Cultivarea, diferențierea și izolarea tipurilor individuale de microorganisme au devenit posibile numai cu utilizarea mediilor nutritive. Acestea sunt substanțe speciale care creează condiții favorabile pentru reproducerea și creșterea unui anumit tip de microbi și ciuperci, adică culturi pure, ceea ce deschide posibilitatea studierii proprietăților și efectelor acestora asupra organismului.
Astăzi, mediile nutritive sunt folosite atât în medicină, cât și în alte domenii, de exemplu, industria alimentară unde sunt folosite diverse tipuri microorganisme pentru a îmbunătăți calitatea alimentelor, pentru a crește durata de valabilitate, gustul și proprietăți aromatice. Astfel, culturile pure izolate prin folosirea mediilor nutritive sunt utilizate în producția de panificație, în industria vinului și a vodcii, la realizarea brânzeturilor și a produselor lactate, la producerea acizilor organici, la fermentarea și conservarea legumelor și fructelor, și în farmacologie.
Cu toate acestea, majoritatea cercetărilor microbiologice au loc în sectorul medical. De aceea, principalii cumpărători de substraturi sunt clinicile și laboratoarele.
Compania BioVitrum este un producător și furnizor de top de echipamente medicale, de diagnostic și de laborator, precum și consumabile. Unul dintre domeniile de activitate este producerea de medii nutritive pentru cultivarea și creșterea microorganismelor. Produsele companiei sunt fabricate din materii prime de înaltă calitate, care conțin componente din sânge de cal și oaie. Avantajul materialului sursă furnizat din Marea Britanie este condițiile speciale în care sunt crescute animalele. Hrana lor nu contine antibiotice, ceea ce asigura ca mediul de crestere este steril.
BioVitrum se oferă să cumpere medii nutritive de toate tipurile care îndeplinesc standardele europene.
Cerințe de mediu
Substraturile produse astăzi și utilizate pentru cultivarea, diferențierea și izolarea microorganismelor trebuie să îndeplinească anumiți indicatori:
- Valoare nutritivă . Mediul este vital pentru nutriție și satisfacerea nevoilor energetice ale culturilor cultivate. Și anume, conține vitamine, substanțe minerale și organice (naturale), microelemente incluse în compozitia celularași aminoacizi care activează producția de enzime și nu sunt produși în mod natural.
- Prezența ionilor de hidrogen. Deoarece microorganismele sunt capabile să se hrănească numai dacă membrana celulară este permeabilă, este necesar un echilibru optim al pH-ului pentru a-l asigura.
Pentru microbii patogeni, este necesar un mediu nutritiv ușor alcalin pentru agenții patogeni de tuberculoză, este potrivită o reacție slab acidă.
- Mediu tampon. Această proprietate asigură stabilitatea echilibrului pH-ului, neutralizând produșii de descompunere.
- Izotonicitatea este un indicator al presiunii în interiorul celulei și în mediu, care ar trebui să fie la același nivel pentru majoritatea microorganismelor.
- Sterilitatea mediului. Este important să excludem prezența microbilor străini care pot afecta creșterea culturii de interes.
Mediile trebuie să aibă umiditate, astfel încât mediile dense și uscate necesită o pregătire prealabilă. Mass-media trebuie să aibă caracteristici redox și transparență. Un astfel de indicator precum uniformitatea asigură posibilitatea creșterii diferitelor microorganisme.
Clasificare
Fiecare cultură necesită anumite condiții pentru reproducerea celulară abundentă, creștere intensivă și dezvoltare optimă, așa că este dificil să se creeze un mediu universal. În plus, în funcție de obiectivele cercetării, parametrii mediului nutritiv se modifică.
Astăzi, au fost create mai multe tipuri de media cu proprietăți diferite:
- Pe baza compoziției componentelor de pornire, acestea sunt clasificate în sintetice și naturale. Acestea din urmă sunt fabricate din materii prime vegetale sau animale. Pentru a reduce costurile, se folosesc produse nealimentare, cum ar fi făina de oase sau cheaguri de sânge coagulați. Cele sintetice sunt obținute din componente organice, adică naturale și minerale.
- Pe baza consistenței, mediile sunt împărțite în lichide, dense și semi-lichide. Densitatea este crescută prin adăugarea de gelatină sau agar-agar. Ultimul ingredient nu este un nutrient pentru microbi, sarcina sa este de a crea o densitate optimă. În același timp, temperatura de topire a agarului atinge 80-100 de grade, ceea ce face posibilă creșterea microorganismelor care trebuie să creeze condiții de seră pe mediile care o conțin. Gelatina este o proteină animală, astfel încât substraturile care o conțin pot fi folosite la temperatura camerei. Substanțele dense includ serul de sânge coagulat, albușurile de ou și cartofii. Unele sunt produse sub formă de pulberi și necesită dizolvarea și aducerea la consistența dorită înainte de utilizare.
- Compoziția mediilor nutritive poate fi simplă sau complexă. Primele sunt supele de carne peptoide, gelatina hrănitoare, ape peptoide. Al doilea tip, pe lângă componentele inițiale, include substanțe care favorizează creșterea anumitor bacterii. Există, de asemenea, medii speciale utilizate în cazul în care creșterea bacteriilor pe o substanță obișnuită nu este posibilă.
- Medii nutritive elective. Sunt folosite pentru a izola un anumit tip de bacterii prin inhibarea creșterii altora. Mediile lichide din această categorie sunt numite acumulative.
- Mediile de diagnostic diferențial sunt utilizate pentru a izola o cultură pe baza activității sale enzimatice. La transportul materialelor la locul de cercetare se folosesc substraturi de conservare.
Pregătirea mediilor
Precizia rezultatelor obținute depinde de calitatea mediului nutritiv, prin urmare, pe lângă respectarea rețetei, trebuie să respectați următoarele cerințe:
- Sterilitatea vaselor. În condițiile de producție, unde producția se realizează pe scară largă, mediile sunt gătite în cazane speciale. În laboratoare, atunci când este necesară obținerea unei cantități mici de medii de cultură, trebuie folosit smalț sau sticlă care nu eliberează acizi și alcalii. Toate rezervoarele sunt mai întâi spălate, clătite și uscate.
- Sticlăria nefolosită anterior se sterilizează în acid clorhidric, în care se lasă peste noapte, după care se clătește în conformitate cu regimul stabilit.
Procesul de preparare a mediilor nutritive în sine constă din următorii pași:
- Gătitul, care se efectuează fie pe foc și pe baie de apă (pentru condiții de laborator), fie în cazane și autoclave cu alimentare cu abur (la scară industrială).
- Setarea raportului optim al pH-ului necesită utilizarea de indicatori de hârtie, potențiometre și electrozi de sticlă.
- Limpezirea se realizează prin introducerea în substrat, bătută cu apă, albușului de ou sau ser de sânge, care în timpul procesului de gătire antrenează particule în suspensie în sediment.
- Mediile lichide pe bază de gelatină topită sunt supuse filtrării. În acest scop, se folosesc filtre umede din țesătură și hârtie. Purificarea substraturilor de agar devine semnificativ mai dificilă deoarece componenta principală se întărește rapid. Prin urmare, acest proces este adesea înlocuit cu decontare.
- Sterilizarea se efectuează pentru fiecare substrat la o anumită perioadă de timp și la temperatura necesară. Acești parametri sunt indicați în rețeta de preparare.
Etapa finală este ambalarea mediului nutritiv în recipiente - acestea sunt flacoane, eprubete, vase Petri. Vasul se umple doar 2/3 deoarece in timpul sterilizarii mediul creste in volum si poate ajunge la dop, ceea ce va afecta puritatea si proprietatile substratului.
Produsul este turnat folosind pâlnii, seringi, pipete sau alte dispozitive.
Fiecare vas este marcat. Pe vase se aplică numele produsului, se indică cantitatea și data producției.
Mediul finit trece prin mai multe etape de control. Primele teste de sterilitate se efectuează prin plasarea produsului într-un termostat.
Mediul de creștere este trimis la laboratoare pentru testare chimică, al căror scop este stabilirea nivelului exact al pH-ului.
Se efectuează controlul biologic, care constă în determinarea calităților nutritive ale mediului.
Tipuri de medii de cultură
Pe baza scopului lor, compozițiile de mediu nutritiv produse astăzi pot fi împărțite în următoarele categorii:
- Medii universale. Sunt potrivite pentru înmulțirea diferitelor tipuri de culturi.
- Medii selective sau selective. Folosit pentru a izola un tip de microorganism.
- Medii de diagnostic diferențial care fac posibilă distingerea bacteriilor după proprietățile lor enzimatice, adică produse de deșeuri.
- Medii speciale. Sunt folosite pentru cultivarea culturilor care nu se pot reproduce pe substraturi universale.
- Mediile selective diferențiale sunt utilizate pentru identificarea rapidă a bacteriilor.
- Compoziții medii nutritive semisintetice, care conțin componente de origine naturală.
Compania BioVitrum oferă o gamă largă de medii nutritive, care sunt furnizate atât în flacoane de diferite dimensiuni, cât și în formă finită în vase Petri. Acestea din urma sunt sigilate cu o folie de celuloza special dezvoltata, care asigura un mediu steril si o perioada de valabilitate de pana la 60 de zile.
Avantajul companiei BioVitrum este livrarea promptă, prețurile competitive și conformitatea cu standardele GOST. Toate compozițiile nutriționale ale mediului sunt produse în propriile noastre unități, echipate cu echipamente de înaltă tehnologie din materii prime Oxoid LTD de la un cunoscut producător britanic.
La compania BioVitrum puteți achiziționa 18 tipuri de produse prezentate în catalog, care sunt supuse controlului în mai multe etape. Produsele sunt furnizate cu un set complet de documentație și etichetare în limba rusă.
100 RUR bonus pentru prima comandă
Selectați tipul de lucrare Teză Lucrări de curs Rezumat Teză de master Raport de practică Articol Raport de revizuire Test Monografie Rezolvarea problemelor Plan de afaceri Răspunsuri la întrebări Munca creativă Eseu Desen Compoziții Traducere Prezentări Scriere Altele Creșterea unicității textului teză de doctorat Lucrări de laborator Ajutor online
Aflați prețul
În microbiologie, un mediu nutritiv este un mediu care conține diferiți compuși de compoziție complexă sau simplă care sunt utilizați pentru propagarea microorganismelor în laborator sau
conditiile industriale. Orice mediu nutritiv trebuie să respecte următoarele
cerințe: să conțină toți nutrienții necesari creșterii într-o formă ușor digerabilă; au umiditate, vascozitate, pH optime, sa fie izotonice, echilibrate cu tampon ridicat
recipient și, dacă este posibil, transparent. Sunt numite substanțe pe care celulele nu sunt capabile să le sintetizeze singure factori de crestere. Organisme care au nevoie de adăugarea lor auxotrofice prin conexiunile corespunzătoare. Un grup capabil să crească pe medii simple, prototrofic. Oligotrofic(pentru cei săraci), grupul opus pentru ei sunt bacteriile copiotrof– capabil să crească pe substraturi alimentare bogate.
După compoziție mediile nutritive se împart în naturalŞi sintetic. Mediile naturale sunt cele care constau din produse de origine vegetală sau animală care au o durată nedeterminată compozitia chimica. Exemplele sunt un amestec de produse de descompunere a proteinelor formate în timpul hidrolizei lor. Acțiunea enzimelor precum tripsina, pancreatina, papaina duce doar la hidroliza parțială (incompletă) a proteinelor, ducând la formarea peptone. Scopul principal al unor astfel de medii nutritive este izolarea, cultivarea, producerea de biomasă și întreținerea culturilor.
Mediile cu compoziție incertă includ și mediile semisintetic. Compuși cunoscuți sunt introduși într-un astfel de mediu în mod clar necesar; și se adaugă cantități mici de drojdie sau extract de porumb (sau orice alt produs natural) pentru a satisface nevoile de creștere necunoscute. Astfel de medii sunt adesea folosite în cazul cultivării industriale a obiectelor biologice pentru a obține produse metabolice.
Medii sintetice– acestea sunt medii de o anumită compoziție, reprezentate de pur compuși chimici, luate în concentrații și rapoarte precis specificate ale elementelor individuale.
Scopul principal al unor astfel de medii nutritive este de a studia caracteristicile fiziologiei și metabolismului.
microorganisme, izolarea recombinantelor genetice etc.
După scop: Medii elective asigura dezvoltarea unuia sau a unui întreg grup fiziologic de microorganisme. Diagnostic diferenţial mediile sunt utilizate pentru identificarea rapidă a speciilor de microorganisme strâns înrudite, pentru a determina identitatea speciei, în bacteriologia clinică. Principiul construirii mediilor de diagnostic diferenţial se bazează pe faptul că diferite tipuri bacteriile diferă unele de altele în activitatea biochimică și au un set diferit de enzime care descompun substraturile care alcătuiesc mediul nutritiv.
Compoziția d.-d. cuprinde: a) principalul mediu nutritiv care asigură proliferarea bacteriilor; b) un anumit substrat chimic, relația cu care este un semn de diagnostic pentru un microorganism dat; c) un indicator de culoare, o schimbare a culorii indică o reacție biochimică și prezența unui anumit sistem enzimatic în microorganismul studiat.
Prin consistență mediile pot fi lichid, semi-lichid,tare, friabil. Lichidele se obțin prin dizolvarea unui anumit set necesar de nutrienți în apă V-c, macro- și microelemente. Creșterea microorganismelor într-un mediu lichid poate avea loc în periodic (inchis) sistem, în acest caz, după inocularea mediului, nu există nicio adăugare sau îndepărtare a altor componente decât faza gazoasă. La flux (continuu) cultivarea se caracterizează printr-o aprovizionare constantă cu componente nutritive proaspete la o rată egală cu rata de îndepărtare a mediului ( sistem deschis). Prepararea mediilor solide se realizează prin adăugarea anumitor compactoare (agar, gelatină, silicagel, caragenan) la mediile lichide. Mediile în vrac sunt folosite în microbiologia industrială pentru cultivarea anumitor producători de compuși fiziologic activi. Astfel de medii includ, de exemplu, mei fiert și tărâțe.
Inclus Mediul șuierat include fondul principal (peptonă și K2HPO4), un indicator (albastru de bromotimol, violet de bromocrezol, Andrede) și unul dintre carbohidrații sau alcoolii studiati. Există mici și
rând mare pestriț de Hiss. Seria mică Hiss include următorii carbohidrați și alcooli: glucoză, zaharoză, lactoză, maltoză și manitol. Seria mare pestriță a lui Hiss include, pe lângă cele care formează o serie mică, și alți carbohidrați și alcooli, de exemplu arabinoză, ramnoză, sorbitol, dulcit etc. Mediile Hiss pot fi utilizate în stare lichidă sau semi-lichidă (0 5% agar)
Eliberarea produselor metabolice se înregistrează prin modificări ale pH-ului mediului. De exemplu, dacă mediul Hiss conține indicatorul albastru bromotimol, atunci culoarea acestuia se va schimba în funcție de pH astfel: pH = 7,0 - verde; pH > 7,0 – albastru; pH< 7,0 – желтый.
microorganism cultivare anaerobă microbiologie
Pentru cultivarea microorganismelor se folosesc medii nutritive de diferite compoziții, care trebuie să conțină toate substanțele necesare creșterii. Nevoile nutriționale ale microorganismelor sunt extrem de diverse și sunt determinate de caracteristicile metabolismului lor. Prin urmare, nu există medii universale la fel de potrivite pentru creșterea tuturor microorganismelor.
În sensul larg al cuvântului, mediul nutritiv trebuie să îndeplinească următoarele cerințe:
1) permite accesul cuștii sursa de energie. Pentru unele organisme (fototrofe) o astfel de sursă este lumină, pentru altele este un substrat organic (chemoorganotrofe) sau anorganic (chemolitotrofe).
2) conțin tot ce este necesar componente pentru implementarea proceselor de construcţie într-o cușcă. Mai mult, abilitățile de sinteză ale microorganismelor pot varia de la utilizarea dioxidului de carbon ca unică sursă de carbon (autotrofe) până la nevoia de compuși cu carbon mai redus - acizi, alcooli, carbohidrați etc. (heterotrofe).
În sensul restrâns al cuvântului orice mediu nutritiv artificial trebuie să îndeplinească următoarele cerințe : contin toti nutrientii necesari cresterii intr-o forma usor digerabila; să aibă umiditate optimă, vâscozitate optimă, pH optim (optim pentru un anumit microorganism), să fie izotonice, echilibrate cu o capacitate tampon mare și, dacă este posibil, transparente.
Mediu nutritivîn microbiologie, mediile sunt numite medii care conțin diverși compuși de compoziție complexă sau simplă care sunt utilizați pentru propagarea microorganismelor, cultivarea și conservarea acestora în condiții de laborator sau industriale.
Alegerea compoziției mediului nutritiv depinde în mare măsură de obiectivele experimentului sau procesului industrial.
Există următoarea clasificare a mediilor nutritive:
· După compoziție mediile nutritive se împart în natural, sintetice și semisintetice. Ele pot fi, de asemenea, clasificate ca medii anumitŞi nesigur compoziţie. Natural se numesc medii care constau din produse de origine vegetala sau animala care au compoziție chimică incertă. Exemple de medii nutritive de acest tip sunt mediile care sunt un amestec de produse de degradare a proteinelor (cazeina, mușchii mamiferelor) formate în timpul hidrolizei lor. Mediile nutritive cu compoziție incertă includ și mediile obținute din materii prime vegetale: agar de cartofi, agar de roșii, decocturi de cereale, drojdie, must de bere, infuzii de fân și paie etc. Scopul principal al acestor medii nutritive este izolarea, cultivarea, producția. a biomasei şi menţinerea culturilor microbiene.
La numărul de medii compoziție nedeterminată includ medii semisintetic. Compuși cunoscuți sunt introduși într-un astfel de mediu în mod clar necesar; și se adaugă cantități mici de drojdie sau extract de porumb (sau orice alt produs natural) pentru a satisface nevoile de creștere necunoscute. Astfel de medii sunt adesea folosite în cazul cultivării industriale a obiectelor biologice pentru a obține produse metabolice, de exemplu, pentru a obține aminoacizi, antibiotice, vitamine etc.
Medii sintetice- acestea sunt medii o anumită compoziție, reprezentată de compuși chimici puri luați în concentrații și rapoarte precis specificate ale elementelor individuale. Componentele necesare unor astfel de medii sunt compuși anorganici(săruri) și substanțe care conțin carbon și azot (reprezentanții tipici sunt glucoza și (NH 4) 2 SO 4. Adesea adăugate la astfel de medii soluții tamponși compuși chelatori. Scopul principal astfel de medii nutritive - studierea caracteristicilor fiziologiei și metabolismului microorganismelor, izolarea recombinantelor genetice etc.
· După scop mediile sunt împărțite în de bază, electiv (selectiv)Şi diagnostic diferenţial. LA principal includ medii utilizate pentru creșterea multor bacterii. Acestea sunt bulion nutritiv și agar nutritiv. Astfel de medii servesc ca bază pentru pregătirea unor medii de cultură mai complexe. Medii elective asigura dezvoltarea preferenţială a unuia sau a unui întreg grup fiziologic de microorganisme. De exemplu, pentru a izola stafilococi, în mediu poate fi adăugată clorură de sodiu la o concentrație de 7,5%. La această concentrație, creșterea altor bacterii este inhibată. Mediile elective sunt utilizate în prima etapă a izolării unei culturi pure de bacterii, adică. la primirea unei culturi de îmbogăţire.
Medii de diagnostic diferențial utilizat pentru identificarea rapidă a speciilor de microorganisme strâns înrudite, pentru determinarea speciilor, în bacteriologia clinică etc. Compoziția mediului de diagnostic diferenţial cuprinde: a) principalul mediu nutritiv care asigură proliferarea bacteriilor; b) un anumit substrat chimic, relația cu care este un semn de diagnostic pentru un anumit microorganism; c) un indicator de culoare, o schimbare a culorii indică o reacție biochimică și prezența unui anumit sistem enzimatic în microorganismul studiat. De exemplu, mediul Endo permite distingerea clonelor care fermentează lactoza de clonele care nu au această proprietate.
· Prin consistență mediile pot fi lichid, semi-lichid, solid, granular. Medii de cultură lichide obtinut prin dizolvarea unui anumit set necesar de nutrienti, macro si microelemente in apa. În compoziție, acestea pot fi fie naturale, fie sintetice.
· Suport media cu stare solidă sub formă de geluri dense au fost folosite în bacteriologie încă de pe vremea lui R. Koch. Cel mai important avantaj al utilizării mediilor solide este că pot crește microorganisme sub formă de colonii formate din celule individuale ale populației. Prepararea mediilor nutritive solide se realizează prin adăugarea anumitor substanțe de etanșare la mediile lichide, care pot fi agar, gelatină, silicagel sau caragenan.
Mediu semi-lichid conțin un agent de gelifiere în concentrație scăzută (0,3 - 0,7%) și au o consistență moale asemănătoare jeleului. Astfel de medii sunt potrivite pentru studiul motilității celulare și chemotaxia, cultură microaerofile.
În vrac mediile sunt o masă de materii prime mai mult sau mai puțin zdrobite și umezite (de obicei vegetale). Scopul lor principal este de a le folosi în industria alimentară (producerea de sos de soia sau vodcă de orez), agricultură(furaje însilozate), etc.
În practica bacteriologică, cel mai des se folosesc medii nutritive uscate, care se obțin la scară industrială - hidrolizate triptice de produse nealimentare ieftine (deșeuri de pește, făină de carne și oase, cazeină tehnică) cu adaos de agar. Mediile uscate sunt materii prime destul de ieftine, pot fi depozitate pentru o lungă perioadă de timp, sunt convenabile pentru transport, au o compoziție relativ standard și, pe baza lor, se prepară rapid și ușor medii nutritive.
Medii pentru creșterea microbilor anaerobi.Supa de ficat de carne-peptonă din China - Tarozzi (MPPB). Ficatul proaspăt sau congelat (de preferință de la bovine) este tăiat în bucăți mici, turnat cu o cantitate egală de apă de la robinet, fiert timp de o oră, filtrat prin vată și adăugat la 1 parte din extractul rezultat 3 părți bulion de carne-peptonă. Amestecul este încălzit până la fierbere, se adaugă sare de masă pură chimic (1,25 g la 1 litru de mediu) și pH-ul este ajustat la 7,6-7,8, apoi se fierbe timp de 15 minute și se filtrează printr-un filtru de hârtie sau de bumbac umezit. Bucățile tăiate fin (1,5-2 g) de ficat se adaugă în bulionul filtrat, în proporție de 100 g de ficat la 1 litru de bulion (ficatul este mai întâi curățat de pelicule și spălat cu apă). Câteva astfel de bucăți sunt plasate într-o eprubetă, se toarnă 7-10 ml de bulion într-o coloană înaltă, iar pe suprafața sa se adaugă vaselină sau ulei de parafină.
Bulionul cu bucăți de ficat se sterilizează sub o presiune în exces de 0,1 MPa V timp de 30 de minute. Pentru a elimina oxigenul din eprubetă înainte de inoculare, mediul se fierbe timp de 10 minute și se răcește rapid cu apă.
Agar semisolid pentru anaerobi. La MPB se adaugă 0,25-0,75% agar-agar și 1% glucoză; pH-ul mediului este de 7,4. Mediul este turnat în eprubete în coloane înalte. Sterilizați cu abur care curge fracționat timp de 15-20 de minute timp de 3 zile.
Medii pentru creșterea bacteriilor de acid lactic.Lapte (intreg). Se încălzește până la fierbere. Se toarnă într-o sticlă tub și se pune într-un loc rece timp de 10-20 de ore pentru a lăsa crema să se aseze. După acest timp, partea degresată a laptelui se toarnă prin robinetul tubului în eprubete și se închide cu dopuri de bumbac. Sterilizați fracționat la 100°C timp de trei zile timp de 20 de minute sau la 112°C o dată timp de 30 de minute.
Lapte degresat. Pentru a obține lapte degresat, laptele integral se separă și apoi se procedează în același mod ca atunci când se folosește lapte integral.
Lapte hidrolizat (după Bogdanov). Se ia 1 litru de fiert Şi lapte degresat răcit la 45° C, setați pH-ul la 7,6-7,8, adăugați 0,5 g de pudră de pancreatină (pre-diluată într-o cantitate mică apă caldă) sau 2-3 g pancreas zdrobit și după câteva minute 5 ml cloroform. După aceasta, sticla este agitată bine, închisă ermetic cu un dop de plută și plasată timp de 3 zile într-un termostat la o temperatură de 40 ° C cu agitarea zilnică a lichidului. După perioada specificată, pentru a elimina cloroformul, sticla se deschide, lichidul se filtrează și se diluează de 2-3 ori cu apă de la robinet. Ajustați pH-ul mediului la 7,0-7,2 și sterilizați.
Agar cu lapte hidrolizat. La laptele hidrolizat se adaugă agar 1,5-2%, se topește, se toarnă în eprubete și se sterilizează la o presiune în exces de 0,1 MPa V timp de 15 minute. Bacilii acidului lactic cresc bine pe acest mediu.
Agar cu zer. Pentru 100 ml de apă de la robinet, se iau 7,5 g de agar, se fierb până se dizolvă complet, se adaugă apă la volumul inițial (adică într-un volum egal cu volumul de apă evaporată), se adaugă 400 ml de zer pre-preparat, se expune la curgere. gătiți la abur timp de 30 de minute, se filtrează printr-un strat de vată, se toarnă în eprubete Şi sterilizați sub presiune de 0,05 MPa timp de 30 de minute.
Miercuri de varză. 200 g de varză tocată (sau lucernă) se toarnă în 100 ml apă și se fierb într-o cratiță timp de 10 minute, se stoarce printr-un strat dublu de tifon. Lichidul rezultat este filtrat și diluat de 2 ori cu apă de la robinet. Se adaugă 2% glucoză și 1% peptonă, se toarnă în eprubete și se sterilizează la trei presiuni în exces de 0,05 MPa timp de 15 minute.
Mediu de creștere a drojdiei osmofilă. Adăugați 200 g de miere preîncălzită, 1 g de difosfat de potasiu, 0,5 g de sulfat de magneziu, 0,5 g de tartrat de amoniu, 0,1 g de clorură de sodiu și 0,1 g de clorură de potasiu la aproximativ 1 litru de apă distilată. Toate componentele sunt amestecate și sterilizate sub o presiune în exces de 0,1 MPa timp de 20 de minute.
Mediu de cultură halofil. Utilizați medii obișnuite de carne-peptonă cu adăugarea de sare de masă 10-15 până la 20-30%. În plus, atunci când se produc medii nutritive solide, procentul de agar este de asemenea crescut. Sterilizarea se efectuează sub o presiune în exces de 0,1 MPa timp de 20 de minute.
Medii de îmbogățire. Mediul lui Muller. La 4,5 g de cretă pură chimic, sterilizată în prealabil cu căldură uscată, se adaugă 90 ml MPB și se sterilizează sub o presiune în exces de 0,1 MPa timp de 20 de minute. Se prepară: a) soluție de hiposulfit (50 g de hiposulfit cristalin pur se toarnă la 100 ml cu apă distilată, se sterilizează cu abur curgător timp de 30 de minute); b) soluție de iod (se toarnă 20 g iod metalic și 25 g iodură de potasiu în 100 ml apă distilată). Înainte de însămânțare, în bulionul cu cretă se adaugă steril 10 ml soluție de hiposulfit și 2 ml soluție de iod. Agitați amestecul pe măsură ce se adaugă fiecare ingredient. Se toarnă în eprubete sau baloane sterile.
Miercuri Killian. La 100 ml de MPB obișnuit se adaugă steril 1 ml înainte de utilizare soluție apoasă(1:1000) verde strălucitor.
Cercetarea asupra bacteriilor necesită o muncă meticuloasă cu numeroase echipamente și instrumente. Pentru ca microorganismele să se înmulțească cât mai repede posibil în condiții de laborator și să poată menține funcțiile normale de viață, se folosesc medii nutritive speciale. Compoziția și condițiile biofizice ale acestora sunt potrivite pentru creșterea activă a unei culturi bacteriene.
Medii nutritive. Microbiologie și alte aplicații
Coloniile de bacterii sunt crescute în condiții de laborator pe vase Petri umplute cu conținut de gelatină sau semi-lichid. Acestea sunt medii nutritive, a căror compoziție și proprietăți sunt cât mai apropiate de cele naturale pentru creșterea de înaltă calitate a culturii.
De exemplu, un astfel de mediu selectiv este potrivit doar pentru reproducerea Escherichia coli. Apoi, de la însămânțarea multor bacterii pe un vas Petri, vom vedea doar colonii din aceeași E. coli și nu mai mult. Înainte de a începe munca, este necesar să aveți o bună cunoaștere a metabolismului bacteriei studiate pentru a o selecta cu succes dintr-un amestec de alte specii.
Medii nutritive solide, semi-lichide și lichide
Bacteriile pot fi cultivate nu numai pe substraturi solide. Mediile nutritive diferă în starea de agregare, care depinde de compoziție în timpul fabricării. Inițial, toate au o consistență lichidă, dar când se adaugă gelatină sau agar într-un anumit procent, amestecul se solidifică.
Mediile de cultură lichide se găsesc de obicei în eprubete. Dacă devine necesară creșterea bacteriilor în astfel de condiții, adăugați o soluție cu o probă de cultură și așteptați 2-3 zile. Rezultatul poate fi diferit: se formează un precipitat, apare o peliculă, fulgi mici plutesc sau se formează o soluție tulbure.
Mediul nutritiv solid este adesea folosit în cercetarea microbiologică pentru a studia proprietățile coloniilor bacteriene. Astfel de medii sunt întotdeauna transparente sau translucide, astfel încât este posibil să se determine corect culoarea și forma culturii de microorganisme.
Prepararea mediilor de cultură
Substraturile precum amestecurile de carne-peptonă pe bază de bulion, gelatină sau agar se prepară foarte ușor. Dacă trebuie să faceți un substrat solid sau semi-lichid, adăugați 2-3% sau, respectiv, 0,2-0,3% gelatină sau agar în lichid. Ele joacă un rol major în întărirea amestecului, dar nu sunt o sursă de nutrienți. Astfel, se obțin medii nutritive care sunt potrivite pentru creșterea culturilor bacteriene.