaas ng presyon ng singaw, ang temperatura sa silid ng isterilisasyon ay tumataas din nang naaayon: 50.6 kPa (0.5 atm.) - 110 ... 112 0 C, 101.3 kPa (1 atm.) - 120 ... 121 0 C, 151.9 kPa (1.5 atm.) - 124 ... 126 0 C, 202.6 kPa (2 atm.) - 132 ... 133 0 C. Ang disenyo at dami ng sterilization chamber ng autoclaves ay maaaring magkakaiba (pahalang at patayo), ngunit ang prinsipyo ng operasyon ay nananatiling pareho. Ang nutrient media na makatiis sa temperaturang higit sa 100 0 C, mga kagamitang babasagin na nakabalot sa papel, mga dressing, dressing gown (sa mga bisikleta) ay isterilisado sa isang autoclave. Bilang karagdagan, ang mga microbial culture, ginugol na nutrient media, ang mga pinggan ay nadidisimpekta. Ang mga mode ng pagpapatakbo ng autoclave ay nangangailangan ng patuloy na pagsubaybay. Para dito, ginagamit ang mga kemikal at biological na pamamaraan.
8. Isterilisasyon sa pamamagitan ng pagsasala . Ang materyal ay dumaan sa mga bacteriological filter. Ang pagsasala ay nauugnay sa mekanikal na pagpapanatili ng bakterya sa pamamagitan ng mga pinong buhaghag na mga filter at sa kapasidad ng adsorption ng materyal kung saan ginawa ang filter. Ang pagsasala ay karaniwang napapailalim sa mga likido na hindi makatiis sa pag-init. Mayroong mga filter:
· ceramic - ang mga ito ay ginawa mula sa kaolin o quartz sand;
· asbestos - Mga filter ng Seitz (mga plato mula sa pinaghalong asbestos na may selulusa);
· lamad - sila ay mukhang manipis na mga sheet ng puting papel, ang mga ito ay ginawa mula sa hemicellulose na ginagamot sa naaangkop na mga reagents, temperatura at pagpindot. Ang mga filter na ito ay nakikilala sa pamamagitan ng diameter at laki ng mga pores, may pinakatumpak na pagkakalibrate.
Ang sterility ng mga filtrate ay kinokontrol ng inoculation sa nutrient media na may kontrol sa temperatura.
9. Sterilization sa pamamagitan ng ultraviolet radiation. Sa laboratoryo, ang pinagmumulan ng ultraviolet radiation ay karaniwang mga germicidal lamp na ginagamit para sa air disinfection.
Sterilization sa pamamagitan ng ultrasound. Sa tulong ng ultrasound, tubig, gatas, ilang mga produkto, ang mga hilaw na balat ay isterilisado. Ang sterilizing effect ng ultrasound ay nauugnay sa pagkasira ng isang bacterial cell sa ilalim ng pagkilos ng cavitation cavities na lumabas sa cytoplasm.